1 |
一種大量組織、細胞樣本mRNA的分子條形碼標記、文庫構建、測序的方法 |
CN201710472582.7 |
2017-06-20 |
CN107502607A |
2017-12-22 |
歐陽宏偉; 吳兵兵; 李余; 潘宗友; 安晟銳; 劉怡孝; 鄒曉暉 |
本發(fā)明涉及一種大量組織、細胞樣本mRNA的分子條形碼標記、文庫構建、測序的方法。能夠精準地將提取的每個樣本mRNA都標記上獨特的分子條形碼,并通過高效的逆轉錄、合成第二條鏈將每個樣本的mRNA轉換成帶有獨特分子條形碼標簽的雙鏈DNA,隨后通過優(yōu)化的文庫構建方法,可將大量標記了分子條形碼的樣本混合后,實現(xiàn)高通量樣本文庫構建及二代測序檢測。 |
2 |
適用于單細胞基因組甲基化測序的文庫建立方法及其應用 |
CN201710864047.6 |
2017-09-22 |
CN107488725A |
2017-12-19 |
王芳; 李靜; 陳昌岳; 張祥林; 胡秋萍; 任一; 路遠; 黃克非; 閆麗 |
本發(fā)明涉及分子生物學技術領域,具體公開了一種適用于單細胞基因組甲基化測序的文庫建立方法及其應用。本發(fā)明提供的適用于單細胞基因組甲基化測序的文庫建立方法包括如下步驟:(1)對樣本的基因組DNA進行重亞硫酸鹽轉化;(2)對步驟(1)中轉化后的基因組DNA進行線性擴增;(3)對步驟(2)中線性擴增的擴增子進行指數(shù)擴增,所述指數(shù)擴增的擴增子用作測序文庫。所述文庫建立方法的樣本基因組DNA起始量可低至pg級,采用所述方法建立的文庫進行測序,可對全基因組的絕大多數(shù)胞嘧啶進行檢測,可以覆蓋到全基因組的絕大多數(shù)區(qū)域。 |
3 |
有助于選擇被特定免疫球蛋白基因重組牛痘病毒感染的細胞的融合蛋白 |
CN201380033060.7 |
2013-04-26 |
CN104520444B |
2017-12-12 |
E·S·史密斯; T·潘迪納; L·A·克羅伊; M·帕里斯; M·佐德勒; A·莫克薩; R·柯克 |
本發(fā)明涉及在真核細胞中表達免疫球蛋白分子的高效方法。本發(fā)明進一步涉及生產(chǎn)用于在真核細胞中表達的免疫球蛋白重鏈和輕鏈文庫的方法,特別是使用三分子重組方法。本發(fā)明進一步提供了選擇和篩選抗原特異性免疫球蛋白分子及其抗原特異性片段的方法。本發(fā)明還提供了用于生產(chǎn)、篩選和選擇抗原特異性免疫球蛋白分子的試劑盒。最后,本發(fā)明提供了通過本文中提供的方法產(chǎn)生的免疫球蛋白分子及其抗原特異性片段。 |
4 |
離子濃度依賴性結合分子文庫 |
CN201710312293.0 |
2012-09-28 |
CN107287660A |
2017-10-24 |
井川智之; 石井慎也; 舩木美步; 廣庭奈緒香; 清水駿 |
本發(fā)明公開了主要由互相之間序列不同的多個抗原結合分子構成的文庫,所述抗原結合分子的抗原結合結構域中包含至少一個下述氨基酸殘基,所述氨基酸殘基使得抗原結合分子針對抗原的結合活性根據(jù)離子濃度的條件而變化。此外,本發(fā)明還公開了包含多個編碼所述抗原結合分子的多核苷酸分子的組合物、包含多個含有所述多核苷酸分子的載體的組合物、所述抗原結合分子的選擇方法、所述多核苷酸分子的分離方法、所述抗原結合分子的制造方法、包含所述抗原結合分子的醫(yī)藥組合物。 |
5 |
一種檢測遺傳性耳聾基因的建庫試劑盒和應用 |
CN201710552357.4 |
2017-07-07 |
CN107287314A |
2017-10-24 |
鄒婧; 李全; 侯強; 張春楊; 譚宏東 |
本發(fā)明涉及一種檢測遺傳性耳聾基因的建庫試劑盒和應用,所述試劑盒包括用于擴增遺傳性耳聾基因的擴增引物組;所述擴增引物組包括根據(jù)GJB2、GJB3、SLC26A4基因和12s?rRNA基因的突變位點的多態(tài)性設計的引物。本發(fā)明采用多重PCR技術,單次反應可檢測20個以上耳聾基因突變位點;配合采用“雙標簽”系統(tǒng),使每個樣品的DNA擴增產(chǎn)物上均帶有兩套獨立的標簽序列,因此可將所有樣品的擴增產(chǎn)物混合后同時測序,實現(xiàn)高通量檢測,從而大幅降低了單個樣品的檢測成本。 |
6 |
一種用于染色體異常檢測的文庫構建方法及試劑盒 |
CN201710650277.2 |
2017-08-01 |
CN107217310A |
2017-09-29 |
洪燕; 白金蕾; 玄兆伶; 李大為; 梁峻彬; 陳重建 |
本發(fā)明提供一種用于染色體異常檢測的文庫構建方法,通過對反應體系及反應條件的優(yōu)化,實現(xiàn)了對羊水、臍血等少量樣本的文庫構建,縮短患者在臨床染色體異常檢測的等待時間。 |
7 |
一種DNA編碼分子庫及化合物篩選方法 |
CN201610871861.6 |
2016-09-30 |
CN107130299A |
2017-09-05 |
李笑宇 |
本發(fā)明公開了一種DNA編碼分子庫及化合物篩選方法。一種DNA編碼分子庫,其引入一具有8~12個堿基的短鏈DNA,所述短鏈DNA一端具有光交聯(lián)基團。使用本發(fā)明的DNA編碼分子庫的篩選方法,使得蛋白質(zhì)靶點不需純化和固載,并且能夠直接應用于膜蛋白、蛋白質(zhì)復合體、活細胞、病理組織等其它方法無法應用的藥物靶點。 |
8 |
腫瘤放射治療毒性基因突變文庫的構建方法 |
CN201710339037.0 |
2017-05-15 |
CN107119331A |
2017-09-01 |
輦偉奇; 唐萬燕; 李麗仙; 王穎; 翁克貴; 張娜; 劉興明; 何永鵬 |
本發(fā)明公開了一種腫瘤放射治療毒性基因突變文庫的構建方法,其特征在于:覆蓋人類腫瘤放射治療毒性相關42個基因上總共61種遺傳性變異位點。本發(fā)明的構建方法針對多個靶序列進行單管,快速完成文庫的構建,整個文庫構建過程僅需要2~3小時,手動時間僅僅需要45分鐘即可,可以十分有效的解決目前對于臨床上患者接受腫瘤放射治療前預測是否會發(fā)生較大毒副作用,而需要對多基因、多靶點檢測這一難點,且成本低廉。 |
9 |
一種檢測豬細小病毒的基因芯片的制備方法及使用方法 |
CN201710287489.9 |
2017-04-27 |
CN107119330A |
2017-09-01 |
李文剛; 吳鳳筍; 劉玲玲; 呂玉金; 李明亮; 趙迪; 劉勝利; 陳志港; 郭敏 |
本發(fā)明公開了一種檢測豬細小病毒的基因芯片的制備方法及使用方法,設計并合成引物和探針,用TE buffer溶解合成好的探針,用基因芯片點樣儀在醛基基片上接觸式點樣,制備用于檢測豬細小病毒的基因芯片。使用時,提取待測的豬細小病毒基因組DNA,采用不對稱PCR制備雜交用PCR產(chǎn)物,與制備好的基因芯片雜交,經(jīng)洗滌與干燥后,將基因芯片置于激光共聚焦掃描儀上掃描,分析結果。本發(fā)明操作簡便易行,省去了已點樣芯片的水化處理和預雜交步驟,雜交只需1小時,大大節(jié)省了時間,達到了快速檢測的目的,采用5μm/L的探針濃度就可以達到較高的信號強度,降低了檢測成本,可用于大規(guī)模檢測。 |
10 |
一種提高基因低頻突變檢測靈敏度的擴增子文庫構建方法 |
CN201710382858.2 |
2017-05-26 |
CN107058310A |
2017-08-18 |
易建明; 屈武斌; 蔡萬世; 王瑞超; 杭興宜 |
本發(fā)明涉及一種用于擴增子文庫擴增和富集時使用的多重上游發(fā)卡結構引物及使用所述多重上游發(fā)卡結構引物提高基因低頻突變檢測靈敏度的擴增子文庫構建方法,所述引物從3’端至5’端包括:與目標區(qū)域序列互補配對的特異性序列A1;發(fā)卡結構的穩(wěn)定序列A2;與5’端A7序列的反向互補序列A3;發(fā)卡結構的去穩(wěn)定序列A4;條碼序列A5;接頭序列A6;5’端序列A7;A3和A7互補配對,形成所述多重上游發(fā)卡結構引物的莖結構;A4、A5和A6形成所述多重上游發(fā)卡結構引物的環(huán)部分。 |
11 |
用于診斷活動性結核的方法和試劑盒 |
CN201710032710.6 |
2017-01-18 |
CN106990252A |
2017-07-28 |
葛勝祥; 劉永亮; 陳夢媛; 張軍; 夏寧邵 |
本發(fā)明屬于分子生物學、免疫學以及疾病診斷領域。具體而言,本發(fā)明涉及,用于診斷受試者是否患有活動性結核的方法,用于判斷一種療法對活動性結核的治療效果的方法,以及用于篩選能夠治療活動性結核的候選藥物的方法。本發(fā)明還涉及含有特異性刺激原和檢測IL?6水平的試劑的試劑盒。 |
12 |
一種用于檢測副豬嗜血桿菌的基因芯片的制備及使用方法 |
CN201710288214.7 |
2017-04-27 |
CN106868597A |
2017-06-20 |
李文剛; 吳鳳筍; 劉玲玲; 呂玉金; 趙迪; 樊淑華; 劉勝利; 陳志港; 郭敏; 李明亮 |
本發(fā)明公開了一種用于檢測副豬嗜血桿菌的基因芯片的制備及使用方法,包括以下步驟:(1)設計特異性引物和探針:以副豬嗜血桿菌的infB基因序列為靶序列,設計特異性引物和探針,副豬嗜血桿菌上游引物基因序列如序列表中SEQ ID NO:1所示,副豬嗜血桿菌下游引物基因序列如序列表中SEQ ID NO:2所示,所述的探針基因序列如序列表中SEQ ID NO:3所示;(2)合成上述特異性引物和探針;(3)基因芯片的制備:用TE Buffer溶解合成探針,在醛基化基片上接觸式點樣,點樣完畢后將基因芯片干燥。本發(fā)明操作簡便易行,省去了已點樣基因芯片的水化處理和預雜交步驟,雜交只需2h,大大節(jié)省了時間,達到了快速檢測的目的,可用于大規(guī)模檢測。 |
13 |
DNA原位合成半導體芯片及其控制方法 |
CN201510844308.9 |
2015-11-26 |
CN106799196A |
2017-06-06 |
童艷錚; 徐峰 |
本發(fā)明公開了一種用于DNA原位合成的半導體芯片,包括反應區(qū)、控制單元、基板和引腳,所述反應區(qū)包括有機多聚層和由至少一個鉑電極構成的電極陣列,所述電極陣列為行列排列,所述控制單元控制行線和列線,所述行線通過開關器件連接于所述鉑電極,所述列線連接于所述開關器件并控制所述開關器件的通斷,將所述鉑電極置于高電位;還公開了一種基于上述芯片的控制方法,通過控制鉑電極的電位實現(xiàn)DNA的原位合成。本發(fā)明提供的用于DNA原位合成的半導體芯片及其控制方法可結合計算機技術實現(xiàn)DNA的精確、穩(wěn)定的原位合成,大大降低生產(chǎn)成本。 |
14 |
用于檢測血漿ctDNA中基因變異的試劑盒 |
CN201710067026.1 |
2017-02-07 |
CN106755505A |
2017-05-31 |
王曉雯; 荊瑞琳; 張萌萌; 玄兆伶; 李大為; 梁峻彬; 陳重建 |
本發(fā)明提供一種用于檢測血漿ctDNA中基因變異的試劑盒,該試劑盒包括用于基因捕獲的探針,所述用于捕獲的探針包括針對SNV區(qū)域設計的探針、針對CNV區(qū)域設計的探針、針對FUSION區(qū)域設計的探針,公共引物如SEQ ID NO:1所示核苷酸序列引物,以及標簽引物如SEQ ID NO:2~SEQ ID NO:5所示核苷酸序列引物。根據(jù)本發(fā)明,在血漿ctDNA基因變異的檢測方法中,能夠同時穩(wěn)定的檢出基因SNV、CNV以及FUSION。 |
15 |
一種溝葉結縷草全長cDNA文庫構建的方法 |
CN201611144264.X |
2016-12-13 |
CN106754876A |
2017-05-31 |
宗俊勤; 陳煜; 劉建秀; 陳靜波; 李丹丹; 張兵 |
本發(fā)明屬于分子生物學領域,它涉及一種溝葉結縷草全長cDNA文庫構建的方法。方法如下:提取鹽脅迫處理下的溝葉結縷草總RNA,mRNA純化,反轉錄成第一鏈cDNA,經(jīng)過乙醇沉淀、RNA消化、乙醇沉淀獲得高質(zhì)量的第一鏈cDNA;富集帶5’帽子結構的第一鏈cDNA及連接5’接頭;cDNA第二鏈合成、分級分離與收集;BP重組到pDONR/Zeo入門載體;電轉化大腸桿菌DH10B感受態(tài)細胞中,構建了pDONR/Zeo?cDNA文庫。本發(fā)明為后續(xù)表達文庫構建及優(yōu)異基因開發(fā)提供基礎,同時為其它植物文庫構建提供技術參考。 |
16 |
引物組合物、其用途、構建文庫和確定核酸序列的方法 |
CN201611037080.3 |
2016-11-22 |
CN106636063A |
2017-05-10 |
曾曉靜; 高曉峘; 韓穎鑫; 張印新; 李勝 |
本發(fā)明提供引物組合物、其用途、構建文庫及確定核酸序列的方法,其中該引物組合物包含:第一引物組,第一引物組包含第一正向引物和第一反向引物,第一正向引物包括目標區(qū)域特異性正向引物和第一接頭;第一反向引物包括目標區(qū)域特異性反向引物、反向文庫標簽和第二接頭;第二引物組,第二引物組包含第二正向引物和第二反向引物,第二正向引物包含第一退火,第二反向引物包含第二退火;第一接頭與第二正向引物中的第一退火以及第二接頭與第二反向引物中的第二退火相互退火互補,第一接頭與第二正向引物以及第二接頭與第二反向引物經(jīng)PCR擴增后的產(chǎn)物包含完整的測序接頭。 |
17 |
抑郁癥生物標志物及其應用 |
CN201610922665.7 |
2016-10-18 |
CN106554998A |
2017-04-05 |
榮晗; 王明幫; 徐丹; 劉鐵榜; 趙杰; 劉泱慧; 楊海晨; 張建 |
本發(fā)明提供了抑郁癥生物標志物,包括糖解梭菌和嗜中溫螺旋桿菌,還包括嗜二氧化碳噬細胞菌、綠色糖單孢菌、貓螺桿菌、瘤胃球菌屬、氨基酸球菌、氨基酸球菌屬和發(fā)酵型氨基酸球菌;本發(fā)明還提供了用于診斷抑郁癥的試劑盒,以及預防或治療抑郁癥的組合物;本發(fā)明進一步提供了篩選易患抑郁癥的生物樣品的系統(tǒng),通過此篩選系統(tǒng),可篩選易患抑郁癥的生物樣品;本發(fā)明更進一步提供了用于診斷抑郁癥的生物標志物的篩選方法,通過此方法可篩選出用于診斷抑郁癥的生物標志物。 |
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一種污水處理系統(tǒng)中水/泥樣品DNA擴增子測序文庫快速構建的引物及快速構建方法 |
CN201611071680.1 |
2016-11-29 |
CN106554958A |
2017-04-05 |
張徐祥; 湯俊英; 任洪強 |
本發(fā)明公開了一種污水處理系統(tǒng)中水/泥樣品DNA擴增子測序文庫快速構建的引物及快速構建方法,屬于高通量測序領域。本發(fā)明的步驟為:一、樣品DNA的提取;二、目的片段的擴增;三、擴增產(chǎn)物的純化;四、擴增產(chǎn)物的質(zhì)量鑒定;五、擴增產(chǎn)物的混合;六、混合文庫的質(zhì)量鑒定;七、混合文庫的準備及測序。本發(fā)明公開了一種引物,包括接頭序列、索引序列、異質(zhì)性間隔序列、目的片段擴增序列,使得利用該引物經(jīng)一步擴增能夠快速完成文庫的構建,降低了測序成本、大量節(jié)省文庫構建時間。本發(fā)明克服了復雜污水/泥樣品中高多樣性菌群結構解析難題,滿足了基于高通量DNA測序技術應用于污水處理系統(tǒng)中水/泥樣品菌群深度解析的技術需求。 |
19 |
一種薩能奶山羊胎兒成纖維細胞miRNA的篩選與鑒定方法 |
CN201610954711.1 |
2016-10-27 |
CN106520758A |
2017-03-22 |
常衛(wèi)華; 武軍元; 王娟紅; 賀建忠; 王永; 陳宏偉 |
本發(fā)明公開了一種薩能奶山羊胎兒成纖維細胞miRNA的篩選與鑒定方法,該方法包括以下步驟:薩能奶山羊胎兒成纖維細胞的獲得;RNA提取;文庫構建及高通量測序;數(shù)據(jù)處理。本發(fā)明通過高通量測序,獲得16395039total_reads,取出冗余數(shù)據(jù)后獲得clean_reads16150181,其中Unique?sRNAS?205857。生物信息學分析獲得已知miRNA?44條,候選新miRNA247條。已知miRNA靶基因數(shù)量5401,靶基因位點數(shù)為6069;候選miRNA靶基因數(shù)量8401,靶基因位點數(shù)位10832。 |
20 |
基于多重PCR的二代測序建庫技術 |
CN201611145969.3 |
2016-12-13 |
CN106498504A |
2017-03-15 |
王筱恬; 徐峰 |
本發(fā)明涉及生物技術領域,特別涉及二代測序文庫構建技術。該方案中利用兩輪多重PCR來建庫。針對每個靶標區(qū)域或者靶標位點,設計兩條特異性引物,上游的引物OP用于第一輪多重PCR,下游的引物IP用于第二輪多重PCR。將第二輪PCR產(chǎn)物純化后,進行Q-PCR定量,稀釋到合適的濃度用于二代測序。本發(fā)明能夠有效的縮短Ampliseq試劑盒存在的問題,對于客戶定制化的panel設計生產(chǎn)周期只需要兩周,并降低單個樣本建庫的成本,且Ion?Torrent和Illumina測序平臺都通用。 |