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一種繡球花高效無菌播種方法

閱讀:973發(fā)布:2020-05-11

專利匯可以提供一種繡球花高效無菌播種方法專利檢索,專利查詢,專利分析的服務(wù)。并且本 發(fā)明 提供一種繡球花高效無菌 播種 方法,包括如下步驟:1)人工 授粉 或自然授粉后3個(gè)月左右后,摘取飽滿的果實(shí),清洗干凈備用;2)在超凈 工作臺(tái) 上將果實(shí)用酒精溶液、升汞溶液浸泡消毒并沖洗干凈;3)在超凈工作臺(tái)上用變色 硅 膠干燥劑平鋪于培養(yǎng)皿中,并 覆蓋 濾紙 ;4)將滅菌過的果實(shí)涼干,均勻平鋪于步驟3)中的濾紙上,蓋上培養(yǎng)皿 蓋子 ,放入干燥器中,進(jìn)行干燥;5)充分干燥后,在超凈工作臺(tái)上將果實(shí)取出,用刀將果實(shí)頂部切開,用 鑷子 輕柔的 擠壓 果實(shí),將 種子 擠出,將種子均勻散于萌發(fā)培養(yǎng)基中培養(yǎng);6)培養(yǎng)一段時(shí)間后,將萌發(fā)的 幼苗 轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中培養(yǎng);7)培養(yǎng)一段時(shí)間后,苗形成發(fā)達(dá)的根系,置于 溫室 馴化;8)馴化一段時(shí)間后,將苗清洗干凈,進(jìn)行煉苗。該方法操作簡(jiǎn)單、污染率低、成苗率高、育苗周期短,適用于大葉繡球、圓錐繡球和蠟蓮繡球等多數(shù)繡球?qū)俚姆N和品種。,下面是一種繡球花高效無菌播種方法專利的具體信息內(nèi)容。

1.一種繡球花高效無菌播種方法,其特征在于包括如下步驟:
1)人工授粉或自然授粉后3個(gè)月左右后,摘取飽滿的果實(shí),清洗干凈備用;
2)在超凈工作臺(tái)上將果實(shí)用酒精溶液、升汞溶液浸泡消毒并沖洗干凈;
3)在超凈工作臺(tái)上用變色膠干燥劑平鋪于培養(yǎng)皿中,并覆蓋濾紙;
4)將滅菌過的果實(shí)涼干,均勻平鋪于步驟3)中的濾紙上,蓋上培養(yǎng)皿蓋子,放入干燥器中,進(jìn)行干燥;
5)充分干燥后,在超凈工作臺(tái)上將果實(shí)取出,用刀將果實(shí)頂部切開,用鑷子輕柔的擠壓果實(shí),將種子擠出,將種子均勻散于萌發(fā)培養(yǎng)基中培養(yǎng);
6)培養(yǎng)一段時(shí)間后,將萌發(fā)的幼苗轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中培養(yǎng);
7)培養(yǎng)一段時(shí)間后,苗形成發(fā)達(dá)的根系,置于溫室馴化;
8)馴化一段時(shí)間后,將苗清洗干凈,進(jìn)行煉苗。
2.如權(quán)利要求1所述的繡球花高效無菌播種方法,其特征在于步驟1)中:人工授粉所用母本為容器苗,在4月至5月進(jìn)行,授粉后將母本置入溫室,開放授粉為容器苗或地栽培苗,置于室外,授粉后,施用奧綠A2緩釋肥3-5g,每隔7d整株噴灑500倍-700倍多菌靈溶液,3個(gè)月左右后,當(dāng)萼片失干燥、果實(shí)膨大未干燥時(shí),采集飽滿的果實(shí),采集的果實(shí),用酒精球?qū)⒉潦酶蓛簦湃胂礉崉?0%次氯酸鈉混合溶液中,在磁攪拌器上攪拌20-30min,再用自來水沖洗0.5-1h備用。
3.如權(quán)利要求1所述的繡球花高效無菌播種方法,其特征在于步驟2)中:75%酒精浸泡
10-15s,倒掉酒精后,0.1%的升汞溶液浸泡20-30min,其間不斷搖動(dòng),倒掉升汞溶液后,用無菌水沖洗5次。
4.如權(quán)利要求1所述的繡球花高效無菌播種方法,其特征在于步驟3)中:將變色硅膠干燥劑、濾紙和培養(yǎng)皿進(jìn)行高溫滅菌,滅菌后將變色硅膠干燥劑放入烘箱中充分干燥,至變?yōu)樗{(lán)紫色,充分冷卻,在超凈工作臺(tái)上,將變色硅膠干燥劑平鋪于培養(yǎng)皿中,厚度為培養(yǎng)皿高度的三分之一,并覆蓋濾紙。
5.如權(quán)利要求1所述的繡球花高效無菌播種方法,其特征在于步驟4)中:將滅菌后的果實(shí)晾干1-2h,均勻平鋪于步驟3)中的濾紙上,蓋上蓋子,用撕拉膜封口,放入干燥器中,干燥
1-3d。
6.如權(quán)利要求1所述的繡球花高效無菌播種方法,其特征在于步驟5)中:在超凈工作臺(tái)上將干燥后的果實(shí)取出,用無菌刀將果實(shí)頂部切開,用無菌鑷子輕柔的擠壓果實(shí),將種子擠出,將種子均勻撒入萌發(fā)培養(yǎng)基中進(jìn)行萌發(fā)培養(yǎng);萌發(fā)培養(yǎng)基為MS基本培養(yǎng)基添加0.7%卡拉膠和1.0%-2.0%蔗糖,pH調(diào)至5.8;培養(yǎng)室中培養(yǎng)溫度為25±2℃,光照時(shí)間12h/d,光強(qiáng)
2500Lx。
7.如權(quán)利要求1所述的繡球花高效無菌播種方法,其特征在于步驟6)中:種子培養(yǎng)10-
15d后,開始萌發(fā),30-40d后,萌發(fā)率達(dá)到最大,當(dāng)幼苗高度達(dá)到0.5cm以上,將幼苗接入生根培養(yǎng)基進(jìn)行生根培養(yǎng),生根培養(yǎng)基為MS基本培養(yǎng)基添加0.1-0.2mg·L-1乙酸、0.7%卡拉膠和1.0%-2.0%蔗糖,pH調(diào)至5.8。
8.如權(quán)利要求1所述的繡球花高效無菌播種方法,其特征在于步驟7)中:在生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)40-50d后,幼苗主根發(fā)達(dá),并具有3-6個(gè)須根,當(dāng)75%幼苗高度達(dá)到1.5cm以上,將組培瓶苗置于溫室苗床上馴化,75%遮蔭。
9.如權(quán)利要求1所述的繡球花高效無菌播種方法,其特征在于步驟8)中:煉苗基質(zhì)配方為50%泥炭、50%珍珠巖(體積比),充分?jǐn)嚢?,分裝入72孔穴盤中,使用前7d澆透水,使用
0.2%-0.3%高錳酸消毒;組培瓶馴化3-7d后,將增殖苗用自來水清洗,洗凈殘留培養(yǎng)基,將根部插入基質(zhì)中,置于全光照噴霧溫室中進(jìn)行煉苗;全光照噴霧溫室溫平均溫度25±2℃,調(diào)整噴霧間隔時(shí)間和持續(xù)時(shí)間,使相對(duì)濕度保持在80%-90%,每隔10d噴灑500倍多菌靈溶液;培養(yǎng)35-60d后,形成健壯的繡球?qū)嵣纭?/p>

說明書全文

一種繡球花高效無菌播種方法

技術(shù)領(lǐng)域

[0001] 本發(fā)明屬于植物培育繁殖技術(shù)領(lǐng)域,具體是一種繡球花高效無菌播種方法。

背景技術(shù)

[0002] 繡球花為虎草科(Saxifragaceae)繡球?qū)?Hydrangea),又稱八仙花,因其花色紫、紅、藍(lán)、白、綠等色系豐富,球狀、簇狀、柱狀等形態(tài)多樣,多年生、花期長,且品種繁多、適應(yīng)性強(qiáng),具有耐寒、耐蔭、抗性強(qiáng)、病蟲害少和易于養(yǎng)護(hù)等特點(diǎn),深受業(yè)界推崇,在世界廣為栽培。
[0003] 已有的繡球品種多數(shù)為國外品種,國內(nèi)培育出的品種較少,播種效率低下是重要原因之一。傳統(tǒng)播種受到到種子成熟度、基質(zhì)、份和病蟲害等多種原因影響,成苗率低、周期長。無菌播種是解決這些問題的有效方法。國內(nèi)外已報(bào)道的繡球無菌播種研究都采用果實(shí)切片或人工剝離種子,由于繡球種子非常微小,已有的無菌播種方法操作難度大、污染率高、萌發(fā)率低,無法為繡球新品種的培育提供大量的材料。

發(fā)明內(nèi)容

[0004] 本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題,目的在于設(shè)計(jì)提供一種繡球花高效無菌播種方法,該方法操作簡(jiǎn)單、污染率低、成苗率高、育苗周期短,適用于大葉繡球、圓錐繡球和蠟蓮繡球等多數(shù)繡球?qū)俚姆N和品種。
[0005] 本發(fā)明的技術(shù)方案如下:
[0006] 一種繡球花高效無菌播種方法,其特征在于包括如下步驟:
[0007] 1)人工授粉或自然授粉后3個(gè)月左右后,摘取飽滿的果實(shí),清洗干凈備用;
[0008] 2)在超凈工作臺(tái)上將果實(shí)用酒精溶液、升汞溶液浸泡消毒并沖洗干凈;
[0009] 3)在超凈工作臺(tái)上用變色膠干燥劑平鋪于培養(yǎng)皿中,并覆蓋濾紙
[0010] 4)將滅菌過的果實(shí)涼干,均勻平鋪于步驟3)中的濾紙上,蓋上培養(yǎng)皿蓋子,放入干燥器中,進(jìn)行干燥;
[0011] 5)充分干燥后,在超凈工作臺(tái)上將果實(shí)取出,用刀將果實(shí)頂部切開,用鑷子輕柔的擠壓果實(shí),將種子擠出,將種子均勻散于萌發(fā)培養(yǎng)基中培養(yǎng);
[0012] 6)培養(yǎng)一段時(shí)間后,將萌發(fā)的幼苗轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中培養(yǎng);
[0013] 7)培養(yǎng)一段時(shí)間后,苗形成發(fā)達(dá)的根系,置于溫室馴化;
[0014] 8)馴化一段時(shí)間后,將苗清洗干凈,進(jìn)行煉苗。
[0015] 所述的繡球花高效無菌播種方法,步驟1)中:人工授粉所用母本為容器苗,在4月至5月進(jìn)行,授粉后將母本置入溫室,開放授粉為容器苗或地栽培苗,置于室外,授粉后,施用奧綠A2緩釋肥3-5g,每隔7d整株噴灑500倍-700倍多菌靈溶液,3個(gè)月左右后,當(dāng)萼片失水干燥、果實(shí)膨大未干燥時(shí),采集飽滿的果實(shí),采集的果實(shí),用酒精球?qū)⒉潦酶蓛?,放入洗潔劑?0%次氯酸鈉混合溶液中,在磁攪拌器上攪拌20-30min,再用自來水沖洗0.5-1h備用。
[0016] 所述的繡球花高效無菌播種方法,步驟2)中:75%酒精浸泡10-15s,倒掉酒精后,0.1%的升汞溶液浸泡20-30min,其間不斷搖動(dòng),倒掉升汞溶液后,用無菌水沖洗5次。
[0017] 所述的繡球花高效無菌播種方法,步驟3)中:將變色硅膠干燥劑、濾紙和培養(yǎng)皿進(jìn)行高溫滅菌,滅菌后將變色硅膠干燥劑放入烘箱中充分干燥,至變?yōu)樗{(lán)紫色,充分冷卻,在超凈工作臺(tái)上,將變色硅膠干燥劑平鋪于培養(yǎng)皿中,厚度為培養(yǎng)皿高度的三分之一,并覆蓋濾紙。
[0018] 所述的繡球花高效無菌播種方法,步驟4)中:將滅菌后的果實(shí)晾干1-2h,均勻平鋪于步驟3)中的濾紙上,蓋上蓋子,用撕拉膜封口,放入干燥器中,干燥1-3d。
[0019] 所述的繡球花高效無菌播種方法,步驟5)中:在超凈工作臺(tái)上將干燥后的果實(shí)取出,用無菌刀將果實(shí)頂部切開,用無菌鑷子輕柔的擠壓果實(shí),將種子擠出,將種子均勻撒入萌發(fā)培養(yǎng)基中進(jìn)行萌發(fā)培養(yǎng);萌發(fā)培養(yǎng)基為MS基本培養(yǎng)基添加0.7%卡拉膠和1.0%-2.0%蔗糖,pH調(diào)至5.8;培養(yǎng)室中培養(yǎng)溫度為25±2℃,光照時(shí)間12h/d,光強(qiáng)2500Lx。
[0020] 所述的繡球花高效無菌播種方法,步驟6)中:種子培養(yǎng)10-15d后,開始萌發(fā),30-40d后,萌發(fā)率達(dá)到最大,當(dāng)幼苗高度達(dá)到0.5cm以上,將幼苗接入生根培養(yǎng)基進(jìn)行生根培養(yǎng),生根培養(yǎng)基為MS基本培養(yǎng)基添加0.1-0.2mg·L-1乙酸、0.7%卡拉膠和1.0%-2.0%蔗糖,pH調(diào)至5.8。
[0021] 所述的繡球花高效無菌播種方法,步驟7)中:在生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)40-50d后,幼苗主根發(fā)達(dá),并具有3-6個(gè)須根,當(dāng)75%幼苗高度達(dá)到1.5cm以上,將組培瓶苗置于溫室苗床上馴化,75%遮蔭。
[0022] 所述的繡球花高效無菌播種方法,步驟8)中:煉苗基質(zhì)配方為50%泥炭、50%珍珠巖(體積比),充分?jǐn)嚢?,分裝入72孔穴盤中,使用前7d澆透水,使用0.2%-0.3%高錳酸消毒;組培瓶馴化3-7d后,將增殖苗用自來水清洗,洗凈殘留培養(yǎng)基,將根部插入基質(zhì)中,置于全光照噴霧溫室中進(jìn)行煉苗;全光照噴霧溫室溫平均溫度25±2℃,調(diào)整噴霧間隔時(shí)間和持續(xù)時(shí)間,使相對(duì)濕度保持在80%-90%,每隔10d噴灑500倍多菌靈溶液;培養(yǎng)35-60d后,形成健壯的繡球?qū)嵣纭?/div>
[0023] 本發(fā)明的繡球花高效無菌播種方法,操作簡(jiǎn)單高效,污染率低,對(duì)種子傷害小,萌發(fā)率高,每顆果實(shí)可獲得200-500株實(shí)生苗,繁育周期短,有效提高繡球育種工作的效率,具有廣闊的市場(chǎng)前景。
[0024] 本申請(qǐng)文件中涉及的百分含量除另有說明外,均指重量百分含量。

具體實(shí)施方式

[0025] 實(shí)施例對(duì)象:大葉繡球人工授粉果實(shí)
[0026] 步驟1)人工授粉所用母本為容器苗,在4月至5月進(jìn)行,授粉后將母本置入溫室,施用奧綠A2緩釋肥3g。每隔7d整株噴灑500多菌靈溶液。3個(gè)月左右后,當(dāng)萼片失水干燥、果實(shí)膨大未干燥時(shí),采集飽滿的果實(shí)。采集的果實(shí),用酒精棉球?qū)⒉潦酶蓛?,放入洗潔劑?0%次氯酸鈉混合溶液中,在磁力攪拌器上攪拌30min,再用自來水沖洗1h備用;
[0027] 步驟2)超凈工作臺(tái)上在75%酒精浸泡10-15s,倒掉酒精后,0.1%的升汞溶液浸泡25min,其間不斷搖動(dòng),倒掉升汞溶液后,用無菌水沖洗5次;
[0028] 步驟3)將變色硅膠干燥劑、濾紙和培養(yǎng)皿進(jìn)行高溫滅菌,滅菌后將變色硅膠干燥劑放入烘箱中充分干燥,至變?yōu)樗{(lán)紫色,充分冷卻。變色硅膠干燥劑平鋪于培養(yǎng)皿中,厚度為培養(yǎng)皿高度的三分之一,并覆蓋濾紙;
[0029] 步驟4)將滅菌后的果實(shí)晾干1h,均勻平鋪于步驟3)中的濾紙上,蓋上蓋子,用撕拉膜封口,放入干燥器中,干燥1d;
[0030] 步驟5)在超凈工作臺(tái)上將干燥后的果實(shí)取出,用無菌刀將果實(shí)頂部切開,用無菌鑷子輕柔的擠壓果實(shí),將種子擠出,將種子均勻撒入萌發(fā)培養(yǎng)基中進(jìn)行萌發(fā)培養(yǎng);萌發(fā)培養(yǎng)基為MS基本培養(yǎng)基添加0.7%卡拉膠和2.0%蔗糖,pH調(diào)至5.8;培養(yǎng)室中培養(yǎng)溫度為25±2℃,光照時(shí)間12h/d,光強(qiáng)2500Lx;
[0031] 步驟6)種子培養(yǎng)10d后,開始萌發(fā),30d后,萌發(fā)率達(dá)到最大。當(dāng)幼苗高度達(dá)到0.5cm以上,將幼苗接入生根培養(yǎng)基進(jìn)行生根培養(yǎng)。生根培養(yǎng)基為MS基本培養(yǎng)基添加0.1-0.2mg·L-1萘乙酸、0.7%卡拉膠和1.0%-2.0%蔗糖,pH調(diào)至5.8;
[0032] 步驟7)在生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)45d后,幼苗根系發(fā)達(dá),75%幼苗高度達(dá)到1.5cm以上,將組培瓶苗置于溫室苗床上馴化,75%遮蔭;
[0033] 步驟8)煉苗基質(zhì)配方為50%泥炭、50%珍珠巖(體積比),充分?jǐn)嚢?,分裝入72孔穴盤中,使用前7d澆透水,使用0.3%高錳酸鉀消毒;組培瓶馴化3d后,將增殖苗用自來水清洗,洗凈殘留培養(yǎng)基,將根部插入基質(zhì)中,深度為嫩枝長度的1/3,置于全光照噴霧溫室中進(jìn)行煉苗;全光照噴霧溫室溫平均溫度25±2℃,調(diào)整噴霧間隔時(shí)間和持續(xù)時(shí)間,使相對(duì)濕度保持在80%-90%,每隔10d噴灑500倍多菌靈溶液;培養(yǎng)50d后,形成健壯的繡球?qū)嵣纭?/div>
[0034] 采用上述實(shí)施列無菌播種方法,獲得的大葉繡球雜交后代,平均每顆果實(shí)能夠成活350株雜交后代,污染率僅為0.1%,周期短,后代播種次年就能少量開花,有效縮短繡球育種效率,提高育種效率。
[0035] 以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例,并不用以限制本發(fā)明,凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進(jìn)等,均包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
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