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紅豆樹組織培養(yǎng)方法

閱讀：997發(fā)布：2024-02-19

專利匯可以提供紅豆樹組織培養(yǎng)方法專利檢索，專利查詢，專利分析的服務(wù)。并且紅豆樹組織培養(yǎng)方法，屬于組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域。其具體包括1）外植體選擇；2）外植體脫菌；3）初代和繼代培養(yǎng)；4）生根培養(yǎng)；5）煉苗移栽；6）圃地管理。上述的紅豆樹組織培養(yǎng)方法，設(shè)計合理，通過外植體的合理選擇；增殖和繼代培養(yǎng)基的選擇、增殖和繼代培養(yǎng)條件的控制；生根培養(yǎng)基的選擇和生根條件的控制以及煉苗條件的控制，使得紅豆樹組培苗成活率達(dá)到85%以上，煉苗移栽后苗木適應(yīng)性較強，可大田移栽，具有廣闊的市場前景。，下面是紅豆樹組織培養(yǎng)方法專利的具體信息內(nèi)容。

1.紅豆樹組織培養(yǎng)方法，其特征在于包括以下工藝步驟：
1）外植體選擇：獲取紅豆樹優(yōu)樹根際帶芽萌條或根蘗苗經(jīng)移栽促萌得到的帶芽萌條作為外植體，所述的紅豆樹優(yōu)樹為天然林或人工林中樹干通直，材性良好，且易促萌的紅豆樹優(yōu)株，所述的帶芽萌條為4～10月中晴天2～3天后的上午9～10點選取的帶芽萌條，所述的紅豆樹優(yōu)樹根際帶芽萌條為促萌的樹干基部上生長至3～6cm尚未木質(zhì)化的嫩枝，所述的根蘗苗為3～5年生，地徑1cm以上、高60cm以上的根蘗苗；
2）外植體脫菌：帶芽萌條經(jīng)清水沖洗0.5h后，在超凈工作臺上用75%的酒精浸泡30s，再用0.1%升汞溶液浸泡8～10min，最后用無菌水沖洗4～5次，然后用無菌濾紙吸干外植體表面水分，備用；
3）初代和繼代培養(yǎng)：將外植體萌芽條切成1～2cm的小段，保留1～2個小芽，豎直插入誘導(dǎo)培養(yǎng)基MS+BA 0.5 mg/L+ NAA 0.05 mg/L中進(jìn)行初代增殖培養(yǎng)；待萌芽后轉(zhuǎn)接入增殖培養(yǎng)基MS+BA 2.0 mg/L+ NAA 0.1 mg/L 中進(jìn)行繼代增殖培養(yǎng)；
初代增殖培養(yǎng)條件在1500 lux弱光下進(jìn)行；繼代增殖培養(yǎng)溫度為26±2℃，光照時間為12h/d，光強為2000～3000 lux，濕度為60～70%；
4）生根培養(yǎng)：待增殖培養(yǎng)45天后，先將組培苗在1/2MS+IBA 0.2 mg/L的培養(yǎng)基中培養(yǎng)5天，再轉(zhuǎn)入1/2MS進(jìn)行培養(yǎng)；
5）煉苗移栽：生根培養(yǎng)50天，苗高5～6cm、根長在4cm，有2～3條粗壯的白色根，即可進(jìn)行煉苗；組培生根苗先在培養(yǎng)室內(nèi)自然培養(yǎng)1～2周后再移栽至溫室大棚內(nèi)，得到幼苗；
煉苗移栽具體包括：
a）基質(zhì)配比：按黃心土：細(xì)沙：草木灰：珍珠巖或蛭石重量比為4：3：2：1進(jìn)行配料，或按草炭：椰糠：谷殼：珍珠巖或蛭石重量比為4：3：2：1進(jìn)行配料；
b）基質(zhì)殺毒：移栽的前一天用質(zhì)量濃度0.3%的高錳酸鉀溶液淋透消毒；
c）移栽管理：移栽時控制溫室大棚的透光率低于30％、移栽前半個月控制濕度在
95％，后期控制濕度在85%以上、溫度不低于16℃；移栽后一個月，見有新葉長出，每周噴1次N:P:K為1：1：1的液體復(fù)合肥，液體復(fù)合肥質(zhì)量濃度在1/1000，進(jìn)行葉面噴施或根部澆灌，隨后逐漸將透光率從30%增加到70～80%，濕度從85%降低至60～70%，并移至露天煉苗場繼續(xù)煉苗；
6）圃地管理：幼苗移至露天圃地?zé)捗?，圃地溫度不?2℃，不高于35℃，早晚澆水，并保持濕度在85%以上。
2.如權(quán)利要求1所述的紅豆樹組織培養(yǎng)方法，其特征在于所述的步驟c）中移栽后期控制溫度在16～32℃之間。

說明書全文

紅豆樹組織培養(yǎng)方法

技術(shù)領(lǐng)域

[0001] 本發(fā)明屬于組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及紅豆樹組織培養(yǎng)方法。

背景技術(shù)

[0002] 紅豆樹(Ormosia hosiei et Wils )別名鄂西紅豆、花梨木、花櫚木，蝶形花科紅豆樹屬常綠或半落葉喬木，為我國特有樹種，國家Ⅱ級保護(hù)珍稀瀕危植物，自然分布于福建、浙江、江西、江蘇、湖北、湖南、陜西、四川、貴州等省，多生于海拔400-650m的丘陵、河邊或山谷常綠闊葉林中。紅豆樹以其鮮紅艷麗的種子、優(yōu)質(zhì)的木材著稱于世，具有極高的材用、景觀和森林文化價值。木材光滑堅硬，紋理美麗，不經(jīng)油漆卻形同墨玉，因而與紅木齊3
名，是我國珍貴鄉(xiāng)土用材之一，目前市場價達(dá)2萬元/m 以上；其樹冠濃蔭覆地，樹姿優(yōu)雅清秀，枝葉翠綠發(fā)亮，也是優(yōu)良的庭院綠化樹種。但現(xiàn)存紅豆樹天然資源稀少，結(jié)實年齡很遲且不穩(wěn)定，一般在35年生左右才開花結(jié)實，結(jié)果盛期在50年生以后，而且通常需間隔3-5年開花結(jié)果一次，極少連年開花坐果，種子傳播擴(kuò)散和自然繁衍能力差，種子來源少，種苗緊缺，制約了紅豆樹的規(guī)模發(fā)展。20世紀(jì)70-80年代，福建省建甌水西、邵武衛(wèi)閩、三明辛口等多個國有林場先后開展了小規(guī)模營造紅豆樹人工片林，但因使用種子苗造林，其林木個體間在樹高、胸徑、枝下高、通直度及心材率等分化與變異程度大，嚴(yán)重影響紅豆樹人工林高效栽培。開展優(yōu)良單株的選擇并采取組織培養(yǎng)等無性繁殖技術(shù)培育優(yōu)質(zhì)苗木，對高效保育及可持續(xù)利用珍稀瀕危紅豆樹資源具有重要的理論意義與實際應(yīng)用價值。蝶形花科樹種已見檀屬的海南降香黃檀的離體培養(yǎng)和植株再生(朱靖杰，2005)，有關(guān)紅豆樹的組織培養(yǎng)技術(shù)尚未見報道，僅見姚軍等(2007)對同科、同屬的花櫚木，采用種子無菌萌發(fā)獲得的帶葉莖段，進(jìn)行組織培養(yǎng)和快速繁殖研究的報道。因此，我們對其進(jìn)行了組織培養(yǎng)技術(shù)研究，以期探索出一條通過組織培養(yǎng)的方法大量繁殖獲取紅豆樹苗木的方法，滿足市場需求。

發(fā)明內(nèi)容

[0003] 針對現(xiàn)有技術(shù)存在的問題，本發(fā)明的目的在于設(shè)計提供紅豆樹組織培養(yǎng)方法的技術(shù)方案。
[0004] 所述的紅豆樹組織培養(yǎng)方法，其特征在于包括以下工藝步驟：
[0005] 1）外植體選擇：獲取紅豆樹優(yōu)樹根際帶芽萌條或根蘗苗經(jīng)移栽促萌得到的帶芽萌條作為外植體；
[0006] 2）外植體脫菌：帶芽萌條經(jīng)清水沖洗0.5h后，在超凈工作臺上用75%的酒精浸泡30s，再用0.1%升汞溶液浸泡8～10min，最后用無菌水沖洗4～5次，然后用無菌濾紙吸干外植體表面水分，備用；
[0007] 3）初代和繼代培養(yǎng)：將外植體萌芽條切成1～2cm的小段，保留1～2個小芽，豎直插入誘導(dǎo)培養(yǎng)基MS+BA 0.5 mg/L+ NAA 0.05 mg/L中進(jìn)行初代增殖培養(yǎng)；待萌芽后轉(zhuǎn)接入增殖培養(yǎng)基MS+BA 2.0 mg/L+ NAA 0.1 mg/L 中進(jìn)行繼代增殖培養(yǎng)；
[0008] 初代增殖培養(yǎng)條件在1500 lux弱光下進(jìn)行；繼代增殖培養(yǎng)溫度為26±2℃，光照時間為12h/d，光強為2000～3000 lux，濕度為60～70%；
[0009] 4）生根培養(yǎng)：待增殖培養(yǎng)45天后，可將組培苗轉(zhuǎn)移入生根培養(yǎng)基1/2MS+IBA 0.2 mg/L中，或采用組培苗先在1/2MS+IBA 0.2 mg/L的培養(yǎng)基中培養(yǎng)5天，再轉(zhuǎn)入1/2MS進(jìn)行培養(yǎng)；
[0010] 5）煉苗移栽：生根培養(yǎng)50天，苗高5～6cm、根長在4cm，有2～3條粗壯的白色根，即可進(jìn)行煉苗；組培生根苗先在培養(yǎng)室內(nèi)自然培養(yǎng)1～2周后再移栽至溫室大棚內(nèi)，得到幼苗；
[0011] 6）圃地管理：幼苗移至露天圃地?zé)捗?，圃地溫度不低?2℃，不高于35℃，早晚澆水，并保持濕度在85%以上。
[0012] 所述的紅豆樹組織培養(yǎng)方法，其特征在于所述的步驟1）中紅豆樹優(yōu)樹為天然林或人工林中樹干通直，材性良好，且易促萌的紅豆樹優(yōu)株。
[0013] 所述的紅豆樹組織培養(yǎng)方法，其特征在于所述的步驟1）中帶芽萌條為4～10月中晴天上午9～10點選取的帶芽萌條，優(yōu)選為以連續(xù)晴天2～3天后的上午9～10點選取的帶芽萌條。
[0014] 所述的紅豆樹組織培養(yǎng)方法，其特征在于所述的步驟1）中帶芽萌條為促萌的樹干基部上生長至3～6cm尚未木質(zhì)化的嫩枝。
[0015] 所述的紅豆樹組織培養(yǎng)方法，其特征在于所述的步驟1）中根蘗苗為3～5年生，地徑1cm以上、高60cm以上的根蘗苗。
[0016] 所述的紅豆樹組織培養(yǎng)方法，其特征在于所述的步驟5）中煉苗移栽具體包括：
[0017] 1）基質(zhì)配比：按黃心土：細(xì)沙：草木灰：珍珠巖或蛭石重量比為4：3：2：1進(jìn)行配料，或按草炭：椰糠：谷殼：珍珠巖或蛭石重量比為4：3：2：1進(jìn)行配料；
[0018] 2）基質(zhì)殺毒：移栽的前一天用質(zhì)量濃度0.3%的高錳酸鉀溶液淋透消毒；
[0019] 3）移栽管理：移栽時控制溫室大棚的透光率低于30％、移栽前半個月控制濕度在95％，后期控制濕度在85%以上、溫度不低于16℃；移栽后一個月，見有新葉長出，每周噴1次N:P:K為1：1：1的液體復(fù)合肥，液體復(fù)合肥質(zhì)量濃度在1/1000，進(jìn)行葉面噴施或根部澆灌，隨后逐漸將透光率從30%增加到70～80%，濕度從85%降低至60～70%，并移至露天煉苗場繼續(xù)煉苗。
[0020] 所述的紅豆樹組織培養(yǎng)方法，其特征在于所述的步驟3）中移栽后期控制溫度在16～32℃之間。
[0021] 上述的紅豆樹組織培養(yǎng)方法，設(shè)計合理，配方和操作簡單，通過外植體的合理選擇；增殖和繼代培養(yǎng)基的選擇、增殖和繼代培養(yǎng)條件的控制；生根培養(yǎng)基的選擇和生根條件的控制以及煉苗條件的控制，使得紅豆樹組培苗成活率達(dá)到85%以上，煉苗移栽后苗木適應(yīng)性較強，可大田移栽，具有廣闊的市場前景。

具體實施方式

[0022] 以下結(jié)合具體實施例來進(jìn)一步說明本發(fā)明。
[0023] 實施例1：紅豆樹組織培養(yǎng)方法
[0024] 1）外植體選擇：獲取樹干通直，材性良好，易促萌的紅豆樹優(yōu)樹根際帶芽萌條或根蘗苗經(jīng)移栽促萌得到的帶芽萌條作為外植體。
[0025] A、根蘗苗獲得具體包括以下步驟：
[0026] a、直接挖取帶根的優(yōu)樹根蘗苗
[0027] 根蘗苗在3-5年生，地徑1cm以上、高60cm以上，即可挖??；
[0028] b、根蘗苗移栽至背風(fēng)向陽、排水良好、土壤肥力中上的圃地進(jìn)行培養(yǎng)；
[0029] c、成活后，截干促萌。
[0030] B、帶芽萌條的選擇
[0031] 從促萌的樹干基部選擇生長至3-6cm尚未木質(zhì)化的嫩枝，此時小枝和腋芽均光滑無毛，及時剪去葉子、留葉柄。這是外殖體誘導(dǎo)成功與否的關(guān)鍵點，進(jìn)而取其帶腋芽的莖段作為組培外殖體。
[0032] C、帶芽萌條的取材時間
[0033] 4-10月，夏秋季萌條生長旺季采集為佳，以晴天的上午9-10點為佳，但以連續(xù)晴天2-3天后的上午9-10點取材為最佳。
[0034] 2）外植體脫菌：帶芽莖段經(jīng)清水沖洗0.5h后，在超凈工作臺上用75%的酒精浸泡30s，再用0.1%升汞溶液浸泡8～10min（時間長短視材料木質(zhì)化程度而定），最后用無菌水沖洗4-5次，然后用無菌濾紙吸干外植體表面水分，備用。
[0035] 3）增殖和繼代培養(yǎng)：將外植體萌芽條切成1～2cm的小段，保留1～2個小芽，豎直插入誘導(dǎo)培養(yǎng)基MS+BA 0.5 mg/L+ NAA 0.05 mg/L中。待萌芽后轉(zhuǎn)接入增殖培養(yǎng)基MS+BA2.0 mg/L+ NAA 0.1 mg/L 中。紅豆樹外植體初代培養(yǎng)不易產(chǎn)生褐化，培養(yǎng)條件可在1500 lux弱光下。繼代增殖培養(yǎng)溫度為26±2℃，光照時間為12h/d，光強為2000～3000 lux，濕度為60～70%。弱光下芽苗切口容易產(chǎn)生愈傷組織、影響生根率，培養(yǎng)基pH值應(yīng)在5.6～
5.8，光照時間控制在每天12h。
[0036] 4）生根培養(yǎng)：待增殖培養(yǎng)45天后，可將組培苗轉(zhuǎn)移入生根培養(yǎng)基1/2MS+IBA 0.2 mg/L中，生根率達(dá)82%或采用小苗先在1/2MS+IBA 0.2 mg/L的培養(yǎng)基中培養(yǎng)5天，再轉(zhuǎn)入1/2MS，不僅生根率高，而且根系發(fā)育良好。
[0037] 5）煉苗移栽：生根培養(yǎng)50天，苗高5～6cm、根長在4cm左右，有2～3條粗壯的白色根，即可進(jìn)行煉苗。組培生根苗先在培養(yǎng)室內(nèi)自然培養(yǎng)1周左右后再移栽至溫室大棚內(nèi)。
[0038] 移栽前準(zhǔn)備
[0039] 基質(zhì)配比：
[0040] A．黃心土：細(xì)沙：草木灰：珍珠巖或蛭石重量比為4：3：2：1
[0041] B. 草炭：椰糠：谷殼：珍珠巖或蛭石重量比為4：3：2：1
[0042] 以上兩種均可取得移栽高成活率，但B的成本高。
[0043] 基質(zhì)殺毒：移栽前的基質(zhì)消毒：移栽的前一天用0.3%左右的高錳酸鉀溶液淋透消毒。
[0044] 移栽后管理
[0045] 時間約為1個月，移栽后應(yīng)加強水分、光照、溫度、濕度、通風(fēng)透氣管理，盡量縮小大棚光、溫、濕度與瓶內(nèi)條件的差距是移栽成活的關(guān)鍵。其中透光率低于30％、移栽前半個月濕度在95％，后期可在85%以上、溫度不低于16℃，最好控制在16～32℃之間。栽后注意水分管理，早晚澆水，經(jīng)常噴霧，同時每周可定期噴施多菌靈或其它抗菌素，一個月后，見
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