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本發(fā)明涉及通式1的化合物。

???????????????????????????????通式1
其中
Py表示在2和6位二取代的或者在2位單取代的吡啶-4-基，其中在2位 的取代基為-NR2R3、低級烷基、芳基低級烷基、或(E)-2-芳基-乙烯-1 -基，而在6位的取代基為氫、低級烷基或芳基低級烷基；未取代的喹啉-4-基； 在2位被低級烷基單取代的喹啉-4-基；在2位被低級烷基取代且在6、7、或8 位被鹵素、低級烷基、或芳基低級烷基取代的喹啉-4-基；
X表示芳基；芳基低級烷基；被芳基二取代的低級烷基；低級烷基-SO2-；芳 基-SO2-；芳基低級烷基-SO2-；低級烷基-CO-；芳基-CO-；芳基低級烷基-CO-； 低級烷基-NR6CO-；芳基-NR6CO-和芳基低級烷基-NR6-CO-。
Y表示-C(R4)(R5)-(CH2)-或-(CH2)-C(R4)(R5)-。
R1表示氫或甲基；
R2和R3獨(dú)立地表示氫；低級烷基；芳基低級烷基；或與它們所連接的氮原 子共同形成一個吡咯烷、哌啶、或嗎啉環(huán)；
R4表示氫；低級烷基；芳基；芳基低級烷基；或者與R5共同形成一個包括 R4和R5所連接的碳原子作為環(huán)原子的3-、4-、5-或6-員飽和碳環(huán)；
R5表示氫；甲基；或者與R4共同形成一個包括R4和R5所連接的碳原子作為 環(huán)原子的3-、4-、5-或6-員飽和碳環(huán)；
R6獨(dú)立地表示氫；低級烷基；或芳基低級烷基；
以及光學(xué)純的對映體或非對映體、對映體或非對映體的混合物、非對映的消 旋物、和非對映的消旋物的混合物；以及它們的藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑配合物 和形態(tài)學(xué)形式。
在通式1的定義中，術(shù)語“芳基”表示取代或未取代的芳香環(huán)或雜環(huán)系統(tǒng)， 其包括五員或六員芳環(huán)、或者稠合五-六或六-六芳環(huán)系統(tǒng)。優(yōu)選的基團(tuán)是例如 2-呋喃基、2-噻吩基、苯基、2-甲基苯基、2-聯(lián)苯基、2-甲氧基苯基、2- 苯氧基苯基、2-氯苯基、2-溴苯基、2-異丙基苯基、2-氟苯基、2-甲基磺酰 基苯基、2-氰基苯基、2-三氟甲基苯基、3-甲基苯基、3-聯(lián)苯基、3-苯氧基 苯基、3-甲氧基苯基；3-氯苯基、3-溴苯基、3-氟苯基、3-氰基苯基、3- 三氟甲基苯基、3-羧基苯基、4-甲基苯基、4-乙基苯基、4-異丙基苯基、4 -苯氧基苯基、4-甲氧基苯基、4-三氟甲基苯基、4-三氟甲氧基苯基、4-苯 氧基苯基、4-氰基苯基、4-羥基苯基、4-乙?；被交?、4-甲磺?；交?、 4-正丙基苯基、4-異丙基苯基、4-叔丁基苯基、4-正戊基苯基、4-聯(lián)苯基、 4-氯苯基、4-溴苯基、4-溴-2-乙基苯基、4-氟苯基、2，4-二氟苯基、4- 正丁氧基苯基、2，6-二甲氧基苯基、3，5-雙-三氟甲基苯基、2-吡啶基、3-吡 啶基、4-吡啶基、1-萘基、2-萘基、4-(吡咯-1-基)苯基、4-苯甲?；?苯基、5-二甲基氨基萘-1-基、5-氯-3-甲基噻吩-2-基、5-氯-3-甲 基-苯并[b]噻吩-2-基、3-(苯基磺酰基)-噻吩-2-基、2-(2，2，2-三氟 乙酰基)-1-2，3，4-四氫異喹啉-7-基、4-(3-氯-2-氰基苯氧基)苯基、 2-(5-苯甲酰氨基甲基)硫代苯基、4，5-二氯噻吩-2-基、5-喹啉基-；6- 喹啉基、7-喹啉基、8-喹啉基、(2-乙?；被?4-甲基)噻唑-5-基、或 1-甲基咪唑-4-基。
在通式1的定義中，術(shù)語“低級烷基”表示含有1～8個碳原子的飽和直鏈、 支鏈或環(huán)取代基，包含甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、正戊基、 正己基、正辛基、環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)丙基甲基等等。優(yōu)選的 低級烷基是甲基、乙基和正丙基。
術(shù)語“被芳基二取代的低級烷基”是指其中兩個氫原子被上述定義的芳基所 取代的上述定義的低級烷基?！氨环蓟〈牡图壨榛钡膬?yōu)選的實例為二苯 基甲基、2，2-二苯基乙基和1-苯甲基-2-苯基-乙基。
術(shù)語“芳基低級烷基”是指其中一個氫原子被上述定義的芳基所取代的上述 定義的低級烷基。芳基低級烷基的優(yōu)選的實例為苯甲基、苯乙基和3-苯基丙基。
術(shù)語“鹵素”包括氟、氯、溴或碘。
本發(fā)明還包括通式1的化合物的藥學(xué)上可接受的鹽。這包括與無機(jī)酸或有機(jī) 酸，諸如氫鹵酸，如鹽酸或氫溴酸、硫酸、磷酸、硝酸、檸檬酸、甲酸、乙酸、 馬來酸、酒石酸、甲磺酸、對甲苯磺酸等所形成的鹽，或者在式1化合物本質(zhì)上 為酸性的時，與無機(jī)堿，諸如堿金屬或堿土金屬堿，例如鈉、鉀、或鈣鹽等所形 成的鹽。通式1的化合物還可以兩性離子的形式存在。
本發(fā)明包含通式1的化合物的各種溶劑化配合物。溶劑化作用可以作為例如 最初的無水通式1的化合物的吸濕性的結(jié)果而發(fā)生于制造過程中、或可單獨(dú)發(fā)生。
本發(fā)明還包括通式1的化合物及其鹽和溶劑化配合物的各種形態(tài)學(xué)形式，例 如晶體的形式。特別是同種異態(tài)可能顯示出不同的溶解特性、穩(wěn)定性特征等，并 且全部包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
通式1的化合物還可以具有一個或多個不對稱碳原子并且可以被制備成光學(xué) 純的對映體或非對映體、對映體或非對映體的混合物、非對映消旋物、和非對映 消旋物的混合物的形式。本發(fā)明包含所有這些形式?？梢酝ㄟ^立體選擇性合成、 或者以已知的方式，即，通過柱色譜、薄層色譜法、HPLC、結(jié)晶等分離混合物， 從而制備這些混合物。
優(yōu)選的通式1的化合物為其中R4和R5表示氫，R1、X和Py具有通式1中所 給出的相同含義的化合物。
另一組優(yōu)選的通式1的化合物為其中R1表示氫，并且Y、X和Py具有通式 1中所給出的相同含義的化合物。
另一組優(yōu)選的通式1的化合物為其中X表示芳基、芳基低級烷基或芳基二取 代的低級烷基，并且R1、Y和Py具有通式1中所給出的含義的化合物。
另一組優(yōu)選的通式1的化合物為其中X表示芳基-SO2-或芳基低級烷基-SO2-， 并且R1、Y和Py具有通式1中所給出的含義的化合物。
另一組優(yōu)選的通式1的化合物為其中X表示芳基、芳基-CO-或芳基低級烷基 -CO-，并且R1、Y和Py具有通式1中所給出的含義的化合物。
另一組優(yōu)選的通式1的化合物為其中X表示芳基-NR6CO-或芳基低級烷基 -NR6CO-，并且R1、R6、Y和Py具有通式1中所給出的含義的化合物。
另一組優(yōu)選的通式1的化合物為其中Py表示未取代的喹啉-4-基或在2位 被低級烷基單取代的喹啉-4-基，并且R1、Y和Py具有通式1中所給出的含義 的化合物。
另一組優(yōu)選的化合物為其中Py表示未取代的在2位被R2R3N-取代的吡啶-4 -基，其中R3表示芳基低級烷基并且R2表示低級烷基，并且R1、X和Y具有通 式1所給出的含義的化合物。
另一組優(yōu)選的化合物為其中Py表示在2位被R2R3N-取代的吡啶-4-基，其 中R2表示氫，并且R1、R3、X和Y具有通式1所給出的含義的化合物。
另一組特別優(yōu)選的通式1的化合物為其中R4和R5表示氫，X表示芳基、芳 基低級烷基或芳基二取代的低級烷基，并且R1和Py具有通式1中所給出的含義 的化合物。
另一組特別優(yōu)選的通式1的化合物為其中R1、R4和R5表示氫，X表示芳基 -SO2-或芳基低級烷基-SO2-，并且Py具有通式1中所給出的含義的化合物。
另一組特別優(yōu)選的通式1的化合物為其中R1、R4和R5表示氫，X表示芳基 -CO-或芳基低級烷基-CO-，并且Py具有通式1中所給出的含義的化合物。
另一組特別優(yōu)選的通式1的化合物為其中R1、R4和R5表示氫，X表示芳基 -NR6CO-或芳基低級烷基-NR6CO-，并且R6和Py具有通式1中所給出的含義的 化合物。
另一組特別優(yōu)選的通式1的化合物為其中R1、R4和R5表示氫，Py表示未取 代的喹啉-4-基或在2位被低級烷基單取代的喹啉-4-基，并且X具有通式1 中所給出的含義的化合物。
另一組特別優(yōu)選的通式1的化合物為其中R1、R4字母R5表示氫，Py表示在 2位被R2R3N-取代的吡啶-4-基，其中R3表示芳基低級烷基且R2表示低級烷基， 并且X具有通式1中所給出的含義的化合物。
另一組特別優(yōu)選的通式1的化合物為其中R1、R4和R5表示氫，Py表示在2 位被R2R3N-取代的吡啶-4-基，其中R2表示芳基低級烷基，并且R3和X具有 通式1中所給出的含義的化合物。
另一組特別優(yōu)選的通式1的化合物為其中R1、R4和R5表示氫，X表示芳基、 芳基低級烷基或芳基二取代的低級烷基，并且Py表示未取代的喹啉-4-基或在 2位被低級烷基單取代的喹啉-4-基的化合物。
另一組特別優(yōu)選的通式1的化合物為其中R1、R4和R5表示氫，X表示芳基 -SO2-或芳基-低級烷基-SO2-，并且Py表示未取代的喹啉-4-基或在2位被低級 烷基單取代的喹啉-4-基的化合物。
另一組特別優(yōu)選的通式1的化合物為其中R1、R4和R5表示氫，X表示芳基 -CO-或芳基-低級烷基-CO-，并且Py表示未取代的喹啉-4-基或在2位被低級烷 基單取代的喹啉-4-基的化合物。
另一組最優(yōu)選的通式1的化合物為其中R1、R4和R5表示氫，X表示芳基 -NR6CO-或芳基低級烷基-N6CO-，并且Py表示未取代的喹啉-4-基或在2位 被低級烷基單取代的喹啉-4-基，R6具有通式1中所給出的含義的化合物。
優(yōu)選的通式1的化合物的實例選自下述化合物： ??實施例 ??編號 ??1 ??1-[2-(4-苯磺?；?哌嗪-1-基)-乙基]-3-(2-甲基 ??-喹啉-4-基)-脲 ??2 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(噻吩-2-磺酰 ??基)-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??3 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(甲苯-3-磺酰 ??基)-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??4 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(甲苯-2-磺酰 ??基)-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??5 ??1-{2-[4-(2-氟-苯磺?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-3- ??(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??6 ??1-{2-[4-(3-氟-苯磺酰基)-哌嗪-1-基]-乙基}-3- ??(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??7 ??1-{2-[4-(4-氟-苯磺?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-3- ??(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??8 ??1-{2-[4-(3-氰基-苯磺酰基)-哌嗪-1-基]-乙基}-3 ??-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??9 ??1-{2-[4-(4-氰基-苯磺?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-3 ??-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??10 ??1-{2-[4-(3-甲氧基-苯磺酰基)-哌嗪-1-基]-乙基} ??-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??11 ??1-{2-[4-(3-氯-苯磺?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-3- ??(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??12 ??1-{2-[4-(4-氯-苯磺酰基)-哌嗪-1-基]-乙基}-3- ??(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??13 ??1-{2-[4-(2-氯-苯磺?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-3- ??(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??14 ??3-(4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}- ??哌嗪-1-磺?；?-苯甲酸 ??15 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(萘-2-磺?；? ??-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??16 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(萘-1-磺酰基) ??-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??17 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(喹啉-8-磺酰 ??基)-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??18 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(4-三氟甲基- ??苯磺?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??19 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(2-三氟甲基- ??苯磺酰基)-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??20 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(3-三氟甲基- ??苯磺?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??21 ??1-{2-[4-(3，4-二氯-苯磺?；?-哌嗪-1-基]-乙基} ??-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??22 ??1-{2-[4-(4-丁氧基-苯磺酰基)-哌嗪-1-基]-乙基} ??-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??23 ??1-{2-[4-(4，5-二氯-噻吩-2-磺?；?-哌嗪-1-基] ??-乙基}-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??24 ??1-(2-{4-[4-(3-氯-2-氰基-苯氧基)-苯磺?；鵠- ??哌嗪-1-基}-乙基)-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??25 ??1-{2-[4-(2-甲烷磺?；?苯磺?；?-哌嗪-1-基]-乙 ??基}-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??26 ??N-[4-甲基-5-(4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)- ??脲基]-乙基}-哌嗪-1-磺酰基)-噻唑-2-基]-乙酰胺 ??27 ??1-{2-[4-(3-溴-苯磺?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-3- ??(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??28 ??1-{2-[4-(4-溴-苯磺酰基)-哌嗪-1-基]-乙基}-3- ??(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??29 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(2-三氟甲氧基 ??-苯磺?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??30 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(4-三氟甲氧基 ??-苯磺?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??31 ??1-{2-[4-(5-二甲基氨基-萘-1-磺酰基)-哌嗪-1-基] ??-乙基}-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??32 ??1-{2-[4-(5-氯-3-甲基-苯并[b]噻吩-2-磺?；?-哌 ??嗪-1-基]-乙基}-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??33 ??1-{2-[4-(4-溴-2-乙基-苯磺?；?-哌嗪-1-基]- ??乙基}-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??34 ??1-{2-[4-(3，5-雙-三氟甲基-苯磺?；?-哌嗪-1-基] ??-乙基}-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??35 ??N-[5-(4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙 ??基}-哌嗪-1-磺?；?-噻吩-2-基甲基]-苯甲酰胺 ??36 ??1-{2-[4-(4-苯磺?；?噻吩-2-磺酰基)-哌嗪-1-基] ??-乙基}-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??37 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-(2-{4-[2-(2，2，2-三 ??氟-乙?；?-1，2，3，4-四氫-異喹啉-7-磺?；鵠-哌嗪-1-基} ??-乙基)-脲 ??38 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-[2-(4-苯基甲烷磺酰基 ??-哌嗪-1-基)-乙基]-脲 ??39 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(辛烷-1-磺酰 ??基)-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??40 ??1-{2-[4-(7，7-二甲基-2-氧代-雙環(huán)[2.2.1]庚-1-基甲 ??烷磺?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-3-(2-甲基-喹啉-4-基) ??-脲 ??41 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌嗪 ??-1-羧酸聯(lián)苯基-2-基酰胺 ??42 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌嗪 ??-1-羧酸(4-苯氧基-苯基)-酰胺 ??43 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌嗪 ??-1-羧酸環(huán)己基酰胺 ??44 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌嗪 ??-1-羧酸間-甲苯基酰胺 ??45 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌嗪 ??-1-羧酸(4-甲氧基-苯基)-酰胺 ??46 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌嗪 ??-1-羧酸(2-甲氧基-苯基)-酰胺 ??47 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌嗪 ??-1-羧酸鄰-甲苯基酰胺 ??48 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌嗪 ??-1-羧酸(3-氯-苯基)-酰胺 ??49 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌嗪 ??-1-羧酸萘-2-基酰胺 ??50 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌嗪 ??-1-羧酸(2，4-二氟-苯基)-酰胺 ??51 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌嗪 ??-1-羧酸丁酰胺 ??52 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌嗪 ??-1-羧酸苯甲酰胺 ??53 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌嗪 ??-1-羧酸(2-氟-苯基)-酰胺 ??54 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌嗪 ??-1-羧酸(4-氟-苯基)-酰胺 ??55 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌嗪 ??-1-羧酸(3-氟-苯基)-酰胺 ??56 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌嗪 ??-1-羧酸苯乙基-酰胺 ??57 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌嗪 ??-1-羧酸(3-甲氧基-苯基)-酰胺 ??58 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌嗪 ??-1-羧酸4-氟-苯甲酰胺 ??59 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌嗪 ??-1-羧酸(2-異丙基-苯基)-酰胺 ??60 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌嗪 ??-1-羧酸(4-溴-苯基)-酰胺 ??61 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌嗪 ??-1-羧酸(2-苯氧基-苯基)-酰胺 ??62 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌嗪 ??-1-羧酸(4-氯-苯基)-酰胺 ??63 ??1-(2-{4-[2-(4-氯-苯基)-乙?；鵠-哌嗪-1-基}- ??乙基)-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??64 ??1-(2-{4-[2-(4-甲氧基-苯基)-乙?；鵠-哌嗪-1- ??基}-乙基)-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??65 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(萘-2-羰基) ??-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??66 ??1-(2-{4-[2-(4-異丙基-苯基)-乙?；鵠-哌嗪-1- ??基}-乙基)-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??67 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(2-萘-1-基- ??乙?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??68 ??1-[2-(4-苯甲?；?哌嗪-1-基)-乙基]-3-(2-甲基 ??-喹啉-4-基)-脲 ??69 ??1-(2-{4-[3-(4-氟-苯基)-丙?；鵠-哌嗪-1-基}- ??乙基)-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??70 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(3-苯基-丙酰 ??基)-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??71 ??1-(2-{4-[2-(4-氟-苯基)-乙?；鵠-哌嗪-1-基}- ??乙基)-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??72 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(3-對-甲苯基 ??-丙?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??73 ??1-(2-{4-[3-(2-甲氧基-苯基)-丙酰基]-哌嗪-1- ??基}-乙基)-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??74 ??1-(2-{4-[3-(4-甲氧基-苯基)-丙?；鵠-哌嗪-1- ??基}-乙基)-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??75 ??1-(2-{4-[3-(3-甲氧基-苯基)-丙酰基]-哌嗪-1- ??基}-乙基)-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??76 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-[2-(4-苯基乙?；?哌 ??嗪-1-基)-乙基]-脲 ??77 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(2-m-甲苯基- ??乙?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??78 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(2-對-甲苯基 ??-乙?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??79 ??1-{2-[4-(3-氯-苯甲?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-3- ??(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??80 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(喹啉-6-羰基) ??-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??81 ??1-{2-[4-(4-叔丁基-苯甲?；?-哌嗪-1-基]-乙基} ??-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??82 ??1-(2-{4-[2-(4-二甲基氨基-苯基)-乙?；鵠-哌嗪- ??1-基}-乙基)-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??83 ??1-{2-[4-(2，4-二甲氧基-苯甲酰基)-哌嗪-1-基]-乙 ??基}-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??84 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(4-吡咯-1-基 ??-苯甲?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??85 ??1-(2-{4-[2-(4-溴-苯基)-乙酰基]-哌嗪-1-基}- ??乙基)-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??86 ??1-{2-[4-(4-苯甲?；?苯甲酰基)-哌嗪-1-基]-乙基} ??-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??87 ??1-[2-(4-苯甲基-哌嗪-1-基)-乙基]-3-喹啉-4-基 ??-脲 ??88 ??1-[2-(4-苯甲基-哌嗪-1-基)-乙基]-3-吡啶-4-基 ??-脲 ??89 ??1-{2-[4-(4-甲氧基-苯基)-3-甲基-哌嗪-1-基]- ??乙基}-3-喹啉-4-基-脲 ??90 ??1-{2-[4-(2-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-乙基}-3- ??喹啉-4-基-脲 ??91 ??1-{2-[4-(3-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-乙基}-3- ??喹啉-4-基-脲 ??92 ??1-[2-(4-苯基-哌嗪-1-基)-乙基]-3-喹啉-4-基- ??脲 ??93 ??1-[2-(3-甲基-4-對-甲苯基-哌嗪-1-基)-乙基]-3 ??-喹啉-4-基-脲 ??94 ??1-喹啉-4-基-3-[2-(4-間-甲苯基-哌嗪-1-基)- ??乙基]-脲 ??95 ??1-{2-[4-(4-氟-苯基)-哌嗪-1-基]-乙基}-3-喹啉 ??-4-基-脲 ??96 ??1-[2-(4-苯并[1，3]二噁唑-5-基甲基-哌嗪-1-基)-乙 ??基]-3-喹啉-4-基-脲 ??97 ??1-{2-[4-(2-氟-苯基)-哌嗪-1-基]-乙基}-3-喹啉 ??-4-基-脲 ??98 ??1-喹啉-4-基-3-{2-[4-(3-三氟甲基-苯基)-哌嗪- ??1-基]-乙基}-脲 ??99 ??1-喹啉-4-基-3-[2-(4-鄰-甲苯基-哌嗪-1-基)- ??乙基]-脲 ??100 ??1-{2-[4-(3-氯-苯基)-哌嗪-1-基]-乙基}-3-喹啉 ??-4-基-脲 ??101 ??1-[2-(4-二苯甲基-哌嗪-1-基)-乙基]-3-喹啉-4- ??基-脲
由于所述的化合物具有抑制尿壓素II的作用的能力，因此它們可被用于治療 與血管收縮、增殖相關(guān)的疾病或者其他的與尿壓素II的作用相關(guān)的疾病的治療。 這類疾病的實例為高血壓、動脈粥樣硬化、咽痛或心肌缺血、充血性心力衰竭、 心功能不全、心臟心律不齊、腎缺血、習(xí)慣性的腎病、腎衰竭、中風(fēng)、腦血管痙 攣、腦缺血、麻痹性癡呆、偏頭痛、蛛網(wǎng)膜下出血、糖尿病、糖尿病性動脈病、 糖尿病性腎病、結(jié)締組織疾病、肝硬化、哮喘、慢性阻塞性肺病、高空肺水腫、 雷諾氏(Raynaud’s)綜合癥、門靜脈高壓癥、甲狀腺功能障礙、肺水腫、肺性高 血壓癥、或肺纖維化。它們還可以用于氣囊或支架血管成形術(shù)后的再狹窄的預(yù)防、 用于癌癥、前列腺肥大、勃起功能障礙、聽力喪失、黑內(nèi)障、慢性支氣管炎、哮 喘、革蘭氏陰性敗血病、休克、鐮刀形紅細(xì)胞貧血病、鐮狀細(xì)胞急性胸綜合癥、 血管球性腎炎、腎絞痛、青光眼的治療，糖尿病并發(fā)癥、血管或心臟手術(shù)或器官 移植后的并發(fā)癥、環(huán)孢子菌素治療的并發(fā)癥、疼痛、成癮癥、精神分裂癥、阿滋 海默(Alzheimer)病、焦慮癥、強(qiáng)迫觀念與行為疾病、癲癇患者癲癇發(fā)作、緊張 癥、抑郁癥、麻痹性癡呆、神經(jīng)性肌肉障礙、神經(jīng)變性的疾病、以及其他的與尿 壓素II或尿壓素II受體的調(diào)節(jié)異常相關(guān)的疾病的治療和預(yù)防。
這些組合物可以是經(jīng)腸道給藥形式或者經(jīng)口給藥形式(例如片劑、糖錠劑、 膠囊、乳劑、溶液或懸浮液)、經(jīng)鼻給藥形式(例如噴霧劑或氣溶膠)、或者直 腸給藥形式(栓劑)。這些化合物還可以是肌肉注射、非腸道或靜脈形式給藥的， 例如血管注射劑溶液的形式。
這些藥物組合物可以包含式1化合物以及它們的藥學(xué)上可接受的鹽與制藥工 業(yè)中常見的無機(jī)和/或有機(jī)賦形劑，例如乳糖、玉米或其衍生物、滑石、硬脂酸或 這些材料的鹽的組合。
對于膠囊劑而言，可以使用植物油、蠟、脂肪、液體或半液體多元醇等。對 于溶液和糖漿制劑而言，使用例如水、多元醇、蔗糖、葡萄糖等。血管注射劑是 使用例如水、多元醇、醇、甘油、植物油、卵磷脂、脂質(zhì)體等來制備的。栓劑是 使用天然或氫化的油、蠟、脂肪酸(脂肪)、液體或半液體醇來制備的。
該組合物另外還可包含防腐劑、穩(wěn)定性改性劑、粘度改善劑或調(diào)節(jié)劑、溶解 度改善劑、甜味劑、染料、味道改善劑、用于改變該滲透壓的鹽、緩沖劑、抗氧 化劑等。
通式1的化合物還與一種或多種有治療價值的物質(zhì)組合使用，這些有治療價 值的物質(zhì)包括例如：α-和β-阻滯劑，如芐胺唑啉、苯氧苯扎明、阿替洛爾、萘 異丙促胺、噻嗎洛爾、美托洛爾、卡替洛爾、卡維地洛等；血管擴(kuò)張劑如肼酞嗪、 米諾地爾、二氮嗪氟司喹南等；鈣離子拮抗劑，如地爾硫卓、硝吡胺甲酯、尼莫 地平、異搏定、利心平等；血管緊張肽轉(zhuǎn)化酶-抑制劑，如西拉普利、甲巰丙脯酸、 依托普利、賴諾普利等；鉀通道活化劑，如吡那地爾、chromakalim等；血管緊 張素受體拮抗體，如洛沙坦、纈沙坦、坎地沙坦、依貝沙坦、依普沙坦、替米沙 坦和他索沙坦等；利尿劑，如雙氫氯噻嗪、氯噻嗪、丙酮醇酰胺、丁尿胺、呋喃 苯胺酸、美托拉宗、氯噻酮等；抗交感神經(jīng)藥物，例如甲基多巴、克隆尼丁、胍 那芐、利血平等；內(nèi)皮素受體拮抗劑，如博森坦(bosentan)、替唑生坦、達(dá)盧 生坦、阿曲生坦、enrasentan或sitaxsentan等；抗高血脂劑，如洛弗斯特丁、普伐 他汀、氟伐他汀、阿伐他汀、西立伐他汀、斯伐他汀等；及其他用于治療高血壓、 心血管疾病或上述其他病癥的藥物。
可以根據(jù)具體的情況在很大范圍內(nèi)調(diào)整劑量。通常，對體重約70kg的成年 人而言，日劑量應(yīng)在大約1mg～大約3g的范圍內(nèi)，優(yōu)選大約3mg～大約1g， 特別優(yōu)選大約5mg～大約300mg。該劑量優(yōu)選應(yīng)該是每天等量服用1～3劑。通 常，兒童應(yīng)當(dāng)接收適應(yīng)于他們的體重和年齡的較低劑量。
本發(fā)明的化合物的一般制備方法
可以使用本領(lǐng)域通常已知的方法，根據(jù)如下反應(yīng)序列制備通式1的化合物。 為了簡明和清楚起見，有時僅僅對幾個得到通式1的化合物的可能的合成路線進(jìn) 行了描述。
對于通式1的化合物的合成，可以使用方案A至E中所述的一般合成路線。 方案A至E中所使用的通用基團(tuán)X、Y、Py、R1、R2、R3、R4、R5和R6具有上 述通式1中所給出的定義。在試驗部分對所使用的其他縮寫進(jìn)行了定義。在一些 實例中，通用基團(tuán)X可能與方案A至E中所示的集合不相容，并因而需要使用 保護(hù)基。保護(hù)基的使用是本領(lǐng)域所公知的(參閱例如“Protective?Groups?in?Organic Synthesis”，T.W.Greene，P.G.M.Wuts，Wiley-Interscience，1999)。出于該討 論的目的，假定在需要時就使用這種保護(hù)基。
其中Y為-(CH2)-C(R4)(R5)-的通式1的化合物的制備。其中Y為 -(CH2)-C(R4)(R5)-的通式1的化合物的制備是按照方案A來制備的。其中Y為 -C(R4)(R5)-(CH2)-的通式1的化合物是按照方案B來制備的。
方案A

???????????????????????????????通式1
??????????????????????Y＝-(CH2)-C(R4)(R5)-
方案A中的通式結(jié)構(gòu)I的4-取代的-哌嗪或者是市售的外消旋形式或光學(xué) 活性形式，或者通過本領(lǐng)域的已知方法制備的外消旋的或光學(xué)活性的形式。方案 A中的通式結(jié)構(gòu)II的脲基乙酸衍生物是按照下述方案F來制備的。使用通式結(jié)構(gòu) II的脲基乙酸衍生物對通式結(jié)構(gòu)I的哌嗪的N-?；峭ㄟ^在極性溶劑(例如 DMF)中，在略微化學(xué)計量過量的偶合試劑(例如碳二亞胺)的存在下完成的， 得到通式結(jié)構(gòu)III的酰胺。在極性溶劑(例如THF)中使用試劑(例如LiAlH4) 對酰胺羰基的選擇性還原得到其中Y為-(CH2)-C(R4)(R5)-的通式1的化合物。
通式1的化合物的制備。作為選擇，這些化合物是按照方案B來制備的。
方案B

通式結(jié)構(gòu)IV的胺與通式結(jié)構(gòu)V的異氰酸酯發(fā)生反應(yīng)，得到通式1的最終化 合物?；蛘?，通式結(jié)構(gòu)IV的胺與通式結(jié)構(gòu)VI的脲的發(fā)生反應(yīng)，得到通式1的最 終化合物。通式結(jié)構(gòu)V的異氰酸酯以及通式結(jié)構(gòu)VI的脲的制備如下述方案E所 述。通式結(jié)構(gòu)IV的胺制備如下述方案G所述。
其中R 4 和R 5 為H的通式1的化合物的制備。作為選擇，這些化合物是按照 方案C所述的方法制備的。
方案C

方案C中的通式結(jié)構(gòu)I的4-取代的-哌嗪或者是市售的外消旋形式或光學(xué) 活性形式，或者通過本領(lǐng)域的已知方法制備的外消旋的或光學(xué)活性的形式。方案 C中的通式結(jié)構(gòu)VII的鹵代烷基脲是按照下述方案E來制備的。使用通式結(jié)構(gòu)VII 的鹵代烷基脲對通式結(jié)構(gòu)I的哌嗪的N-烷基化是在極性溶劑(例如四氫呋喃) 中，在低于化學(xué)計量的量的碘鹽(例如NaI)以及略微化學(xué)計量過量的酸清除劑 (例如NaHCO3)的存在下完成的，從而得到通式1的目標(biāo)化合物。
其中X表示低級烷基-SO2-、芳基-SO2-、芳基低級烷基-SO2-、低級烷基-CO- 、 芳基-CO-、芳基低級烷基-CO-、低級烷基-NR 6 CO-、芳基-NR 6 CO-、芳基低級烷 基-NR 6 CO-，并且R 1 、R 4 、R 5 和R 6 表示H的通式1的化合物。作為選擇，這些 化合物是按照方案D所述的方法制備的。
方案D

通式結(jié)構(gòu)VIII的氨基甲酸酯是市售的或者可以通過本領(lǐng)域已知的方法來制 備。通式結(jié)構(gòu)VII的鹵代烷基脲是按照下述方案E來制備的。通式結(jié)構(gòu)VIII的氨 基甲酸酯與通式結(jié)構(gòu)VII的鹵代烷基脲在極性溶劑(例如四氫呋喃)中在低于化 學(xué)計量的量碘鹽(例如NaI)以及略微化學(xué)計量過量的酸清除劑(例如NaHCO3) 的存在下發(fā)生反應(yīng)，隨后在酸性條件下(例如在CH2Cl2中與TFA反應(yīng))將酯除 去。所得到的通式結(jié)構(gòu)IX的化合物與市售的或者已知的磺酰氯化物，異氰酸酯 或有活性的酸衍生物反應(yīng)，被轉(zhuǎn)化成其中X表示低級烷基-SO2-、芳基-SO2-、芳 基低級烷基-SO2-、低級烷基-CO-、芳基-CO-、芳基低級烷基-CO-、低級烷基 -NR6CO-、芳基-NR6CO-、芳基低級烷基-NR6CO-，并且R1、R4、R5表示H的通 式1的最終化合物。
方案A、B、C和D中所使用的合成中間體。如上述通式1所定義的包含基 團(tuán)Py的合成中間體是通過方案E和F所示的方法得到的。
方案E

通式結(jié)構(gòu)XI的羧酸是市售的或者通過已知的方法制備的。與二苯基磷?；?疊氮化物的反應(yīng)得到?；B氮，然后通過庫爾提烏斯(Curtius)重排得到在原位 反應(yīng)中使用的通式結(jié)構(gòu)V的異氰酸酯。通式V的異氰酸酯與通式X的胺的反應(yīng) 得到通式VI的脲。通式結(jié)構(gòu)V的異氰酸酯在酸清除劑(例如DIPEA)的存在下 與鹵代乙胺鹽酸鹽反應(yīng)得到通式結(jié)構(gòu)VII的脲。通式結(jié)構(gòu)V的異氰酸酯與叔丁醇 反應(yīng)得到相應(yīng)的氨甲?；?，然后使用酸的水溶液(例如HCl)水解，得到通式 結(jié)構(gòu)X的胺。通式結(jié)構(gòu)X的胺與市售的異氰酸氯乙基酯在極性非質(zhì)子溶劑(例如 四氫呋喃)的存在下反應(yīng)，得到通式結(jié)構(gòu)VII的脲。
方案F

通式結(jié)構(gòu)X的胺與通式結(jié)構(gòu)V的異氰酸酯反應(yīng)得到通式結(jié)構(gòu)VI的對稱的脲。 通式結(jié)構(gòu)X的胺與市售的通式XII的2-異氰酸根合-羧酸酯在極性非質(zhì)子溶劑 (例如四氫呋喃)中反應(yīng)，隨后在酸的水溶液(例如HCl)中將酯水解，得到通 式結(jié)構(gòu)II的羧酸?；蛘?，通式結(jié)構(gòu)V的異氰酸酯以及通式結(jié)構(gòu)VI脲與通式結(jié)構(gòu) XIII的氨基酸酯反應(yīng)，然后在酸的水溶液(例如HCl)中水解，得到通式結(jié)構(gòu)II 的羧酸。
通式結(jié)構(gòu)IV的合成中間體是通過方案G所示的方法得到的。
方案G

方案A中的通式結(jié)構(gòu)I的4-取代的-哌嗪或者是市售的外消旋形式或光學(xué) 活性形式，或者通過本領(lǐng)域的已知方法制備的外消旋的或光學(xué)活性的形式。通式 XV的酮與醛是市售的或者通過本領(lǐng)域已知的方法制備得到的。通式XV的酮與 醛與通式結(jié)構(gòu)I的4-取代的-哌嗪在氰根離子授體(例如丙酮氰基醇)的存在 下反應(yīng)，得到通式結(jié)構(gòu)XVI的哌嗪衍生物。在極性非質(zhì)子溶劑(例如THF)中使 用還原劑(例如LiAlH4)還原氰基，得到其中Y為-C(R4)(R5)-(CH2)-的通式結(jié)構(gòu) IV的中間體伯胺。方案G中通式結(jié)構(gòu)XIV鹵代烷基氨基甲酸酯是市售的或者是通 過本領(lǐng)域已知的方法制備的。使用通式結(jié)構(gòu)XIV的鹵代烷基氨基甲酸酯對通式結(jié) 構(gòu)I的哌嗪的N-烷基化是在極性溶劑(例如THF)中、在略微化學(xué)計量過量的 酸清除劑(例如DIPEA)的存在下完成的，從而得到通式結(jié)構(gòu)XIX的化合物。通 過本領(lǐng)域已知的方法，例如在溶劑(例如CH2Cl2)中使用TFA切斷所得到的氨 基甲酸酯，得到其中Y為-(CH2)-C(R4)(R5)-的通式結(jié)構(gòu)IV的中間體伯胺衍生物。 通式結(jié)構(gòu)XVII的保護(hù)氨基酸是市售的或者通過本領(lǐng)域已知的方法制備得到的。 使用通式結(jié)構(gòu)XVII的化合物對通式結(jié)構(gòu)IV的哌嗪的N-?；窃谝阎臈l件下， 例如在極性溶劑(例如DMF)中，在略微化學(xué)計量過量的偶聯(lián)劑(例如碳二亞胺) 的存在下完成的，得到通式結(jié)構(gòu)XX的化合物。使用試劑(例如LiAlH4)還原并 脫保護(hù)，得到其中Y為-(CH2)-C(R4)(R5)-的通式結(jié)構(gòu)IV的中間體伯胺。
現(xiàn)在通過一些非限制性的實施例對本發(fā)明的上述一般性說明進(jìn)行進(jìn)一步的說 明。
發(fā)明實施例
略語表
BSA????????????牛血清清蛋白
CDI????????????N，N-羰基二咪唑
DIPEA??????????二異丙基乙胺
DMF????????????二甲基甲酰胺
DMSO???????????二甲亞砜
DPPA???????????二苯基磷?；B氮化物
EDC????????????N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳二亞胺鹽酸鹽
EDTA???????????乙二胺四乙酸
ESI????????????電子噴霧離子化
EtOAc?????????乙酸乙酯
Hex????????????己烷
HOBt???????????1-羥基苯并三唑
AcOH??????????乙酸
HPLC???????????高效液相色譜
LC-MS??????????液相色譜-質(zhì)譜
LDA????????????二異丙基酰胺鋰
MeOH??????????甲醇
min????????????分鐘
MHz????????????兆赫
MS?????????????質(zhì)譜
NMR????????????核磁共振
ppm????????????百萬分之一
PBS????????????磷酸緩沖鹽水
sat.???????????飽和的
TBTU???????????2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲溴化物
TEA????????????三乙胺
TFA????????????三氟乙酸
THF????????????四氫呋喃
TLC?????????????薄層色譜
tR?????????????保留時間
反應(yīng)通常是在惰性氣氛(例如N2)在空氣干燥的玻璃器皿中進(jìn)行的。所使用 的溶劑是從市場上購買的。蒸發(fā)是在旋轉(zhuǎn)的蒸發(fā)器中，減壓條件下在50℃的水浴 溫度中進(jìn)行的。LC-MS表征是在使用ESI的Finnigan?HP1100平臺上進(jìn)行的， 并使用Navigator?AQK檢測器進(jìn)行正離子檢測。分析型液相色譜分離是通過方法 A、或者在特別說明時通過方法B來進(jìn)行的。方法A包括一個30×4.6毫米大小 的C18柱以及一個包含溶于水中(包含0.04％TFA)的2～95％CH3CN(包含0.013 TFA)的1分鐘梯度、流速為0.45mL/min的流動相。方法B包括一個30×4.6mm 大小的C18柱以及一個包含含有1％甲酸的CH3CN-水(1∶9)的等濃度流動相。 保留時間(tR)的單位為min.。TLC是在預(yù)涂布硅膠60F254玻璃板(Merck)上 進(jìn)行的。制備HPLC是在Varian/Gilson平臺上使用大小為60×21的C18柱以及 包含溶于含有0.05％的甲酸的水中的梯度為2～95％的CH3CN的流動相中進(jìn)行 的。
實施例1.
1-[2-(4-苯磺酰基-哌嗪-1-基)-乙基]-3-(2-甲基-喹啉-4- 基)-脲
1A.1-(2-氯-乙基)-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲

在室溫下向4-氨基-2-甲基喹啉(12.6g，80mmol)的THF(480mL) 溶液中加入2-氯乙基異氰酸酯(10.2mL，120mmol)。在室溫下將反應(yīng)混合物 攪拌40小時。加入MeOH(100mL)，并繼續(xù)攪拌1小時。蒸發(fā)反應(yīng)混合物并 將殘渣溶于CH2Cl2中。使用1N?HCl(250mL)振蕩有機(jī)層，并通過過濾收集所 得到的沉淀。使用CH2Cl2(100mL)、飽和NaHCO3(2×100mL)、以及水(4 ×100mL)洗滌固體。在室溫下在HV下對所得到的固體干燥14小時，得到標(biāo) 題化合物。
1B.4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌嗪-1-羧酸 叔丁基酯

在70℃下在密封容器中，將哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(10mmol)、1-(2 -氯-乙基)-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲(10mmol)、NaHCO3(20mmol)、 NaI(0.5mmol)和THF(70mL)混合物攪拌6天。過濾反應(yīng)混合物，反應(yīng)至干 燥，并通過制備HPLC純化該殘渣得到標(biāo)題化合物。
1C.1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-(2-哌嗪-1-基-乙基)-脲

使用濃HCl(3.5mL)對溶于AcOH(35mL)的4-{2-[3-(2-甲基- 喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(5.5mmol)溶液進(jìn)行 處理。30分鐘后，冷凍反應(yīng)混合物并凍干，得到二鹽酸化物鹽形式的標(biāo)題化合物。
1D.1-[2-(4-苯磺?；?哌嗪-1-基)-乙基]-3-(2-甲基-喹啉- 4-基)-脲

向1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-(2-哌嗪-1-基-乙基)-脲(0.025 mmol)、DIPEA(6mL)和THF(1mL)的混合物中加入溶于THF(1mL)的 苯磺酰氯(0.03mmol)溶液。在40℃下加熱反應(yīng)混合物18小時，然后蒸發(fā)至干 燥。將殘渣溶于甲酸(1mL)中，并使用制備HPLC純化得到標(biāo)題化合物。
通過類似方法制得下述化合物： ??實施例 ??tr ??MS ??(ES+) ??1 ??1-[2-(4-苯磺?；?哌嗪-1-基)-乙基]-3 ??-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??0.96 ??454.19 ??2 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(噻吩 ??-2-磺?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??0.94 ??460.13 ??3 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(甲苯 ??-3-磺?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??1.05 ??468.22 ??4 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(甲苯 ??-2-磺?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??1.03 ??468.18 ??5 ??1-{2-[4-(2-氟-苯磺酰基)-哌嗪-1-基]- ??乙基}-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??0.98 ??472.19 ??6 ??1-{2-[4-(3-氟-苯磺?；?-哌嗪-1-基]- ??乙基}-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??1.03 ??472.18 ??7 ??1-{2-[4-(4-氟-苯磺?；?-哌嗪-1-基]- ??乙基}-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??1.01 ??472.17 ??8 ??1-{2-[4-(3-氰基-苯磺?；?-哌嗪-1-基] ??-乙基}-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??0.99 ??479.17 ??9 ??1-{2-[4-(4-氰基-苯磺?；?-哌嗪-1-基] ??-乙基}-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??1.00 ??479.21 ??10 ??1-{2-[4-(3-甲氧基-苯磺酰基)-哌嗪-1- ??基]-乙基}-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??1.04 ??484.2 ??11 ??1-{2-[4-(3-氯-苯磺?；?-哌嗪-1-基]- ??乙基}-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??1.09 ??488.16 ??12 ??1-{2-[4-(4-氯-苯磺?；?-哌嗪-1-基]- ??乙基}-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??1.10 ??488.14 ??13 ??1-{2-[4-(2-氯-苯磺?；?-哌嗪-1-基]- ??乙基}-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??1.03 ??488.13 ??14 ??3-(4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基] ??-乙基}-哌嗪-1-磺酰基)-苯甲酸 ??0.81 ??498.16 ??15 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(萘- ??2-磺?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??1.04 ??504.18 ??16 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(萘- ??1-磺?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??1.03 ??504.16 ??17 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(喹啉 ??-8-磺?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??0.87 ??505.16 ??18 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(4- ??三氟甲基-苯磺酰基)-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??1.05 ??522.18 ??19 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(2- ??三氟甲基-苯磺?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??1.00 ??522.15 ??20 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(3- ??三氟甲基-苯磺?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??1.05 ??522.14 ??21 ??1-{2-[4-(3，4-二氯-苯磺酰基)-哌嗪-1-基] ??-乙基}-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??1.06 ??522.08 ??22 ??1-{2-[4-(4-丁氧基-苯磺?；?-哌嗪-1- ??基]-乙基}-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??1.09 ??526.22 ??23 ??1-{2-[4-(4，5-二氯-噻吩-2-磺?；?-哌嗪 ??-1-基]-乙基}-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??1.07 ??528 ??24 ??1-(2-{4-[4-(3-氯-2-氰基-苯氧基)-苯 ??磺?；鵠-哌嗪-1-基}-乙基)-3-(2-甲基-喹啉 ??-4-基)-脲 ??1.09 ??605.14 ??25 ??1-{2-[4-(2-甲烷磺?；?苯磺酰基)-哌嗪- ??1-基]-乙基}-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??0.82 ??532.12 ??26 ??N-[4-甲基-5-(4-{2-[3-(2-甲基-喹啉- ??4-基)-脲基]-乙基}-哌嗪-1-磺?；?-噻唑-2 ??-基]-乙酰胺 ??0.84 ??532.1 ??27 ??1-{2-[4-(3-溴-苯磺酰基)-哌嗪-1-基]- ??乙基}-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??1.00 ??532.01 ??28 ??1-{2-[4-(4-溴-苯磺?；?-哌嗪-1-基]- ??乙基}-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??1.01 ??532.02 ??29 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(2- ??三氟甲氧基-苯磺酰基)-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??1.04 ??538.11 ??30 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(4- ??三氟甲氧基-苯磺?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??1.06 ??538.13 ??31 ??1-{2-[4-(5-二甲基氨基-萘-1-磺酰基)- ??哌嗪-1-基]-乙基}-3-(2-甲基-喹啉-4-基)- ??脲 ??1.02 ??547.2 ??32 ??1-{2-[4-(5-氯-3-甲基-苯并[b]噻吩-2-磺 ??酰基)-哌嗪-1-基]-乙基}-3-(2-甲基-喹啉-4 ??-基)-脲 ??1.10 ??558.11 ??33 ??1-{2-[4-(4-溴-2-乙基-苯磺?；?-哌嗪 ??-1-基]-乙基}-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??1.08 ??560.12 ??34 ??1-{2-[4-(3，5-雙-三氟甲基-苯磺?；?-哌 ??嗪-1-基]-乙基}-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??1.10 ??590.1 ??35 ??N-[5-(4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)- ??脲基]-乙基}-哌嗪-1-磺酰基)-噻吩-2-基甲基] ??-苯甲酰胺 ??1.00 ??593.12 ??36 ??1-{2-[4-(4-苯磺?；?噻吩-2-磺?；?- ??哌嗪-1-基]-乙基}-3-(2-甲基-喹啉-4-基)- ??脲 ??1.05 ??600.09 ??37 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-(2-{4-[2- ??(2，2，2-三氟-乙酰基)-1，2，3，4-四氫-異喹啉-7- ??磺?；鵠-哌嗪-1-基}-乙基)-脲 ??1.05 ??605.19 ??38 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-[2-(4-苯基 ??甲烷磺?；?哌嗪-1-基)-乙基]-脲 ??0.76 ??468.16 ??39 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(辛烷 ??-1-磺?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??1.05 ??490.25 ??40 ??1-{2-[4-(7，7-二甲基-2-氧代-雙環(huán)[2.2.1]庚 ??-1-基甲烷磺?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-3-(2- ??甲基-喹啉-4-基)-脲 ??0.83 ??528.2
實施例41
4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌嗪-1-羧酸聯(lián)苯 基-2-基酰胺

向溶于THF(0.3mL)的1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-(2-哌嗪-1 -基-乙基)-脲(0.03mmol)的溶液中加入溶于THF(0.6mL)的2-聯(lián)苯基 異氰酸酯(0.09mmol)溶液。然后攪拌反應(yīng)18小時，然后用水(0.1mL)冷凝 反應(yīng)，并繼續(xù)攪拌0.5小時。蒸發(fā)該反應(yīng)混合物。將殘渣溶于甲酸/TFA(1∶1；1 mL)的混合物中，并使用準(zhǔn)備的HPLC純化得到標(biāo)題化合物。
通過類似方法制得下述化合物： ??實施例 ??tr ??MS ??(ES+) ??41 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}- ??哌嗪-1-羧酸聯(lián)苯基-2-基酰胺 ??0.98 ??509.22 ??42 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}- ??哌嗪-1-羧酸(4-苯氧基-苯基)-酰胺 ??1.06 ??525.23 ??43 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}- ??哌嗪-1-羧酸環(huán)己基酰胺 ??0.81 ??439.24 ??44 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}- ??哌嗪-1-羧酸間-甲苯基酰胺 ??0.86 ??447.23 ??45 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}- ??哌嗪-1-羧酸(4-甲氧基-苯基)-酰胺 ??0.78 ??463.19 ??46 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}- ??哌嗪-1-羧酸(2-甲氧基-苯基)-酰胺 ??0.79 ??463.21 ??47 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}- ??哌嗪-1-羧酸鄰-甲苯基酰胺 ??0.78 ??447.22 ??48 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}- ??哌嗪-1-羧酸(3-氯-苯基)-酰胺 ??0.91 ??467.16 ??49 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}- ??哌嗪-1-羧酸萘-2-基酰胺 ??0.97 ??483.21 ??50 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}- ??哌嗪-1-羧酸(2，4-二氟-苯基)-酰胺 ??0.78 ??469.18 ??51 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}- ??哌嗪-1-羧酸丁酰胺 ??0.73 ??413.2 ??52 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}- ??哌嗪-1-羧酸苯甲酰胺 ??0.8 ??447.18 ??53 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}- ??哌嗪-1-羧酸(2-氟-苯基)-酰胺 ??0.76 ??451.21 ??54 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}- ??哌嗪-1-羧酸(4-氟-苯基)-酰胺 ??0.82 ??451.19 ??55 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}- ??哌嗪-1-羧酸(3-氟-苯基)-酰胺 ??0.84 ??451.15 ??56 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}- ??哌嗪-1-羧酸苯乙基-酰胺 ??0.86 ??461.23 ??57 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}- ??哌嗪-1-羧酸(3-甲氧基-苯基)-酰胺 ??0.82 ??463.2 ??58 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}- ??哌嗪-1-羧酸4-氟-苯甲酰胺 ??0.84 ??465.21 ??59 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}- ??哌嗪-1-羧酸(2-異丙基-苯基)-酰胺 ??0.93 ??475.25 ??60 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}- ??哌嗪-1-羧酸(4-溴-苯基)-酰胺 ??0.96 ??511.1 ??61 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}- ??哌嗪-1-羧酸(2-苯氧基-苯基)-酰胺 ??1.02 ??525.2 ??62 ??4-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}- ??哌嗪-1-羧酸(4-氯-苯基)-酰胺 ??0.93 ??467.13
實施例63.
1-(2-{4-[2-(4-氯-苯基)-乙?；鵠-哌嗪-1-基}-乙基)-3- (2-甲基-喹啉-4-基)-脲

向溶于DMF(0.3mL)的1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-(2-哌嗪- 1-基-乙基)-脲(0.03mmol)溶液中加入DIPEA(3eq)。使用溶于DMF(0.25 mL)的吡啶-2-羧酸(1.1eq)溶液處理所得到的溶液。加入溶于DMF(0.25mL) 的TBTU(1.1eq)溶液。在20℃下攪拌反應(yīng)45分鐘。蒸干該反應(yīng)混合物。將殘 渣溶于CH3CN/H2O/TFA(6∶10∶1；1mL)的混合物中，并使用準(zhǔn)備的HPLC 純化。
通過類似方法制得下述化合物： ??實施例 ??tr ??MS ??(ES+) ??63 ??1-(2-{4-[2-(4-氯-苯基)-乙?；鵠-哌嗪-1- ??基}-乙基)-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??0.92 ??466.17 ??64 ??1-(2-{4-[2-(4-甲氧基-苯基)-乙酰基]-哌嗪 ??-1-基}-乙基)-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??0.82 ??462.2 ??65 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(萘-2-羰 ??基)-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??0.93 ??468.18 ??66 ??1-(2-{4-[2-(4-異丙基-苯基)-乙?；鵠-哌嗪 ??-1-基}-乙基)-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??1.04 ??474.23 ??67 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(2-萘-1 ??-基-乙?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??0.98 ??482.22 ??68 ??1-[2-(4-苯甲?；?哌嗪-1-基)-乙基]-3-(2 ??-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??0.75 ??418.15 ??69 ??1-(2-{4-[3-(4-氟-苯基)-丙酰基]-哌嗪-1- ??基}-乙基)-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??0.91 ??464.21 ??70 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(3-苯基- ??丙?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??0.86 ??446.22 ??71 ??1-(2-{4-[2-(4-氟-苯基)-乙酰基]-哌嗪-1- ??基}-乙基)-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??0.83 ??450.15 ??72 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(3-對-甲 ??苯基-丙?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??0.95 ??460.25 ??73 ??1-(2-{4-[3-(2-甲氧基-苯基)-丙?；鵠-哌嗪 ??-1-基}-乙基)-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??0.91 ??476.27 ??74 ??1-(2-{4-[3-(4-甲氧基-苯基)-丙?；鵠-哌嗪 ??-1-基}-乙基)-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??0.87 ??476.24 ??75 ??1-(2-{4-[3-(3-甲氧基-苯基)-丙?；鵠-哌嗪 ??-1-基}-乙基)-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??0.89 ??476.26 ??76 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-[2-(4-苯基乙酰基 ??-哌嗪-1-基)-乙基]-脲 ??0.80 ??432.24 ??77 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(2-間-甲 ??苯基-乙?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??0.88 ??446.21 ??78 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(2-對-甲 ??苯基-乙酰基)-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??0.88 ??446.2 ??79 ??1-{2-[4-(3-氯-苯甲?；?-哌嗪-1-基]-乙基} ??-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??0.85 ??452.2 ??80 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(喹啉-6- ??羰基)-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??0.63 ??469.22 ??81 ??1-{2-[4-(4-叔丁基-苯甲酰基)-哌嗪-1-基]- ??乙基}-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??1.04 ??474.26 ??82 ??1-(2-{4-[2-(4-二甲基氨基-苯基)-乙?；鵠- ??哌嗪-1-基}-乙基)-3-(2-甲基-喹啉-4-基)- ??脲 ??0.62 ??475.32 ??83 ??1-{2-[4-(2，4-二甲氧基-苯甲?；?-哌嗪-1-基] ??-乙基}-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??0.80 ??478.21 ??84 ??1-(2-甲基-喹啉-4-基)-3-{2-[4-(4-吡咯- ??1-基-苯甲?；?-哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??0.95 ??483.22 ??85 ??1-(2-{4-[2-(4-溴-苯基)-乙?；鵠-哌嗪-1- ??基}-乙基)-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??0.95 ??510.14 ??86 ??1-{2-[4-(4-苯甲酰基-苯甲?；?-哌嗪-1-基] ??-乙基}-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲 ??0.98 ??522.18
實施例87
1-[2-(4-苯甲基-哌嗪-1-基)-乙基]-3-喹啉-4-基-脲 87A.1-(2-氯乙基)-3-喹啉-4-基-脲

向溶于干THF的4-氨基喹啉(3.46g，24mmol)的溶液中加入異氰酸氯乙 基酯(3.1mL，36mmol)。在室溫下將反應(yīng)混合物攪拌18小時。加入MeOH(10 mL)，并繼續(xù)攪拌1小時。蒸發(fā)該反應(yīng)混合物，并使用DCM和5％的檸檬酸水 溶液(150mL)進(jìn)行分配。使用固體NaHCO3小心地將水層調(diào)節(jié)到pH值等于9。 過濾沉淀物，使用H2O(5×20mL)和Et2O(2×20mL)洗滌，并在45℃下在 真空中干燥，得到標(biāo)題化合物。
87B.1-[2-(4-苯甲基-哌嗪-1-基)-乙基]-3-喹啉-4-基-脲

向溶于干THF(1mL)的4-苯甲基-哌嗪(0.03mmol)的溶液中加入1- (2-氯-乙基)-3-喹啉-4-基-脲(0.03mmol)、固體NaHCO3(2.5mg)、 和NaI(1mg)。緊緊地密封燒瓶并在70℃下振蕩6天。蒸發(fā)反應(yīng)混合物，將其 溶于甲酸中，并通過制備HPLC純化該殘渣得到標(biāo)題混合物。
通過類似方法制備下述化合物。 ??實施例 ??tr ??MS ??(ES+) ??87 ??1-[2-(4-苯甲基-哌嗪-1-基)-乙基]-3-喹啉 ??-4-基-脲 ??0.77 ??390.07 ??88 ??1-[2-(4-苯甲基-哌嗪-1-基)-乙基]-3-吡啶 ??-4-基-脲 ??0.62 ??340.09 ??89 ??1-{2-[4-(4-甲氧基-苯基)-3-甲基-哌嗪-1- ??基]-乙基}-3-喹啉-4-基-脲 ??0.93 ??420.17 ??90 ??1-{2-[4-(2-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-乙基} ??-3-喹啉-4-基-脲 ??0.89 ??406.17 ??91 ??1-{2-[4-(3-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-乙基} ??-3-喹啉-4-基-脲 ??0.92 ??406.17 ??92 ??1-[2-(4-苯基-哌嗪-1-基)-乙基]-3-喹啉-4 ??-基-脲 ??0.88 ??376.14 ??93 ??1-[2-(3-甲基-4-對-甲苯基-哌嗪-1-基)-乙 ??基]-3-喹啉-4-基-脲 ??1.01 ??404.15 ??94 ??1-喹啉-4-基-3-[2-(4-間-甲苯基-哌嗪-1- ??基)-乙基]-脲 ??0.98 ??390.11 ??95 ??1-{2-[4-(4-氟-苯基)-哌嗪-1-基]-乙基}-3 ??-喹啉-4-基-脲 ??0.92 ??394.18 ??96 ??1-[2-(4-苯并[1，3]二噁唑-5-基甲基-哌嗪-1- ??基)-乙基]-3-喹啉-4-基-脲 ??0.79 ??434.16 ??97 ??1-{2-[4-(2-氟-苯基)-哌嗪-1-基]-乙基}-3 ??-喹啉-4-基-脲 ??0.92 ??394.14 ??98 ??1-喹啉-4-基-3-{2-[4-(3-三氟甲基-苯基)- ??哌嗪-1-基]-乙基}-脲 ??1.09 ??444.12 ??99 ??1-喹啉-4-基-3-[2-(4-鄰-甲苯基-哌嗪-1- ??基)-乙基]-脲 ??1.00 ??390.12 ??100 ??1-{2-[4-(3-氯-苯基)-哌嗪-1-基]-乙基}-3 ??-喹啉-4-基-脲 ??1.03 ??410.1 ??101 ??1-[2-(4-二苯甲基-哌嗪-1-基)-乙基]-3-喹 ??啉-4-基-脲 ??1.12 ??466.19
實施例102：體外生物學(xué)表征
使用下述測試步驟展示通式1的化合物對尿壓素II的作用的抑制活性。
1)結(jié)合到橫紋肌肉瘤細(xì)胞株上的人類[125I]-尿壓素II的抑制
使用人類衍生的TE-671橫紋肌肉瘤細(xì)胞(Deutsche?Sammlung?von Mikroorganismen?und?Zellkulturen，細(xì)胞株#_ACC-263)，通過改良自整體細(xì) 胞內(nèi)皮素結(jié)合試驗(Breu?V等，“In?vitro?characterization?of?Ro-46-2005，a?novel synthetic?non-peptide?antagonist?of?ETA?and?ETB?receptors”，F(xiàn)EBS?Lett.，1993， 334，210～214)的方法實施人類[125I]-尿壓素II的整體細(xì)胞結(jié)合。
該試驗是在250μL?Dulbecco’s改性的Eagle介質(zhì)，pH值7.4(GIBCO BRL，CatNo?31885-023)中在聚丙烯微量滴定板(Nunc，CatNo?442587)中 進(jìn)行的，其中所述的介質(zhì)包括：25mM?HEPES(Fluka，CatNo?05473)、 1.0％DMSO(Fluka，CatNo?41644)和0.5％(w/v)BSA餾分V(Fluka，CatNo 05473)。通過在20℃下使用20pM的人類[125I]尿壓素II緩慢振蕩4小時孵化 300’000懸浮細(xì)胞(Anawa?Trading?SA，Wangen，Switzerland，2130Ci/mmol) 并提高未標(biāo)記拮抗劑的濃度。最小或最大結(jié)合分別來源于使用或未使用100 nM未標(biāo)記的U-II的樣品。4小時后，在GF/C過濾板上過濾細(xì)胞(Packard， CatNo?6005174)。干燥濾板，然后向每個管(well)中加入50μL的閃爍雞尾 酒(Packard，MicroScint?20，CatNo?6013621)。在一個微板計數(shù)器(Packard Bioscience，TopCount?NXT)中計算過濾板。
全部測試化合物均溶解或稀釋于100％的DMSO中。在將緩沖液加入到測 試中之前先將其稀釋十倍。在測試中的DMSO的最后濃度是1.0％，這一濃度 被發(fā)現(xiàn)不會對結(jié)合產(chǎn)生干擾。IC50值被定義為抑制50％的[125I]人類U-II的特 異性結(jié)合的拮抗劑的濃度。如上所述，特異性結(jié)合是指在最小和最大結(jié)合之間 的差異。測得未標(biāo)記的人類U-II的IC50值為0.206nM。在該試驗中，測得本 發(fā)明的化合物的IC50值為10～1000nM。
2)在離體老鼠胸主動脈上的人類尿壓素II-誘導(dǎo)的收縮的抑制
對成年Wistar大鼠進(jìn)行麻醉并抽血。切除近身體中央的胸廓的主動脈降部， 解剖并切取一個3～5mm的環(huán)通過輕輕摩擦內(nèi)膜表面除去內(nèi)皮。將該環(huán)懸浮于 10mL充滿Krebs-Henseleit溶液的離體器官浴槽中(單位：mM；NaCl?115，KCl4.7，MgSO41.2，KH2PO41.5，NaHCO325，CaCl22.5，葡萄糖10)在37℃下保 存并使用95％的O2和5％的CO2吹風(fēng)。向該Krebs-Henseleit溶液加入抗炎吲哚 酸(10-5M)以避免類二十烷酸的產(chǎn)生。將該環(huán)拉伸至1g的靜止張力。使用測 力傳感器(法國巴黎EMKA?Technologies?SA公司生產(chǎn))測量等長收縮力的變化。 在一段平衡期之后，將該環(huán)與KCl(60mM)輕輕接觸。在使用測試化合物或其 載體孵化10分鐘后，加入累積劑量的人類尿壓素II(10-12M～10-6M)。衡量功 能性拮抗作用作為對尿壓素II的最大收縮的抑制。