技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本
發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種離體條件下促進(jìn)非花期獼猴桃成花的方法。
背景技術(shù)
[0002]
植物單倍體(雙單倍體)技術(shù)是一種快速而有效的種質(zhì)創(chuàng)新方法，可通過花藥(小孢子)培養(yǎng)的方法實(shí)現(xiàn)，多用于十字花科、禾本科和
煙草等經(jīng)濟(jì)作物，但在木本植物諸如各類果樹中應(yīng)用較少。果樹作為一種木本植物，其幼年期(童期)較長(zhǎng)，成年后一年開花一次；不能像小麥和
水稻等草本植物那樣實(shí)現(xiàn)一年多季種植并成花。這嚴(yán)重阻礙基于單倍體(雙單倍體)技術(shù)的果樹種質(zhì)創(chuàng)新
進(jìn)程。
[0003] 目前，單倍體(雙單倍體)技術(shù)在獼猴桃種質(zhì)創(chuàng)新中基本未開展。獼猴桃屬植物現(xiàn)有54個(gè)種和21個(gè)變種，其中毛花獼猴桃可一年間不斷地現(xiàn)蕾、開花、結(jié)果，其余獼猴桃種如中華獼猴桃和美味獼猴桃作為市場(chǎng)應(yīng)用價(jià)值極高的栽培種，也是育種學(xué)家種質(zhì)創(chuàng)新的主要對(duì)象，花期一年僅一次，即使是毛花獼猴桃也只能在其生長(zhǎng)期內(nèi)獲得花蕾，使得基于單倍體(雙單倍體)技術(shù)的種質(zhì)創(chuàng)新周期較長(zhǎng)，與傳統(tǒng)的雜交育種相比，不能最大限度體現(xiàn)單倍體(雙單倍體)種質(zhì)創(chuàng)新的優(yōu)越性。
[0004] 獼猴桃花芽的生理分化在越冬前完成。完成花芽生理分化的枝條已具備形成花芽的先天條件,即相關(guān)基因已進(jìn)行選擇性表達(dá)。對(duì)離體的枝條給予適宜條件，可使其按照其既定發(fā)育模式提前萌發(fā)，便可獲得花蕾，從而解決單倍體(雙單倍體)技術(shù)在果樹中應(yīng)用的
瓶頸問題。
發(fā)明內(nèi)容
[0005] 發(fā)明目的：為了克服
現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，本發(fā)明提出了一種使得獼猴桃提前現(xiàn)蕾開花，方法簡(jiǎn)單易操作，推廣性強(qiáng)的一種離體條件下促進(jìn)非花期獼猴桃成花的方法。
[0006] 技術(shù)方案：為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案為：一種離體條件下促進(jìn)非花期獼猴桃成花的方法，包括以下步驟：
[0007] (1)枝條選擇及處理：11月份進(jìn)行收集用做插穗的枝條；從樹勢(shì)良好的雄株上采集一年生木質(zhì)化的枝條，用濕報(bào)紙包裹置于0-4℃
冰箱冷藏處理；
[0008] (2)扦插床的準(zhǔn)備：扦插床建于向陽(yáng)處的
溫室大棚內(nèi)，扦插床底部
土壤深翻暴曬并做成寬80-100cm的畦，其上鋪設(shè)15-20cm高的扦插基質(zhì)，經(jīng)暴曬并噴灑并噴灑廣普性
殺菌劑25％嘧菌酯1500倍稀釋液和10％世高1000-1500倍稀釋液達(dá)到滅菌殺蟲的作用；
[0009] (3)插穗準(zhǔn)備：將步驟(1)冷藏處理的枝條取出，剪切成10-15cm的插穗
捆扎，下切口對(duì)齊，并將下切口浸沒于生根粉溶液10-12h，上切口涂上傷口涂布劑，防止病蟲害的入侵和水分是散失；
[0010] (4)扦插：扦插深度為插穗長(zhǎng)度的1/2-2/3；扦插后用噴壺澆透水，使插穗與扦插床扦插基質(zhì)充分
接觸；
[0011] (5)扦插后的管理：
溫度控制在20-25℃；插穗未萌動(dòng)前一周澆透水一次，抽梢展葉后2-3天澆透水一次；總體上對(duì)水分的要求是，
苗床表層沙土不發(fā)白，手握成團(tuán)但不出水為宜；晴天需遮蔭，中午溫度高時(shí)需掀棚換氣；
[0012] (6)插穗萌發(fā)現(xiàn)蕾及疏蕾，采集小孢子處于單核期至雙核早期的花蕾用于單倍體(雙單倍體)種質(zhì)創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)。
[0013] 所述步驟(1)中冷藏處理時(shí)間不低于1周，一方面進(jìn)行需冷量的積累，一方面對(duì)離體枝條進(jìn)行保存。
[0014] 更為優(yōu)選的，所述步驟(2)中的扦插基質(zhì)為細(xì)
河沙、蛭石和
泥炭土按2:1:2的
質(zhì)量比例混合而成。
[0015] 為得到更優(yōu)的生根效果，用含有效成分為20％
萘乙酸粉劑稀釋1000-2000倍配置而成的生根粉溶液浸泡插穗下切口。
[0016] 更為優(yōu)選的，所述步驟(4)中扦插的時(shí)間選擇當(dāng)年11月份至次年大田獼猴桃芽體萌動(dòng)前均可。
[0017] 為保證花蕾發(fā)育所需營(yíng)養(yǎng)供給充足，所述步驟(6)中的花蕾采集具體為新梢2-3cm摘心，每個(gè)插穗保留2-4個(gè)花蕾。
[0018] 更進(jìn)一步的，所述花蕾的采集選擇摘除副蕾。
[0019] 本發(fā)明的原理為：獼猴桃花芽的生理分化后，即完成相關(guān)基因的選擇性表達(dá)，離體枝條完成一定需冷量積累后，給予適宜的外界環(huán)境條件，使其按照既定的模式生長(zhǎng)發(fā)育，達(dá)到提前現(xiàn)蕾開花的目的。
[0020] 有益效果：本發(fā)明提供的一種離體條件下促進(jìn)非花期獼猴桃成花的方法，將離體枝條進(jìn)行一定需冷量的積累后，給予適宜的外界環(huán)境條件，使其按照既定的模式生長(zhǎng)發(fā)育，達(dá)到提前現(xiàn)蕾開花的目的。與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點(diǎn)：a)使得非花期獼猴桃獲得花蕾，實(shí)現(xiàn)一年可多次進(jìn)行獼猴桃單倍體(雙單倍體)種質(zhì)創(chuàng)新；b)應(yīng)用范圍廣，可推廣到其它木本果樹，為基于單倍體(雙單倍體)技術(shù)的種質(zhì)創(chuàng)新提供原始實(shí)驗(yàn)材料。
附圖說明
[0021] 圖1為本發(fā)明
實(shí)施例1中華獼猴桃離體條件下促進(jìn)非花期成花方法示意圖。
[0022] 圖2為本發(fā)明實(shí)施例2美味獼猴桃離體條件下促進(jìn)非花期成花方法示意圖。
[0023] 圖3為本發(fā)明實(shí)施例2美味獼猴桃離體條件下促進(jìn)非花期成花方法示意圖。
[0024] 圖4為本發(fā)明實(shí)施例3毛花獼猴桃離體條件下促進(jìn)非花期成花方法示意圖。
[0025] 圖5為本發(fā)明實(shí)施例3毛花獼猴桃離體條件下促進(jìn)非花期成花方法示意圖。
具體實(shí)施方式
[0026] 下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說明：
[0027] 實(shí)施例1：
[0028] 1)試驗(yàn)步驟：
[0029] 在江蘇丘陵地區(qū)鎮(zhèn)江農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所實(shí)驗(yàn)基地，選取中華獼猴桃枝條進(jìn)行離體試驗(yàn)，具體一種離體條件下促進(jìn)非花期獼猴桃成花的方法，包括以下步驟：
[0030] (1)枝條選擇及處理：11月份進(jìn)行收集用做插穗的枝條；從樹勢(shì)良好的中華獼猴桃雄株上采集一年生木質(zhì)化的枝條，用濕報(bào)紙包裹置于0-4℃冰箱冷藏處理；冷藏處理時(shí)間不低于1周，一方面進(jìn)行需冷量的積累，一方面對(duì)離體枝條進(jìn)行保存；
[0031] (2)扦插床的準(zhǔn)備：扦插床建于向陽(yáng)處的
溫室大棚內(nèi)，扦插床底部土壤深翻暴曬并做成寬80cm的畦，其上鋪設(shè)15cm高的扦插基質(zhì)，扦插基質(zhì)具體為細(xì)河沙、蛭石和泥炭土按2:1:2的質(zhì)量比例混合而成，經(jīng)暴曬并噴灑廣普性殺菌劑25％嘧菌酯1500倍稀釋液和10％世高1000-1500倍稀釋液達(dá)到滅菌殺蟲的作用；
[0032] (3)插穗準(zhǔn)備：將步驟(1)冷藏處理的枝條取出，剪切成10cm的插穗捆扎，下切口對(duì)齊，并將下切口浸沒于生根粉溶液10h，上切口涂上傷口涂布劑，防止病蟲害的入侵和水分是散失；
[0033] (4)扦插：扦插的時(shí)間選擇當(dāng)年11月份，扦插深度為插穗長(zhǎng)度的1/2；扦插后用噴壺澆透水，使插穗與扦插床扦插基質(zhì)充分接觸；
[0034] (5)扦插后的管理：
溫度控制在20-25℃；插穗未萌動(dòng)前一周澆透水一次，抽梢展葉后2-3天澆透水一次；總體上對(duì)水分的要求是，苗床表層沙土不發(fā)白，手握成團(tuán)但不出水為宜；晴天需遮蔭，中午溫度高時(shí)需掀棚換氣；
[0035] (6)插穗萌發(fā)現(xiàn)蕾及疏蕾，采集小孢子處于單核期至雙核早期的花蕾用于單倍體(雙單倍體)種質(zhì)創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)；為保證花蕾發(fā)育所需營(yíng)養(yǎng)供給充足，花蕾采集具體為新梢2-3cm摘心，每個(gè)插穗保留2-4個(gè)花蕾；摘除副蕾。
[0036] 2)試驗(yàn)結(jié)果：
[0037] 扦插后6-10天芽體萌動(dòng)，90％以上插穗可抽新梢；提前現(xiàn)蕾開花，成功用于單倍體(雙單倍體)種質(zhì)創(chuàng)新；其中含花蕾新梢的百分比與先前插穗枝條選擇有關(guān)。
[0038] 實(shí)施例2：
[0039] 1)試驗(yàn)步驟：
[0040] 在江蘇丘陵地區(qū)鎮(zhèn)江農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所實(shí)驗(yàn)基地，選取美味獼猴桃枝條進(jìn)行離體試驗(yàn)，具體一種離體條件下促進(jìn)非花期獼猴桃成花的方法，包括以下步驟：
[0041] (1)枝條選擇及處理：11月份進(jìn)行收集用做插穗的枝條；從樹勢(shì)良好的美味獼猴桃雄株上采集一年生木質(zhì)化的枝條，用濕報(bào)紙包裹置于0-4℃冰箱冷藏處理；冷藏處理時(shí)間不低于1周，一方面進(jìn)行需冷量的積累，一方面對(duì)離體枝條進(jìn)行保存；
[0042] (2)扦插床的準(zhǔn)備：扦插床建于向陽(yáng)處的溫室大棚內(nèi)，扦插床底部土壤深翻暴曬并做成寬100cm的畦，其上鋪設(shè)20cm高的扦插基質(zhì)，扦插基質(zhì)具體為細(xì)河沙、蛭石和泥炭土按2:1:2的質(zhì)量比例混合而成，經(jīng)暴曬并噴灑廣普性殺菌劑25％嘧菌酯1500倍稀釋液和10％世高1000-1500倍稀釋液達(dá)到滅菌殺蟲的作用；
[0043] (3)插穗準(zhǔn)備：將步驟(1)冷藏處理的枝條取出，剪切成15cm的插穗捆扎，下切口對(duì)齊，浸沒于生根粉溶液12h，上切口涂上傷口涂布劑，防止病蟲害的入侵和水分是散失；
[0044] (4)扦插：扦插的時(shí)間選擇當(dāng)年11月份，扦插深度為插穗長(zhǎng)度的2/3；扦插后用噴壺澆透水，使插穗與扦插床扦插基質(zhì)充分接觸；
[0045] (5)扦插后的管理：溫度控制在20-25℃；插穗未萌動(dòng)前一周澆透水一次，抽梢展葉后2-3天澆透水一次；總體上對(duì)水分的要求是，苗床表層沙土不發(fā)白，手握成團(tuán)但不出水為宜；晴天需遮蔭，中午溫度高時(shí)需掀棚換氣；
[0046] (6)插穗萌發(fā)現(xiàn)蕾及疏蕾，采集小孢子處于單核期至雙核早期的花蕾用于單倍體(雙單倍體)種質(zhì)創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)；為保證花蕾發(fā)育所需營(yíng)養(yǎng)供給充足，花蕾采集具體為新梢2-3cm摘心，每個(gè)插穗保留2-4個(gè)花蕾；摘除副蕾。
[0047] 2)試驗(yàn)結(jié)果：
[0048] 扦插后6-10天芽體萌動(dòng)，90％以上插穗可抽新梢；提前現(xiàn)蕾開花，成功用于單倍體(雙單倍體)種質(zhì)創(chuàng)新；其中含花蕾新梢的百分比與先前插穗枝條選擇有關(guān)。
[0049] 實(shí)施例3：
[0050] 1)試驗(yàn)步驟：
[0051] 在江蘇丘陵地區(qū)鎮(zhèn)江農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所實(shí)驗(yàn)基地，選取毛花獼猴桃枝條進(jìn)行離體試驗(yàn)，具體一種離體條件下促進(jìn)非花期獼猴桃成花的方法，包括以下步驟：
[0052] (1)枝條選擇及處理：11月份進(jìn)行收集用做插穗的枝條；從樹勢(shì)良好的毛花獼猴桃雄株上采集一年生木質(zhì)化的枝條，用濕報(bào)紙包裹置于0-4℃冰箱冷藏處理；冷藏處理時(shí)間不低于1周，一方面進(jìn)行需冷量的積累，一方面對(duì)離體枝條進(jìn)行保存；
[0053] (2)扦插床的準(zhǔn)備：扦插床建于向陽(yáng)處的溫室大棚內(nèi)，扦插床底部土壤深翻暴曬并做成寬90cm的畦，其上鋪設(shè)18cm高的扦插基質(zhì)，扦插基質(zhì)具體為細(xì)河沙、蛭石和泥炭土按2:1:2的質(zhì)量比例混合而成，經(jīng)暴曬并噴灑廣普性殺菌劑25％嘧菌酯1500倍稀釋液和10％世高1000-1500倍稀釋液達(dá)到滅菌殺蟲的作用；
[0054] (3)插穗準(zhǔn)備：將步驟(1)冷藏處理的枝條取出，剪切成13cm的插穗捆扎，下切口對(duì)齊，浸沒于生根粉溶液11h，上切口涂上傷口涂布劑，防止病蟲害的入侵和水分是散失；
[0055] (4)扦插：扦插的時(shí)間選擇當(dāng)年11月份，扦插深度為插穗長(zhǎng)度的1/2；扦插后用噴壺澆透水，使插穗與扦插床扦插基質(zhì)充分接觸；
[0056] (5)扦插后的管理：溫度控制在20-25℃；插穗未萌動(dòng)前一周澆透水一次，抽梢展葉后2-3天澆透水一次；總體上對(duì)水分的要求是，苗床表層沙土不發(fā)白，手握成團(tuán)但不出水為宜；晴天需遮蔭，中午溫度高時(shí)需掀棚換氣；
[0057] (6)插穗萌發(fā)現(xiàn)蕾及疏蕾，采集小孢子處于單核期至雙核早期的花蕾用于單倍體(雙單倍體)種質(zhì)創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)；為保證花蕾發(fā)育所需營(yíng)養(yǎng)供給充足，花蕾采集具體為新梢2-3cm摘心，每個(gè)插穗保留2-4個(gè)花蕾；摘除副蕾。
[0058] 2)試驗(yàn)結(jié)果：
[0059] 扦插后6-10天芽體萌動(dòng)，90％以上插穗可抽新梢；提前現(xiàn)蕾開花，成功用于單倍體(雙單倍體)種質(zhì)創(chuàng)新；其中含花蕾新梢的百分比與先前插穗枝條選擇有關(guān)。
[0060] 本發(fā)明一種離體條件下促進(jìn)非花期獼猴桃成花的方法，將離體枝條進(jìn)行一定需冷量的積累后，給予適宜的外界環(huán)境條件，使其按照既定的模式生長(zhǎng)發(fā)育，達(dá)到提前現(xiàn)蕾開花的目的，與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點(diǎn)：a)使得非花期獼猴桃獲得花蕾，實(shí)現(xiàn)一年可多次進(jìn)行獼猴桃單倍體(雙單倍體)種質(zhì)創(chuàng)新；b)應(yīng)用范圍廣，可推廣到其它木本果樹，為基于單倍體(雙單倍體)技術(shù)的種質(zhì)創(chuàng)新提供原始實(shí)驗(yàn)材料。
[0061] 本發(fā)明通過人為控制溫度、濕度等條件使得當(dāng)年11月份至次年大田芽體萌動(dòng)前均可進(jìn)行離體促進(jìn)非花期獼猴桃現(xiàn)蕾開花，在植物非花期內(nèi)實(shí)現(xiàn)一年多次現(xiàn)蕾開花，為獼猴桃單倍體(雙單倍體)種質(zhì)創(chuàng)新提供充足的實(shí)驗(yàn)原始材料。方法簡(jiǎn)單，對(duì)設(shè)施要求不高，還可以推廣解決其他植物在單倍體(雙單倍體)種質(zhì)創(chuàng)新中遇到的花期限制問題。
[0062] 應(yīng)當(dāng)指出，以上具體實(shí)施方式僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍，在閱讀了本發(fā)明之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員對(duì)本發(fā)明的各種等價(jià)形式的
修改均落于本
申請(qǐng)所附
權(quán)利要求所限定的范圍。
