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高效生物活性飼料添加劑產(chǎn)品及其生產(chǎn)方法和應(yīng)用

閱讀：1014發(fā)布：2020-10-15

專利匯可以提供高效生物活性飼料添加劑產(chǎn)品及其生產(chǎn)方法和應(yīng)用專利檢索，專利查詢，專利分析的服務(wù)。并且本 發(fā)明 公開了高效 生物 活性 飼料 添加劑產(chǎn)品及其生產(chǎn)方法和應(yīng)用，本發(fā)明屬于飼料添加劑領(lǐng)域，特別涉及含有多種活菌制劑的高效生物飼料添加劑產(chǎn)品及其生產(chǎn)方法和應(yīng)用。本發(fā)明解決的技術(shù)問題是提供一種高效活性飼料添加劑產(chǎn)品，本發(fā)明解決的另一技術(shù)問題是提供高效生物活性飼料添加劑產(chǎn)品的生產(chǎn)方法及其應(yīng)用。本發(fā)明產(chǎn)品組成包括活性枯草桿菌、活性 酵母 菌、活性 植物 乳桿菌菌、β-葡聚糖酶、木聚糖酶、 纖維 素酶和 淀粉 酶；本發(fā)明的生產(chǎn)方法包括 微生物 菌劑的培養(yǎng)制備和菌劑復(fù)配。本發(fā)明產(chǎn)品可以改善 反芻動(dòng)物 腸道的微生態(tài)平衡，提高飼料利用率，提高奶 牛 產(chǎn)奶量，提高牛奶的品質(zhì)，提高 奶牛 肌體免疫 力 ，減少腸道 疾病 ， 凈化 飼養(yǎng)環(huán)境。，下面是高效生物活性飼料添加劑產(chǎn)品及其生產(chǎn)方法和應(yīng)用專利的具體信息內(nèi)容。

1.一種生物活性飼料添加劑產(chǎn)品，其特征在于每克產(chǎn)品中枯草芽孢桿菌為1.0～
8 8 8
9.0×10 個(gè)、酵母菌1.0～8.5×10 個(gè)、植物乳桿菌1.3～8.5×10 個(gè)，β-葡聚糖酶200～
250IU、木聚糖酶50～150IU、纖維素酶100～120IU、淀粉酶250～300IU；其生產(chǎn)方法包括微生物菌劑的制備和菌劑復(fù)配；所述微生物菌劑復(fù)配的比例為：酵母菌菌劑15-25份，植物乳桿菌菌劑25-40份，枯草芽孢桿菌菌劑10-25份，泡盛曲霉培養(yǎng)物25-60份；所述微生物菌劑中枯草芽孢桿菌為CGMCC1.210，酵母菌為CGMCC2.610，植物乳桿菌為CGMCC1.557，泡盛曲霉為CGMCC3.350。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物活性飼料添加劑產(chǎn)品，其特征在于每克產(chǎn)品含有枯草芽
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孢桿菌3.3×10 個(gè)、酵母菌8.3×10 個(gè)、植物乳桿菌1.3×10 個(gè)、β一葡聚糖酶200IU、木聚糖酶50IU、纖維素酶100IU、淀粉酶300IU。
3.一種如權(quán)利要求1所述的生物活性飼料添加劑產(chǎn)品的生產(chǎn)方法，包括下述步驟：
(1)微生物菌劑的制備：
a枯草芽孢桿菌菌劑制備：從斜面轉(zhuǎn)接培養(yǎng)枯草芽孢桿菌，逐級(jí)擴(kuò)培到發(fā)酵罐，發(fā)酵完畢離心分離添加保護(hù)劑冷凍干燥獲得枯草芽孢桿菌菌劑；
b酵母菌菌劑制備：斜面菌種經(jīng)多級(jí)擴(kuò)培獲得酵母發(fā)酵液，濃縮，混合載體，流化床干燥制備酵母菌菌劑；
c植物乳桿菌菌劑制備：斜面逐級(jí)培養(yǎng)植物乳桿菌獲得發(fā)酵液，離心分離獲得濕菌體，加入組成為10％脫脂奶、5％海藻糖、5％甘油的保護(hù)劑，冷凍干燥獲得植物乳桿菌菌劑；d泡盛曲霉培養(yǎng)物制備：菌種培養(yǎng)，固體發(fā)酵培養(yǎng)，低溫干燥，粉碎干燥物；
(2)菌劑復(fù)配：將上述各種菌劑復(fù)配，比例為酵母菌菌劑15-25份，植物乳桿菌菌劑
25-40份，枯草芽孢桿菌菌劑10-25份，泡盛曲霉培養(yǎng)物25-60份。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的生物活性飼料添加劑產(chǎn)品的生產(chǎn)方法，其特征在于菌劑復(fù)配比例為酵母菌菌劑15-20份，植物乳桿菌菌劑30-40份，枯草芽孢桿菌菌劑15-25份，泡盛曲霉培養(yǎng)物45-60份。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的生物活性飼料添加劑產(chǎn)品的生產(chǎn)方法，其特征在于菌劑復(fù)配比例為酵母菌菌劑25份，植物乳桿菌菌劑40份，枯草芽孢桿菌菌劑15份，泡盛曲霉培養(yǎng)物
40份。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的生物活性飼料添加劑產(chǎn)品的生產(chǎn)方法，其特征在于菌劑復(fù)配比例為酵母菌菌劑23份，植物乳桿菌菌劑35份，枯草芽孢桿菌菌劑20份，泡盛曲霉培養(yǎng)物
50份。

說明書全文

高效生物活性飼料添加劑產(chǎn)品及其生產(chǎn)方法和應(yīng)用

技術(shù)領(lǐng)域：

[0001] 本發(fā)明屬于飼料添加劑領(lǐng)域，特別涉及含有多種活菌制劑的高效生物飼料添加劑產(chǎn)品及其生產(chǎn)方法和應(yīng)用。背景技術(shù)：
[0002] 目前我國(guó)奶牛存欄數(shù)約1000多萬頭，奶產(chǎn)量900多萬噸，奶牛養(yǎng)殖業(yè)的迅速發(fā)展也促進(jìn)和推動(dòng)了我國(guó)飼料及添加劑行業(yè)的發(fā)展；但我國(guó)奶牛飼料仍停留在三大料(即玉米、麩皮、餅粕)的簡(jiǎn)單混合上，造成配方中蛋白質(zhì)飼料單一、氨基酸搭配不當(dāng)，奶的產(chǎn)量和質(zhì)量與歐美國(guó)家相比都有很大差距。研究開發(fā)高效生物活性飼料添加劑，對(duì)于提高我國(guó)奶牛生產(chǎn)的水平，改善牛奶的質(zhì)量，減少奶牛胃腸疾病和乳房炎的發(fā)病率，降低糞尿的不良?xì)馕逗图S尿氮的排除量，減少環(huán)境污染和充分提高飼料資源的有效利用(即提高廉價(jià)粗飼料的利用率，提高飼料中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率等)具有重要的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。目前市場(chǎng)上流行的活菌制劑基本上都是單一菌，而且主要應(yīng)用在單胃動(dòng)物飼料中，用于反芻動(dòng)物(如奶牛)的產(chǎn)品目前只有美國(guó)和法國(guó)的2-3家的單一菌種制劑在我國(guó)宣傳和做養(yǎng)殖推廣實(shí)驗(yàn)，而國(guó)內(nèi)還沒有生產(chǎn)類似產(chǎn)品的企業(yè)。酵母、枯草芽孢桿菌、植物乳桿菌都是可以應(yīng)用于飼料添加劑行業(yè)的益生菌，益生菌代謝產(chǎn)生的各種酶制劑及其有益代謝成分在促進(jìn)消化、穩(wěn)定腸道菌群環(huán)境、提高飼料利用率方面具有較好的效果；泡盛曲霉可以代謝產(chǎn)生包括葡聚糖酶在內(nèi)的多種酶制劑，其培養(yǎng)物作為飼料添加劑可以有效提高飼料的消化吸收效果。研制開發(fā)具有科學(xué)配比，且效果明顯的的含有多種有益微生物且酶活力強(qiáng)的復(fù)合飼料添加劑對(duì)于促進(jìn)養(yǎng)殖業(yè)，特別是奶牛養(yǎng)殖業(yè)具有非常重要的意義。發(fā)明內(nèi)容：
[0003] 本發(fā)明解決的技術(shù)問題是提供一種高效生物活性飼料添加劑產(chǎn)品，本發(fā)明解決的另一技術(shù)問題是提供高效生物活性飼料添加劑產(chǎn)品生產(chǎn)方法及其應(yīng)用。
[0004] 高活生物性飼料添加劑產(chǎn)品組成為：每克產(chǎn)品中枯草芽孢桿菌1.0～9.0×1088 8
個(gè)、酵母菌1.0～8.5×10 個(gè)、植物乳桿菌1.3～8.5×10 個(gè)、β-葡聚糖酶200～250IU、木聚糖酶50～150IU、纖維素酶100～120IU、淀粉酶250～300IU。
[0005] 本發(fā)明產(chǎn)品的具體生產(chǎn)方法步驟如下：
[0006] 1.微生物菌劑的培養(yǎng)制備：分別擴(kuò)培并干燥得到酵母菌劑、植物乳桿菌劑和枯草芽孢桿菌菌劑，(1)枯草芽孢桿菌菌劑制備：從斜面轉(zhuǎn)接培養(yǎng)枯草芽孢桿菌，逐級(jí)擴(kuò)培后的3
種子液轉(zhuǎn)接入發(fā)酵罐中，控制溫度為28-30℃，通風(fēng)培養(yǎng)19-24小時(shí)，通氣量為2.0m/分鐘；
發(fā)酵完畢離心分離獲得濕菌體，添加保護(hù)劑冷凍干燥獲得菌劑，保護(hù)劑組成為10％脫脂奶、
5％乳糖、5％甘油。
[0007] (2)酵母菌菌劑制備：斜面菌種經(jīng)常規(guī)多級(jí)擴(kuò)培工藝獲得酵母種子液，轉(zhuǎn)接入發(fā)3
酵罐中，控制溫度為28℃，前期通風(fēng)培養(yǎng)14小時(shí)，通氣量控制為2.0m/分鐘，后期厭氧培養(yǎng)
15小時(shí)；發(fā)酵液低溫濃縮，與載體混合后，經(jīng)流化床干燥制備，載體組成為CaCO3 40份，糊精20份，玉米蛋白粉20份。
[0008] (3)植物乳桿菌劑制備：斜面培養(yǎng)植物乳桿菌種子液轉(zhuǎn)接入發(fā)酵罐中，控制溫度3
為28-32℃，厭氧培養(yǎng)22小時(shí)，通氣量為2.0m/分鐘；發(fā)酵完畢離心分離獲得濕菌體，加入組成為10％脫脂奶、5％海藻糖、5％甘油的保護(hù)劑，通過冷凍干燥獲得菌劑，水分含量低于
10％。
[0009] (3)泡盛曲霉培養(yǎng)物制備：菌種培養(yǎng)，固體發(fā)酵培養(yǎng)：孢子液接種到米曲霉固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)料中，26-35℃培養(yǎng)至菌絲長(zhǎng)滿培養(yǎng)料，低溫流化床干燥，粉碎干燥物；
[0010] 2、菌劑復(fù)配：將上述各種菌劑和泡盛曲霉發(fā)酵培養(yǎng)劑按照比例進(jìn)行復(fù)配，菌劑復(fù)配比例如下：酵母菌劑15-25份，植物乳桿菌劑25-40份，枯草芽孢桿菌菌劑10-25份，泡盛曲霉培養(yǎng)物25-60份。
[0011] 本發(fā)明采用的菌種如下：
[0012] 枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis subsp)CGMCC1.210
[0013] 釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CGMCC2.610
[0014] 植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)CGMCC1.557
[0015] 泡盛曲霉(Aspergillus awamori)CGMCC3.350
[0016] 上述四種菌種的保藏單位是中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心：地址：北京市中關(guān)村北一條13號(hào)中科院微生物研究所；郵編：100080。
[0017] 本發(fā)明中酶活力單位IU定義為1分鐘內(nèi)催化1微摩爾底物轉(zhuǎn)化的酶量。
[0018] 本發(fā)明中采用微生物平板計(jì)數(shù)方法檢測(cè)活菌數(shù)。
[0019] 本發(fā)明中采用常規(guī)酶活力檢測(cè)方法檢測(cè)酶活。
[0020] 本發(fā)明中菌劑復(fù)配的較優(yōu)比例為：酵母菌劑15-20份，植物乳桿菌劑30-40份，枯草芽孢桿菌菌劑15-25份，泡盛曲霉培養(yǎng)物45-60份。
[0021] 發(fā)明產(chǎn)品采用科學(xué)研究的菌劑復(fù)配比例技術(shù)有效確保產(chǎn)品中各種微生物菌劑的合理組成和比例，同時(shí)也保證了產(chǎn)品中酶制劑的組成和有效含量，使得產(chǎn)品中各種酶在奶牛飼喂中可以有效促進(jìn)飼料的消化吸收；復(fù)配技術(shù)使得產(chǎn)品在奶牛飼料的消化吸收率大幅提高，單位用量飼料的產(chǎn)出比例比對(duì)照有了顯著提高，奶牛的產(chǎn)量和質(zhì)量得以提高和保障。
[0022] 發(fā)明產(chǎn)品的性能穩(wěn)定，使用安全，與其它飼料添加劑均無配合禁忌。本發(fā)明產(chǎn)品在質(zhì)量穩(wěn)定可控，無環(huán)境污染，而且可以提高免疫力能夠提高養(yǎng)殖效益。產(chǎn)品完全符合綠色飼料添加劑的要求。有明顯提高日增重和飼料轉(zhuǎn)化率效果。
[0023] 本發(fā)明產(chǎn)品中植物乳桿菌和酵母菌對(duì)動(dòng)物胃腸道的消化有輔助作用，酵母菌在瘤胃中為瘤胃微生物的生長(zhǎng)繁殖提供了有益的氨基酸、B族維生素和其它微量元素，增加瘤胃微生物蛋白質(zhì)的合成量。植物乳桿菌在奶牛的小腸釋放，可以消耗動(dòng)物腸道內(nèi)的氧氣，使腸道內(nèi)有害的致病菌如好氧菌(主要是大腸桿菌、沙門氏菌等)受到抑制，還能抑制氨和胺的合成，益增強(qiáng)免疫力，達(dá)到改善奶牛胃腸道微生物生態(tài)平衡，有利于健康和提高生產(chǎn)性能的目的；枯草芽孢桿菌在腸道代謝產(chǎn)生的酶類和泡盛曲霉發(fā)酵培養(yǎng)物中含有的有效劑量的葡聚糖酶、木聚糖酶、纖維素酶和淀粉酶十分有利于奶牛等反芻動(dòng)物飼料中纖維類飼料的消化吸收，改善反芻動(dòng)物腸道的微生態(tài)平衡，提高飼料利用率，提高奶牛產(chǎn)奶量，提高牛奶的品質(zhì)，提高奶牛肌體免疫力，減少腸道疾病，凈化飼養(yǎng)環(huán)境。該飼料添加劑可應(yīng)用于奶牛養(yǎng)殖業(yè)，可以顯著提高牛奶產(chǎn)量和質(zhì)量。
[0024] 本發(fā)明產(chǎn)品能夠提高奶牛肌體免疫力，減少隱性乳房炎、腸道疾病的發(fā)病率。目前，我國(guó)奶牛群中隱性乳房炎發(fā)病率是比較高的，奶牛一旦患有乳房炎就必須注射抗生素治療，注射了抗生素的奶牛7天之內(nèi)所產(chǎn)出的牛奶都不能出售(牛奶中會(huì)殘留抗生素對(duì)人體有危害)。使用本發(fā)明產(chǎn)品可以降低奶牛隱性乳房炎發(fā)病率，飼喂試驗(yàn)表明本發(fā)明產(chǎn)品降低乳房炎發(fā)病率70％(與對(duì)照組比較)，明顯減少奶牛乳房炎的發(fā)生，減少抗生素的使用和含抗生素奶的產(chǎn)出，間接提高了養(yǎng)殖者的效益。
[0025] 本發(fā)明產(chǎn)品對(duì)提高我國(guó)奶牛生產(chǎn)的水平，充分提高飼料資源的有效利用(即提高廉價(jià)相飼料的利用率，提高飼料中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率等)等方面都具有很高的價(jià)值。
[0026] 本發(fā)明也適合其他反芻動(dòng)物如肉牛、羊的飼喂。具體實(shí)施方式：
[0027] 下面的實(shí)施例可以使本專業(yè)技術(shù)人員更全面地理解本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。
[0028] 實(shí)施例1：高效活性飼料添加劑產(chǎn)品
[0029] 產(chǎn)品組成如下：每克產(chǎn)品中含有的有效活性成份為：活性枯草芽孢桿菌3.3×1088 8
個(gè)、活性酵母菌8.3×10 個(gè)、植物乳桿菌1.3×10 個(gè)、β-葡聚糖酶200IU、木聚糖酶50IU、纖維素酶100IU、淀粉酶300IU。
[0030] 實(shí)施例2：例1所述高效活性飼料添加劑產(chǎn)品生產(chǎn)方法
[0031] 產(chǎn)品生產(chǎn)方法主要包括微生物菌劑的生產(chǎn)和復(fù)配工藝。
[0032] 微生物菌劑的生產(chǎn)：
[0033] 酵母菌的制備方法：從斜面轉(zhuǎn)接酵母菌到液體搖瓶，液體搖瓶經(jīng)三級(jí)擴(kuò)培后轉(zhuǎn)接入發(fā)酵罐進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，培養(yǎng)完畢低溫濃縮、與載體混合，流化床干燥工藝獲得活性酵母菌劑。
[0034] 酵母細(xì)胞的培養(yǎng)：采用斜面菌種逐級(jí)擴(kuò)培獲得酵母細(xì)胞；
[0035] (1)一級(jí)種子培養(yǎng)：將酵母斜面菌種接入500毫升搖瓶中，培養(yǎng)基裝量100毫升，旋轉(zhuǎn)式搖床120轉(zhuǎn)/分，培養(yǎng)溫度30℃，培養(yǎng)時(shí)間18小時(shí)；
[0036] (2)二級(jí)種子培養(yǎng)：將一級(jí)種子按照10％的接種量接入500毫升二級(jí)種子搖瓶中，培養(yǎng)條件與一級(jí)種子相同；
[0037] (3)三級(jí)種子培養(yǎng)：將二級(jí)種子以10％接種量接入5000毫升三級(jí)種子搖瓶中，培養(yǎng)基裝量1000毫升，旋轉(zhuǎn)式搖床100轉(zhuǎn)/分，培養(yǎng)溫度30℃，培養(yǎng)時(shí)間18小時(shí)；
[0038] (4)一級(jí)種子罐培養(yǎng)：將三級(jí)種子以5％接種量接入總?cè)莘e為150L的一級(jí)種子罐，發(fā)酵培養(yǎng)基裝量100L，培養(yǎng)溫度30℃，攪拌速度100轉(zhuǎn)/分，通風(fēng)量(V/V)1∶0.5，罐壓0.05Mpa，培養(yǎng)時(shí)間16小時(shí)；
[0039] (5)發(fā)酵罐培養(yǎng)：將一級(jí)種子罐菌種以5％接種量接入總?cè)莘e為3噸二級(jí)種子罐，發(fā)酵培養(yǎng)基裝量2噸，培養(yǎng)條件培養(yǎng)溫度30℃，攪拌速度100轉(zhuǎn)/分，前期通風(fēng)量(V/V)1∶0.5，罐壓0.05Mpa，前期培養(yǎng)時(shí)間12小時(shí)；后期罐壓0.05Mpa，攪拌速度50轉(zhuǎn)/分，9
培養(yǎng)時(shí)間8小時(shí)，培養(yǎng)末期的酵母濃度達(dá)到3.0×10 個(gè)/ml。
[0040] (6)濃縮：發(fā)酵液經(jīng)低溫負(fù)壓真空濃縮到原體積的45％，得到酵母菌濃縮液。
[0041] (7)添加載體：向酵母菌濃縮液中添加混合好的載體，混合均勻；濃縮液與載體的重量比為0.5-0.7∶1，載體組成為：CaCO3 40份，糊精20份，玉米蛋白粉20份。
[0042] (8)干燥：流化床干燥，干燥溫度50℃。
[0043] 培養(yǎng)基采用10％麥芽汁培養(yǎng)基或采用添加硫酸銨等無機(jī)鹽的糖蜜培養(yǎng)基，具體培養(yǎng)生產(chǎn)工藝參見肖冬光《釀酒活性干酵母的生產(chǎn)與應(yīng)用技術(shù)》。
[0044] 泡盛曲霉菌劑的制備方法：
[0045] 技術(shù)方案如下：
[0046] 斜面菌種活化培養(yǎng)：將泡盛曲霉斜面菌種轉(zhuǎn)接到斜面培養(yǎng)基上，27℃培養(yǎng)3天。
[0047] 固體一級(jí)種子培養(yǎng)：挑取泡盛曲霉斜面菌種接入裝有100克培養(yǎng)基的500毫升三角瓶中進(jìn)行種子培養(yǎng)，30℃培養(yǎng)3天即可。
[0048] 固體二級(jí)種子培養(yǎng)：將上述培養(yǎng)好的固體一級(jí)種子攪拌為碎塊后加入裝有1000克培養(yǎng)基的5000毫升三角瓶中進(jìn)行種子培養(yǎng)，培養(yǎng)條件：30℃培養(yǎng)3天即可。
[0049] 固體發(fā)酵培養(yǎng)：將二級(jí)搖瓶種子粉碎，加入裝有滅菌培養(yǎng)基的發(fā)酵池或托盤中混合均勻后培養(yǎng)，曲料培養(yǎng)溫度控制在26-35℃，濕度80-90％，每隔10小時(shí)翻料一次，培養(yǎng)時(shí)間6天；固體曲料的培養(yǎng)采用常用曲料培養(yǎng)技術(shù)；待培養(yǎng)料長(zhǎng)滿菌絲即可結(jié)束培養(yǎng)，培養(yǎng)基預(yù)先經(jīng)高溫蒸煮滅菌處理，滅菌條件控制溫度121℃，時(shí)間1小時(shí)。
[0050] 干燥粉碎：發(fā)酵結(jié)束培養(yǎng)料在流化床或其他干燥設(shè)備上進(jìn)行干燥，干燥溫度控制在60℃，干燥到水分含量在10％以下，然后將固體培養(yǎng)料進(jìn)行粉碎，物料粉碎孔徑在60目以上。
[0051] 培養(yǎng)基組成：固體原料：麩皮80％，豆餅粉10％，玉米淀粉10％，添加等量自來水；初始pH自然。
[0052] 枯草芽孢桿菌菌劑的制備：
[0053] 1.發(fā)酵液的獲得：采用斜面菌種逐級(jí)擴(kuò)培獲得枯草芽孢桿菌發(fā)酵液；
[0054] (1)一級(jí)種子培養(yǎng)：將枯草芽孢桿菌斜面菌種接入500毫升搖瓶中，培養(yǎng)基裝量100毫升，旋轉(zhuǎn)式搖床180轉(zhuǎn)/分，培養(yǎng)溫度30℃，培養(yǎng)時(shí)間24小時(shí)；
[0055] (2)二級(jí)種子培養(yǎng)：將一級(jí)種子按照10％的接種量接入500毫升二級(jí)種子搖瓶中，培養(yǎng)條件與一級(jí)種子相同；
[0056] (3)三級(jí)種子培養(yǎng)：將二級(jí)種子以10％接種量接入5000毫升三級(jí)種子搖瓶中，培養(yǎng)基裝量1000毫升，旋轉(zhuǎn)式搖床100轉(zhuǎn)/分，培養(yǎng)溫度30℃，培養(yǎng)時(shí)間24小時(shí)；
[0057] (4)一級(jí)種子罐培養(yǎng)：將三級(jí)種子以10％接種量接入總?cè)莘e為150L的一級(jí)種子罐，發(fā)酵培養(yǎng)基裝量100L，培養(yǎng)溫度28℃，攪拌速度100轉(zhuǎn)/分，通風(fēng)量(V/V)1∶0.5，罐壓0.05Mpa，培養(yǎng)時(shí)間24小時(shí)；
[0058] (5)發(fā)酵培養(yǎng)：將一級(jí)種子罐菌種以10％接種量接入總?cè)莘e為1.5噸二級(jí)種子罐，發(fā)酵培養(yǎng)基裝量1噸，培養(yǎng)條件培養(yǎng)溫度28℃，攪拌速度100轉(zhuǎn)/分，通風(fēng)量(V/V)1∶0.5，8
罐壓0.05Mpa，培養(yǎng)時(shí)間24小時(shí)，培養(yǎng)結(jié)束菌濃度在5.0×10 個(gè)/ml.
[0059] (6)離心分離：采用離心機(jī)分離獲得菌體。
[0060] (7)真空冷凍干燥：添加保護(hù)劑后采用噴霧干燥工藝處理獲得干粉菌劑；保護(hù)劑組成為脫脂奶10％、乳糖5％、甘油5％。真空冷凍干燥工藝參見中國(guó)科學(xué)院微生物研究所編著菌種保減手冊(cè)，1980年出版.第610-653.
[0061] 培養(yǎng)基組成：葡萄糖6％，酵母提取物1％，蛋白胨0.2％，CaCO3 1％，pH6.8。
[0062] 植物乳桿菌劑的制備方法：
[0063] (1)一級(jí)種子培養(yǎng)：將植物乳桿菌菌種接入500毫升搖瓶中，培養(yǎng)基裝量100毫升，培養(yǎng)溫度30℃，培養(yǎng)時(shí)間24小時(shí)；
[0064] (2)二級(jí)種子培養(yǎng)：將一級(jí)種子按照10％的接種量接入500毫升二級(jí)種子搖瓶中，培養(yǎng)條件與一級(jí)種子相同；
[0065] (3)三級(jí)種子培養(yǎng)：將二級(jí)種子以10％接種量接入5000毫升三級(jí)種子搖瓶中，培養(yǎng)基裝量1000毫升，培養(yǎng)溫度30℃，培養(yǎng)時(shí)間24小時(shí)；
[0066] (4)一級(jí)種子罐培養(yǎng)：將三級(jí)種子以5％接種量接入總?cè)莘e為150L的一級(jí)種子罐，發(fā)酵培養(yǎng)基裝量100L，培養(yǎng)溫度30℃，罐壓0.05Mpa，培養(yǎng)時(shí)間18小時(shí)；
[0067] (5)發(fā)酵罐培養(yǎng)：將一級(jí)種子罐菌種以5％接種量接入總?cè)莘e為3噸二級(jí)種子罐，發(fā)酵培養(yǎng)基裝量2噸，培養(yǎng)條件培養(yǎng)溫度30℃，罐壓0.05Mpa，培養(yǎng)時(shí)間24小時(shí)，培養(yǎng)結(jié)束8
菌濃度在4.0×10 個(gè)/ml。
[0068] (6)離心分離：采用離心機(jī)分離獲得菌體。
[0069] (7)真空冷凍干燥：添加保護(hù)劑采用真空冷凍進(jìn)行干燥處理工藝，保護(hù)劑組成為脫脂奶10％、海藻糖5％、甘油5％的水溶液。真空冷凍干燥工藝參見中國(guó)科學(xué)院微生物研究所編著菌種保藏手冊(cè)，1980.610-653.
[0070] 培養(yǎng)基組成為：酪蛋白胨1％，牛肉提取物1％，酵母提取物0.5％，葡萄糖0.5％，乙酸鈉0.5％，檸檬酸二胺0.2％，Tween 80 0.1％，K2HPO4 0.2％，MgSO4.7H2O 0.02％，MnSO4.H2O 0.005％，CaCO3 2％，瓊脂1.5％，pH6.8。
[0071] 菌劑復(fù)配：將上述各種菌劑按照如下比例進(jìn)行復(fù)配，酵母菌劑25份，植物乳桿菌劑40份，枯草芽孢桿菌菌劑15份，泡盛曲霉培養(yǎng)物40份，復(fù)配菌劑包裝。
[0072] 采用的菌種如下：
[0073] 枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis subsp)CGMCC1.210
[0074] 釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CGMCC2.610
[0075] 植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)CGMCC1.557
[0076] 泡盛曲霉(Aspergillus awamori)CGMCC3.350
[0077] 例3高效活性飼料添加劑產(chǎn)品
[0078] 產(chǎn)品組成如下：每克產(chǎn)品中含有的有效活性成份為：活性枯草芽孢桿菌7×1088 8
個(gè)、活性酵母菌1×10 個(gè)、活性植物乳桿菌6×10 個(gè)、β-葡聚糖酶200IU、木聚糖酶100IU、纖維素酶120IU和淀粉酶250IU。
[0079] 例4：例3所述高效活性飼料添加劑產(chǎn)品生產(chǎn)方法
[0080] 基本生產(chǎn)方法同例2所述，其中菌劑復(fù)配比例為：將上述各種菌劑按照如下比例進(jìn)行復(fù)配，酵母菌劑23份，植物乳桿菌劑35份，枯草芽孢桿菌菌劑20份，泡盛曲霉培養(yǎng)物50份，復(fù)配菌劑包裝。
[0081] 例5：高效活性飼料添加劑產(chǎn)品生產(chǎn)方法
[0082] 基本生產(chǎn)方法同例2所述，其中菌劑復(fù)配比例為：將上述各種菌劑按照如下比例進(jìn)行復(fù)配，酵母菌劑20份，植物乳桿菌劑30份，枯草芽孢桿菌菌劑25份，泡盛曲霉培養(yǎng)物60份，復(fù)配菌劑包裝。
[0083] 例6產(chǎn)品效果實(shí)驗(yàn)：
[0084] 試驗(yàn)牛的選擇與試驗(yàn)設(shè)計(jì)：試驗(yàn)于2006年4月7日-8月19日在北京市海淀區(qū)唐家?guī)X國(guó)強(qiáng)牛場(chǎng)進(jìn)行，本試驗(yàn)采取隨機(jī)配對(duì)原則，將40頭牛隨機(jī)的分為試驗(yàn)組和對(duì)照組，每組20頭牛，并采用反轉(zhuǎn)交叉試驗(yàn)設(shè)計(jì)的方法消除分組造成的誤差，即試驗(yàn)分為兩期，第一期試驗(yàn)組添加高效生物活性飼料添加劑對(duì)照組不添加，完成60天實(shí)驗(yàn)期后，將對(duì)照組變?yōu)樵囼?yàn)組，試驗(yàn)組變?yōu)閷?duì)照組，為消除第一期分組試驗(yàn)的影響，第二期開始前預(yù)飼期設(shè)計(jì)為10天。完成10天預(yù)飼期后進(jìn)入第二期試驗(yàn)，試驗(yàn)期為60天。每頭每日飼喂量50g。
[0085] 試驗(yàn)方法：試驗(yàn)期每十天測(cè)定一次個(gè)體牛奶產(chǎn)量，并于早中晚取樣送北京市奶牛中心利用Seris300combiFOSS乳成分分析議測(cè)定牛奶中的乳脂率和乳蛋白率等指標(biāo)。
[0086] 1：添加高效生物活性飼料添加劑對(duì)奶牛產(chǎn)量的影響
[0087] 試驗(yàn)結(jié)果見表1
[0088] 表1.試驗(yàn)組和對(duì)照組奶牛產(chǎn)量的變化 *表示P＜0.05，同下。
[0089]試驗(yàn) 第一 比本期 試驗(yàn) 第二 第二期 比本期 試驗(yàn) 全期試
前 期結(jié) 試驗(yàn)前 比對(duì) 期試 試驗(yàn)結(jié) 試驗(yàn)前 比對(duì) 驗(yàn)組比
束時(shí) ± 照± 驗(yàn)前 束 ± 照± 對(duì)照組±
試驗(yàn)組 24.1 24.58 1.75 2.38* 24.7 21.1 -2.6 2.0* 2.19*
對(duì)照組 22.6 21.97 -0.63 21.8 17.2 -4.6
[0090] 由于試驗(yàn)開始時(shí)，試驗(yàn)組和對(duì)照組的奶牛都已過了高峰期，根據(jù)奶牛的泌乳規(guī)律，應(yīng)呈下降趨勢(shì)，從第一期(60天)的試驗(yàn)結(jié)果可以看出，由于添加了高效生物活性飼料添加劑與試驗(yàn)開始時(shí)相比，試驗(yàn)組奶牛的產(chǎn)奶量不降反升，增加1.75千克，而對(duì)照組卻下降了0.63千克。因此，第一期試驗(yàn)試驗(yàn)組比對(duì)照組增加奶產(chǎn)量2.38千克(P＜0.05)。經(jīng)過反轉(zhuǎn)交叉后的10天預(yù)飼期，進(jìn)入第二期試驗(yàn)(60天)，從試驗(yàn)結(jié)果可以看出，無論是試驗(yàn)組還是對(duì)照組的奶牛都已進(jìn)入泌乳后期，產(chǎn)奶量都呈下降趨勢(shì)，添加高效生物活性飼料添加劑的試驗(yàn)組奶產(chǎn)量下降2.6千克，對(duì)照組下降的幅度較大，達(dá)4.6千克，因此，第二期試驗(yàn)組與對(duì)照組相比，增加2.00千克(P＜0.05)。全期試驗(yàn)組牛奶產(chǎn)量比對(duì)照組提高2.19千克，效果明顯。
[0091] 2.高效生物活性飼料添加劑對(duì)主要奶牛成分的影響
[0092] 結(jié)果見表2。
[0093] 從表2中全期4個(gè)月的試驗(yàn)數(shù)據(jù)可以看出，添加高效生物活性飼料添加劑后，第一期試驗(yàn)中可以顯著提高乳脂率，增加0.20個(gè)百分點(diǎn)(P＜0.05)。單從全期平均來看，乳脂率有增加的趨勢(shì)，同時(shí)，乳蛋白率也略有增加的趨勢(shì)，但差異不顯著。
[0094] 3.使用直觀效果
[0095] 使用高效生物活性飼料添加劑1個(gè)月后，發(fā)現(xiàn)牛奶產(chǎn)量比較穩(wěn)定，(不喂的組下降幅度較大，因?yàn)樵囼?yàn)牛已過了泌乳高峰期)，乳脂率也增加了，效果很好。從奶牛外表來看，喂高效生物活性飼料添加劑的奶牛的毛亮，食欲好，乳房炎發(fā)病率降低。
[0096] 表2高效生物活性飼料添加劑對(duì)試驗(yàn)組和對(duì)照組乳脂率、乳蛋白率的影響[0097]
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