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檢測硝基苯酚的比色瓶/管

閱讀：116發(fā)布：2024-02-24

專利匯可以提供檢測硝基苯酚的比色瓶/管專利檢索，專利查詢，專利分析的服務。并且本 發(fā)明 提供了一種檢測硝基 苯酚 的比色瓶/管，所述的瓶/管體的底部為平面，瓶/管體中在所盛放的硝基苯酚富集材料的頂層中心處設置有一個反光片， 光源 發(fā)出的光線穿過底部平面后進入硝基苯酚富集材料，然后被反光片反射后，反射光線穿過底部平面射出；硝基苯酚富集材料包括主體基材和改性材料，主體基材用于形成透明或半透明的材料主體，改性材料用于與硝基苯酚類化合物發(fā)生相互作用并進行富集，主體基材為聚丙烯酰胺類化合物或 硅 橡膠 類化合物，改性材料為環(huán)糊精類化合物。該比色瓶/管對待測溶液中的硝基苯酚類化合物進行富集及長光程雙重 信號 放大，屏蔽了溶液中有色物及顆粒物的干擾，并進一步提高了光學比色檢測的靈敏度。，下面是檢測硝基苯酚的比色瓶/管專利的具體信息內(nèi)容。

1.一種檢測硝基苯酚的比色瓶/管，至少包括光源、光電檢測器以及盛放有透明或半透明的硝基苯酚富集材料的透明瓶/管體，其特征在于：所述的瓶/管體為以下結(jié)構(gòu)：
瓶/管體的底部為平面，瓶/管體中在所盛放的硝基苯酚富集材料的頂層中心處設置有一個反光片，光源發(fā)出的光線穿過底部平面后進入硝基苯酚富集材料，然后被反光片反射后，反射光線穿過底部平面射出，被光電檢測器接收；
所述的硝基苯酚富集材料包括主體基材和改性材料，其中所述主體基材用于形成透明或半透明的材料主體，改性材料用于與硝基苯酚類化合物發(fā)生相互作用并進行富集，所述主體基材為聚丙烯酰胺類化合物或硅橡膠類化合物，所述改性材料為環(huán)糊精類化合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測硝基苯酚的比色瓶/管，其特征在于：所述的環(huán)糊精類化合物為α-環(huán)糊精、β-環(huán)糊精、γ-環(huán)糊精及其氨基、羥丙基衍生物，聚(二烯丙基二甲基氯化銨)，N，N-二甲基環(huán)己胺，四庚基溴化銨，十六烷基三甲基溴化銨中的一種或兩種以上的混合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的檢測硝基苯酚的比色瓶/管，其特征在于：所述的主體基材為聚丙烯酰胺改性凝膠，所述的改性材料與主體基材的質(zhì)量比為1：20～1000。

說明書全文

檢測硝基苯酚的比色瓶/管

技術領域

[0001] 本發(fā)明提供了一種用于高靈敏檢測硝基苯酚類有色物質(zhì)的檢測裝置，用于在環(huán)境監(jiān)測及微生物鑒定等領域。

背景技術

[0002] 硝基苯酚類化合物包含2-硝基苯酚，3-硝基苯酚及4-硝基苯酚，溶于堿性溶液和熱水，微溶于冷水，溶液會呈現(xiàn)無色或金黃色，且化合物在溶液中電離的越多，溶液的黃色越明顯，即當pH升高，其黃色會變深。利用該性質(zhì)硝基苯酚可作為酸堿指示劑使用。酚羥基可與眾多官能團形成酯鍵，糖苷鍵等，利用這一性質(zhì)可合成較多酶水解的底物，水解后產(chǎn)生的硝基苯酚可呈現(xiàn)黃色，從而對酶活進行定量。如：4-硝基苯磷酸二鈉為堿性磷酸酶顯色底物，3-硝基苯基辛酸酯為脂肪酶顯色底物，2-硝基苯-β-D-半乳糖苷為半乳糖苷酶顯色底物，對硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷為α-葡萄糖苷酶顯色底物，鄰硝基苯基-β-D-葡萄糖醛酸苷為葡萄糖醛酸苷酶顯色底物。對上述水解酶酶活檢測在疾病診斷，環(huán)境監(jiān)測，生命科學研究等方面有著較為重要的應用。
[0003] 使用現(xiàn)有的酶底物顯色方法在復雜樣品或有色樣品檢驗時往往由于樣品中其他顏色的干擾，及樣品中微粒對光的散射造成檢驗結(jié)果不準確。另外光學比色靈敏度不夠高，往往顏色底物產(chǎn)生至微摩爾級別時方能產(chǎn)生較為明顯的信號差異，造成檢測檢出限不夠低。

發(fā)明內(nèi)容

[0004] 為了解決現(xiàn)有技術中存在的問題本申請設計了一種檢測硝基苯酚的比色瓶/管。該比色瓶/管對待測溶液中的硝基苯酚類化合物進行富集及長光程雙重信號放大，屏蔽了溶液中有色物及顆粒物的干擾，并進一步提高了光學比色檢測的靈敏度。因此在環(huán)境監(jiān)測及微生物鑒定等方面有著無可比擬的優(yōu)勢。
[0005] 實現(xiàn)本發(fā)明上述目的所采用的技術方案為：
[0006] 一種檢測硝基苯酚的比色瓶/管，至少包括光源、光電檢測器以及盛放有透明或半透明的硝基苯酚富集材料的透明瓶/管體，所述的瓶/管體為以下結(jié)構(gòu)：
[0007] 瓶/管體的底部為平面，瓶/管體中在所盛放的硝基苯酚富集材料的頂層中心處設置有一個反光片，光源發(fā)出的光線穿過底部平面后進入硝基苯酚富集材料，然后被反光片反射后，反射光線穿過底部平面射出，被光電檢測器接收；
[0008] 所述的硝基苯酚富集材料包括主體基材和改性材料，其中所述主體基材用于形成透明或半透明的材料主體，改性材料用于與硝基苯酚類化合物發(fā)生相互作用并進行富集，所述主體基材為聚丙烯酰胺類化合物或硅橡膠類化合物，所述改性材料為環(huán)糊精類化合物。
[0009] 所述的環(huán)糊精類化合物為α-環(huán)糊精、β-環(huán)糊精、γ-環(huán)糊精及其氨基、羥丙基衍生物，聚(二烯丙基二甲基氯化銨)，N，N-二甲基環(huán)己胺，四庚基溴化銨，十六烷基三甲基溴化銨中的一種或兩種以上的混合物。
[0010] 所述的主體基材為聚丙烯酰胺改性凝膠，所述的改性材料與主體基材的質(zhì)量比為1：20～1000。
[0011] 本發(fā)明提供的比色瓶/管在使用時，光由瓶底照入，通過上述硝基苯酚富集材料，材料里的硝基苯酚吸收入射光對應波長的光。光線設計為底部往上小角度照射，照射的硝基苯酚富集材料上方貼有一反光膜，光線反射往下繼續(xù)通過硝基苯酚富集材料，富集材料里的硝基苯酚繼續(xù)對應波長的光吸收直至光線由瓶底射出，光線瓶底射出的位置則放置感光元件，對上述光程的吸光度進行定量。
[0012] 本發(fā)明中通過比色瓶/管形狀的設計，瓶內(nèi)光路的設計及瓶/管底硝基苯酚富集材料的引入，對溶液中的硝基苯酚類化合物進行富集及長光程雙重信號放大，屏蔽了溶液中有色物及顆粒物的干擾，并進一步提高了光學比色檢測的靈敏度。該比色瓶/管配合簡單的光源及感光元件，即可對硝基苯酚類有色物質(zhì)進行高靈敏的檢測，在環(huán)境監(jiān)測及微生物鑒定等方面有著無可比擬的優(yōu)勢。附圖說明
[0013] 圖1為聚丙烯酰胺做為瓶/管底透光硝基苯酚富集材料時的比色瓶/管結(jié)構(gòu)圖；
[0014] 圖2為圖1的俯視圖；
[0015] 圖3為堿性磷酸酶底物檢測金黃色葡萄球菌生長曲線圖；
[0016] 圖4為以β-半乳糖苷酶為生長指示酶的糞大腸菌群生長曲線圖；
[0017] 圖5為以使用檢測硝基苯酚比色瓶/管進行的堿性磷酸酶檢測圖。

具體實施方式

[0018] 下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明做詳細具體的說明，但是本發(fā)明的保護范圍并不局限于以下實施例。
[0019] 實施例一比色瓶/管的設計及制作
[0020] 比色瓶/管上方透光硝基苯酚富集材料由聚丙烯酰胺為基材改性而來，入射光線與瓶身軸線之間夾角使用小角度，比色瓶/管的結(jié)構(gòu)采用圖1和圖2中進行設計，此時在硝基苯酚富集材料上方中央粘結(jié)一反光膜片，膜片覆蓋部分區(qū)域，不影響溶液中硝基苯酚類化合物的富集。光線照射至膜片處發(fā)生反射與入射光呈對稱反射出至光電檢測探頭。
[0021] 實施例二瓶/管底透光硝基苯酚富集材料制備
[0022] 主體基材使用使用聚丙烯酰胺改性凝膠，使用丙烯酰胺，甲基丙烯酸甲基丙烯酸十八酯質(zhì)量比10:1作為聚合單體，聚合單體總質(zhì)量為1g，加入0.3g甲叉雙丙烯酰胺作為交聯(lián)劑，再加入1g的pH8.8的1.5M的三羥甲基氨基甲烷-鹽酸緩沖液，加入10％(W/W)過硫酸銨及10mg四甲基乙二胺，按質(zhì)量比1/100加入α-環(huán)糊精、β-環(huán)糊精、γ-環(huán)糊精、及其氨基、羥丙基衍生物，聚(二烯丙基二甲基氯化銨)，N，N-二甲基環(huán)己胺，四庚基溴化銨，十六烷基三甲基溴化銨中的一種或幾種，補水至總質(zhì)量為10g，混勻。取一定量混勻后的加入改性劑的聚丙烯酰胺改性凝膠加入比色瓶/管靜置至固化，此處無厚度或劑量控制。凝膠固化后，凝膠表面中央加入一片反光膜片，利用親水性膠水及膜片自重實現(xiàn)固定。
[0023] 實施例三利用堿性磷酸酶活的微生物培養(yǎng)比色實驗
[0024] LB培養(yǎng)基培養(yǎng)金黃色葡萄球菌至O.D.為1，使用無菌水梯度稀釋，稀釋后的菌液1/10(V/V)接種入含1％4-硝基苯磷酸二鈉無菌過濾的2％蛋白胨水溶液的比色瓶，37℃培養(yǎng)，實時檢測405nm光吸收，結(jié)果如附圖3所示。圖3中縱坐標為405nm實時吸光度值與初始吸光度值的比值，橫坐標為培養(yǎng)檢測時間。
[0025] 實施例四利用半乳糖苷酶活的糞大腸菌群培養(yǎng)比色實驗
[0026] LB培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸埃希氏菌ATCC25922至O.D.為1，使用無菌水梯度稀釋，稀釋后的菌液1/10(V/V)接種入含1％2-硝基苯-β-D-半乳糖苷無菌過濾的5％蛋白胨水溶液的比色瓶，44.5℃培養(yǎng)，實時檢測405nm透光率，結(jié)果如附圖4所示。圖4中縱坐標為405nm實時透光率，橫坐標為培養(yǎng)檢測時間。
[0027] 實施例五堿性磷酸酶酶活檢測實驗
[0028] 配置20mL溶液加入比色瓶，溶液含50mM三羥甲基氨基甲烷-鹽酸(pH?9.3at?25C)，1mM?MgCl2，0.1mM?ZnCl2，1mM亞精胺及10mM?4-硝基苯磷酸二鈉，1/100(V/V)加入0.01U/mL堿性磷酸酶，實時檢測405nm光吸收，結(jié)果如附圖5所示。圖5中縱坐標為405nm實時吸光度值與初始吸光度值的比值，橫坐標為孵育時間。
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