技術領域
[0001] 本
發(fā)明涉及
生物組織培養(yǎng)繁殖的方法,具體涉及野生歐洲李高空壓條繁殖的方法。
背景技術
[0002] 我國新疆西部天山為世界
植物起源中心之一,具有豐富的野生植物種類,在該區(qū)域分布有大面積的野生果樹資源,其中許多種類為栽培果樹的起源種。這些資源對人類具有十分重要的利用價值,開展果樹資源研究,探討其起源和演化路徑、開發(fā)果樹新產(chǎn)品具有重要意義。
[0003] 1980年施麗首次在新疆伊
犁地區(qū)新源縣交吾托海的天然植物中發(fā)現(xiàn)野歐洲李(Prunus?domestica?L.)。為確認野歐洲李的存在,從形態(tài)特征、細胞
染色體以及在分布區(qū)內(nèi)和附近有無黑刺李和櫻桃李等方面進行了研究,結果證明:在伊犁地區(qū)天山野果林中確實分布有野歐洲李,且新疆伊犁地區(qū)天山野果林是歐洲李的惟一起源地。
[0004] 野生歐洲李為灌木或小喬木,樹高0.8~2.8m,樹冠圓頭形,樹干深紫色或深灰色有光澤。多年生枝暗紫色或褐色,無刺。嫩枝黃綠色,無毛,無棱。
葉片卵圓形,先端鈍頭或有急尖,基部楔形,長4~7cm,寬3~5cm。葉脈多為4~5對,呈弧形彎向頂端。葉緣鋸齒、圓鈍。葉面綠色或深綠色,無毛,葉背灰綠色,被短柔毛。葉柄長0.8~1cm?;?朵,花冠直徑1.2~?
1.5cm,花白色,5瓣,花瓣圓形?;ㄝ帱S綠色,萼筒漏斗狀,萼片與萼筒均無毛?;üiL1.2~?
1.5cm,無毛。果實卵圓形,少數(shù)橢圓形,平均單果重4.4g,果實縱徑2.27cm,橫徑1.87cm,果頂圓凸??p合線淺,兩側對稱或較對稱。
果皮底色黃綠,全面著暗紫紅色,具藍灰色果粉,無斑點;果皮厚度中等,韌性強,剝離度中等。果肉黃綠色,肉質松軟,汁液少,味濃酸,微澀,無
香味;可溶性固形物17.7%,pH值3,無裂果。半離核,核橢圓形,核平均干重0.4g,縱徑
1.6cm,橫徑1.0cm,測徑0.6~0.7cm,核面粗糙。種仁有濃郁的杏仁香味。
[0005] 截止目前的調(diào)查,野生歐洲李僅分布于中國新疆新源縣的交吾托海、阿勒
馬賽和它平行的數(shù)條山溝以及鞏留縣的伊
力格代溝中,海拔1200~1300米。喬木層高2~4米,林冠郁閉度約0.3;灌木有野薔薇、沙棘、錦雞兒、小檗、兔兒條、樹莓、
啤酒花;草本層有蘆葦、甘草等。野歐洲李都是分布在天然植物中,性喜溫暖濕潤,只有在溫濕的陰坡或
水邊才能較好的生存,其抗性弱,分布區(qū)不穩(wěn)定,分布面積也很小。
[0006] 野生歐洲李的利用:李資源總酸含量建議分級標準認為:櫻桃李、野生歐洲李總酸含量>2.0,百分比6.03,級別:極高。野生歐洲李因其果實太酸,當?shù)胤Q之為酸梅,與新疆南部栽培的橢圓形小酸梅為同一種,最適加工李干和李醬,也可藥用,但野生分布的歐洲李目前尚未開發(fā)利用。
[0007] 由于野生歐洲李在自然狀態(tài)下繁殖力較低、分布很少,以及環(huán)境改變和人為破壞,其數(shù)量急劇減少,有瀕危趨勢。分布地周圍已變成礦場、道路、農(nóng)家樂、牧場等。同時由于受到牲畜、病蟲害等原因的影響,樹勢較弱、結果量少。各分布地的成齡株周圍均有根蘗苗分布,但能生長成齡的根蘗苗數(shù)量很少,根蘗苗被牲畜啃食嚴重。部分野生歐洲李分布點已消亡,或僅殘存幾株枯樁。野生歐洲李
種子自然繁殖能力較差,這將直接導致其多樣性被破壞及資源的瀕危。針對該資源目前的現(xiàn)狀,需要從多方面進行對其資源的保護和繁育,以保證該物種不會滅絕,同時為該物種各類研究的開展創(chuàng)造條件。目前,對于野生歐洲李具體的保護對策和育苗方法較少,未有詳細有效的保育措施和育苗技術規(guī)程。
發(fā)明內(nèi)容
[0008] 針對以上問題,本發(fā)明的目的是提供一種死亡率低、誘導率高、愈傷組織狀態(tài)好的野生歐洲李高空壓條繁殖的方法。
[0009] 本發(fā)明的目的通過以下的技術方案實現(xiàn):
[0010] 野生歐洲李葉片組織培養(yǎng)的方法,包括以下步驟:
[0011] 第一步選擇無病蟲害、生長健壯的分枝,粗度在1cm~2cm之間,先用嫁接刀進行環(huán)割處理,環(huán)割高度距離壓條分叉口15cm,環(huán)割寬度為2cm;
[0012] 第二步用毛筆蘸取生長調(diào)節(jié)劑對環(huán)割口進行涂抹,所屬生長調(diào)節(jié)劑處理為400mg/L?IBA(吲哚丁酸);
[0013] 第三步10min后用透明塑料
薄膜包裹混合基質對環(huán)割處進行包扎,包扎為8cm×10cm?×5cm的圓柱體,基質濕度以手捏成團,松之即散為宜,所述混合基質為草炭+珍珠巖+
河沙,
質量比為1∶1∶1;
[0014] 第四步包裹時間為90d。
[0015] 有益效果:
[0016] 本發(fā)明提供了一種野生歐洲李高空壓條繁殖的方法,培養(yǎng)過程生根率高,為野生歐洲李的保護和繁育提供了一種新的保育措施和育苗技術規(guī)程。
附圖說明
[0017] 圖1不同生長調(diào)節(jié)劑種類和濃度對高空壓條生根率的影響;
[0018] 圖2不同生長調(diào)節(jié)劑種類對高空壓條根系的影響;
[0019] 圖3不同基質對高空壓條的影響;
[0020] 圖4不同包裹材料對高空壓條的影響。
具體實施方式
[0021] 以下給出本發(fā)明的具體實施方式,用來對發(fā)明內(nèi)容作進一步詳細的解釋。并非因此限制本發(fā)明的
專利范圍,凡是利用本發(fā)明
說明書及附圖內(nèi)容所作的等效結構或等效流程變換,或直接或間接運用在其他相關的技術領域,均同理包括在本發(fā)明的專利保護范圍內(nèi)。
[0022] 一、材料與方法
[0023] 1、試驗地環(huán)境
[0024] 試驗于2018年6月底進行,試驗地位于新疆新源縣阿勒瑪勒鄉(xiāng)改良場三隊核桃園。海拔為1400m左右,
土壤屬黑壤土,年平均氣溫為9.60℃,年降水量530ml左右。
[0025] 2、生長調(diào)節(jié)劑種類和濃度的篩選
[0026] 分別選用
萘乙酸(NAA)(100mg/L、400mg/L)、吲哚丁酸(IBA)(100mg/L、400mg/L)、強力生根粉(ABT生根粉)(400mg/L、800mg/L)和清水對照組(CK)3種生長調(diào)節(jié)劑共7?個處理,每處理做10個壓條。在試驗地內(nèi)隨機選擇無病蟲害、生長健壯的分枝,粗度在1cm~?2cm之間,先用嫁接刀進行環(huán)割處理,環(huán)割高度距離壓條分叉口15cm左右,環(huán)割寬度為2cm?左右。環(huán)割時必須刮干凈形成層但不損傷木質部[123]。然后用毛筆蘸取生長調(diào)節(jié)劑對環(huán)割口進行涂抹,10min后用透明塑料薄膜包裹混合基質對環(huán)割處進行包扎,包扎為8cm×10cm×?5cm左右的圓柱體,基質濕度以手捏成團,松之即散為宜。90d后統(tǒng)計生根率、根長、根粗和生根數(shù)。
[0027] 3、基質的篩選
[0028] 共選用蛭石、草炭、珍珠巖和混合基質,混合基質為草炭、珍珠巖、河沙,質量比為=1∶?1∶1,4種基質進行試驗。用嫁接刀對枝條進行環(huán)割處理后用毛筆均勻涂抹800mg/L?ABT生根粉,10min后采用透明塑料薄膜分別包裹不同基質進行包扎。每處理做10個壓條。90d?后統(tǒng)計生根率、根長、根粗和生根數(shù)。
[0029] 4、包裹材料的篩選
[0030] 用嫁接刀對枝條進行環(huán)割處理后用毛筆均勻涂抹800mg/L?ABT生根粉,10min后用不同包裹材料分別包裹混合基質進行包扎。共采用透明塑料薄膜、
無紡布和黑膜3種材料作為高空壓條包裹材料,每種材料做10個壓條。90d后統(tǒng)計生根率、根長、根粗和生根數(shù)。
[0031] 二、試驗結果
[0032] 1、不同生長調(diào)節(jié)劑種類和濃度對高空壓條的影響
[0033] 由圖1可知,不同種類生長調(diào)節(jié)劑處理的高空壓條均可以生根,且愈傷率較高。其中400?mg/L?NAA、400mg/L?IBA和800mg/L?ABT生根粉處理的壓條生根率均為20.00%。400mg/L?IBA、?400mg/L?ABT和CK處理的壓條愈傷率達100.00%,但CK處理的壓條生根率為
0,說明不同種類的生長調(diào)節(jié)劑均能促進野生歐洲李高空壓條生根,但生根率不高。
[0034] 由圖2可知,不同生長調(diào)節(jié)劑種類和濃度處理的壓條根系生長差異較大,其中IBA處理的壓條根長為38.74mm,其次為ABT生根粉處理的壓條根系較長為15.41mm,NAA處理的根系最短僅為4.27mm;在根粗和生根數(shù)量方面3種生長調(diào)節(jié)劑對壓條的影響不大,其中IBA?處理的壓條根系最粗為2.13mm,生根數(shù)量為2條,NAA處理的壓條根系粗度最細為1.06mm,僅有1條根系。3種生長調(diào)節(jié)劑中IBA更有利于促進高空壓條根系生長,但根系整體生長緩慢,效果不佳。
[0035] 2、不同基質對高空壓條的影響
[0036] 由圖3可知,采用草炭和珍珠巖作為包裹基質時壓條愈傷率最高為100.00%,采用蛭石作為包裹基質時愈傷率為80.00%,死亡率為20.00%,混合基質的壓條愈傷率為60.00%。在4?種包裹基質中,用草炭、蛭石和珍珠巖包裹的壓條生根率均為0,僅有混合基質包裹的壓條可以生根,但生根率僅為20.00%。。
[0037] 3、不同包裹材料對高空壓條的影響
[0038] 由圖4可知,采用無紡布和黑膜作包裹材料的壓條死亡率為100.00%,生根率為0,僅有塑料薄膜包裹的壓條可以生根,生根率為10.00%,除了個別死亡外,其余壓條全部可以形成愈傷組織。在試驗過程中發(fā)現(xiàn),采用黑膜和無紡布作包裹材料時,由于夏季高溫,且2者均為黑色材料,吸熱性較強,高空壓條基質
溫度可達32℃以上,不利于根系生長,此外,由于無紡布透氣性較強,失水較快導致基質干燥缺水,不利于生根。
[0039] 三、分析
[0040] 1、不同壓條時期對高空壓條的影響
[0041] 不同樹種的壓條時期不同,合適的壓條時期可以提高成活率,此時環(huán)境溫濕度、枝條養(yǎng)分、內(nèi)源生長調(diào)節(jié)劑含量等都為最佳,有利于生根。研究發(fā)現(xiàn),壓條時間與根系生長狀況有關,必須根據(jù)不同樹種適當控制壓條時間。試驗過程中發(fā)現(xiàn)壓條時間對野生歐洲李果樹高空壓條的影響較大,比如2017年7月中旬在試驗地做的高空壓條預實驗90d后壓條均未生根,部分壓條死亡,剩余壓條僅形成愈傷組織,而在2018年6月下旬進行的高空壓條試驗90d?后壓條可以生根。猜想可能是由于預實驗壓條時間過晚,壓條內(nèi)部所含生長調(diào)節(jié)劑濃度較低,而且90d后已到10月中旬,氣溫較低,不利于根系形成。
[0042] 2、不同刻傷方式對高空壓條的影響
[0043] 試驗中除了對生長調(diào)節(jié)劑、基質、包裹材料進行篩選外,還對高空壓條采用環(huán)剝、環(huán)刻?2種刻傷方式進行了比較。結果表明,環(huán)刻和環(huán)剝后壓條均可以形成愈傷組織,但環(huán)刻后壓條僅形成愈傷組織,且愈傷組織填滿了刻傷部位導致壓條形成層愈合,無法形成根系,而環(huán)剝后的壓條不僅形成了愈傷組織,最后還形成了根系。此外,不僅環(huán)刻容易導致愈傷組織積累形成層愈合,環(huán)剝寬度過短也容易使得愈傷組織填滿傷口,因此在接下來的研究中計劃可以把試驗重點放在環(huán)剝寬度和壓條時間的篩選上。
[0044] 四、結論
[0045] 野生歐洲李高空壓條較優(yōu)的生長調(diào)節(jié)劑處理為采用400mg/L?IBA進行涂抹,生根率較高,根系生長較好;較優(yōu)的包裹基質為草炭+珍珠巖+河沙,質量比為1∶1∶1的混合基質;相對于無紡布和黑膜,透明塑料薄膜更適合作為野生歐洲李高空壓條的包裹材料。