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亞氨基噻二嗪二氧化物衍生物及其用途

閱讀：399發(fā)布：2020-06-27

專利匯可以提供亞氨基噻二嗪二氧化物衍生物及其用途專利檢索，專利查詢，專利分析的服務(wù)。并且本 發(fā)明 公開了亞 氨 基噻二嗪二 氧 化物衍 生物 及其用途，具體地，本發(fā)明涉及一類新穎的亞氨基噻二嗪二氧化物衍生物以及包含該類化合物的藥物組合物，它們可作為BACE-1 抑制劑 。本發(fā)明還涉及制備這類化合物和藥物組合物的方法，以及它們在制備 治療 與β- 淀粉 樣蛋白(“Aβ”)有關(guān)的 疾病 ，特別是阿爾茨海默病的藥物中的用途。，下面是亞氨基噻二嗪二氧化物衍生物及其用途專利的具體信息內(nèi)容。

1.一種化合物，其為式(I)或式(I’)所示的化合物，或者式(I)或式(I’)所示化合物的立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、氮氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產(chǎn)物、藥學(xué)上可接受的鹽或它的前藥，
其中：
X為CRx或N；
Y為CH或N；
R1a、R1b、R1c、R1d和R1e各自獨(dú)立地為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-SH、-COOH、-CONH2、-C(＝O)NHCH3、-C(＝O)N(CH3)2、-C(＝O)-(C1-C6烷基)、-C(＝O)-(C1-C6烷氧基)、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C1-C6鹵代烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6鹵代烷氧基、C1-C6烷硫基、C1-C6烷氨基或羥基取代的C1-C6烷基；
R2a、R2b、R2c和Rx各自獨(dú)立地為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、C1-C6烷基、C1-C6鹵代烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6鹵代烷氧基或羥基取代的C1-C6烷基；
R3和R4各自獨(dú)立地為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、C1-C6烷基、C1-C6鹵代烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6鹵代烷氧基或羥基取代的C1-C6烷基；
R5為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、C1-C6烷基、C1-C6鹵代烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6鹵代烷氧基或羥基取代的C1-C6烷基；
R6為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、C1-C6烷基、C1-C6鹵代烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6鹵代烷氧基或羥基取代的C1-C6烷基；
R7和R8各自獨(dú)立地為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、C1-C6烷基、C1-C6鹵代烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6鹵代烷氧基或羥基取代的C1-C6烷基；和R9為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、C1-C6烷基、C1-C6鹵代烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6鹵代烷氧基或羥基取代的C1-C6烷基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中R1a、R1b、R1c、R1d和R1e各自獨(dú)立地為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-SH、-COOH、-CONH2、-C(＝O)-(C1-C4烷基)、-C(＝O)-(C1-C4烷氧基)、C1-C4烷基、C2-C4烯基、C2-C4炔基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基、C1-C4烷硫基、C1-C4烷氨基或羥基取代的C1-C4烷基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的化合物，其中R1a、R1b、R1c、R1d和R1e各自獨(dú)立地為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-SH、-COOH、-CONH2、-C(＝O)CH3、-C(＝O)OCH3、-C(＝O)OCH2CH3、-C(＝O)OCH2CH2CH3、-C(＝O)OCH(CH3)2、甲基、乙基、正丙基、異丙基、-CF3、-CH2CF3、甲氧基、乙氧基、正丙基氧基或異丙基氧基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中R2a、R2b、R2c和Rx各自獨(dú)立地為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基或羥基取代的C1-C4烷基；
R3和R4各自獨(dú)立地為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基或羥基取代的C1-C4烷基；
5
R為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基或羥基取代的C1-C4烷基；
R6為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基或羥基取代的C1-C4烷基；
7 8
R和R 各自獨(dú)立地為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基或羥基取代的C1-C4烷基；
R9為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基或羥基取代的C1-C4烷基。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或4所述的化合物，其中R2a、R2b、R2c和Rx各自獨(dú)立地為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、甲基、乙基、正丙基、異丙基、-CF3、-CH2CF3、甲氧基、乙氧基、正丙基氧基或異丙基氧基；
R3和R4各自獨(dú)立地為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、甲基、乙基、正丙基、異丙基、-CF3、-CH2CF3、甲氧基、乙氧基、正丙基氧基或異丙基氧基；
R5為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、甲基、乙基、正丙基、異丙基、-CF3、-CH2CF3、甲氧基、乙氧基、正丙基氧基或異丙基氧基；
R6為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、甲基、乙基、正丙基、異丙基、-CF3、-CH2CF3、甲氧基、乙氧基、正丙基氧基或異丙基氧基；
R7和R8各自獨(dú)立地為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、甲基、乙基、正丙基、異丙基、-CF3、-CH2CF3、甲氧基、乙氧基、正丙基氧基或異丙基氧基；
R9為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、甲基、乙基、正丙基、異丙基、-CF3、-CH2CF3、甲氧基、乙氧基、正丙基氧基或異丙基氧基。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其為式(II)或式(II’)所示的化合物，或者式(II)或式(II’)所示化合物的立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、氮氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產(chǎn)物、藥學(xué)上可接受的鹽或它的前藥，
7.根據(jù)權(quán)利要求1或6所述的化合物，其為具有下列之一結(jié)構(gòu)的化合物或具有下列之一結(jié)構(gòu)的化合物的立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、氮氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產(chǎn)物、藥學(xué)上可接受的鹽或它的前藥：
8.一種藥物組合物，包含權(quán)利要求1-7任意一項(xiàng)所述的化合物；和
所述藥物組合物任選地進(jìn)一步包含藥學(xué)上可接受的賦形劑、載體、佐劑或它們的任意組合。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的藥物組合物，其進(jìn)一步包含附加治療劑，其中所述附加治療劑為納美芬、利培酮、卡巴拉汀、美金剛、米他扎平、文拉法辛、去郁敏、去甲替林、唑吡坦、佐匹克隆、尼麥角林、吡拉西坦、司來吉蘭、己酮可可堿、他克林，多奈哌齊，加蘭他敏，利凡斯的明，維他命E、貝特類，煙堿酸，煙堿樣受體激動(dòng)劑，煙堿乙酰膽堿受體激動(dòng)劑，膽堿酯酶抑制劑，N-甲基-D-天冬氨酸受體拮抗劑，α分泌酶活性的促進(jìn)劑，糖原合成酶激酶β抑制劑，淀粉樣蛋白聚集的抑制劑，γ分泌酶抑制劑，γ分泌酶調(diào)節(jié)劑，組胺H3拮抗劑，組蛋白脫乙?；敢种苿琍DE-4抑制劑，PDE-10抑制劑，mGluR1受體調(diào)節(jié)劑或拮抗劑，mGluR5受體調(diào)節(jié)劑或拮抗劑，mGluR2/3拮抗劑，5-HT4激動(dòng)劑，5-HT6受體拮抗劑或GABAA反向激動(dòng)劑。
10.權(quán)利要求1-7任意一項(xiàng)所述的化合物或權(quán)利要求8-9任意一項(xiàng)所述的藥物組合物在制備藥物中的用途，所述藥物用于預(yù)防、治療或減輕與β-淀粉樣蛋白有關(guān)的疾病；
其中，所述與β-淀粉樣蛋白有關(guān)的疾病為癡呆，老年癡呆，與阿爾茨海默病、帕金森病和/或唐氏綜合征相關(guān)的癡呆，唐氏綜合征，注意力缺陷癥狀，與阿爾茨海默病、帕金森病和/或唐氏綜合征相關(guān)的注意力缺陷癥狀，記憶喪失，與帕金森病相關(guān)的記憶喪失，與阿爾茨海默病相關(guān)的記憶喪失，中風(fēng)，神經(jīng)變性，淀粉樣變性，β-淀粉樣血管病，大腦淀粉樣血管病，遺傳性腦出血，血液透析并發(fā)癥，青光眼，II型糖尿病，糖尿病相關(guān)的淀粉狀蛋白生成，創(chuàng)傷性腦損傷，牛海綿狀腦病，輕微認(rèn)知損害或阿爾茨海默病。

說明書全文

亞氨基噻二嗪二氧化物衍生物及其用途

技術(shù)領(lǐng)域

[0001] 本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及新穎的亞氨基噻二嗪二氧化物衍生物和包含這些化合物的藥物組合物，及其使用方法和用途。特別地，本發(fā)明所述的新穎的亞氨基噻二嗪二氧化物衍生物可作為BACE-1抑制劑，用于預(yù)防、治療或減輕與β-淀粉樣蛋白(“Aβ”)有關(guān)的疾病，尤其是阿爾茨海默病。

背景技術(shù)

[0002] β-淀粉樣蛋白(“Aβ”)是β-淀粉樣原纖維和斑塊的主要組成部分，與Aβ有關(guān)的疾病包括但不限于：癡呆，老年癡呆，早老性癡呆，與阿爾茨海默病、帕金森病和/或唐氏綜合征相關(guān)的癡呆，唐氏綜合征，注意力缺陷癥狀，與阿爾茨海默病、帕金森病和/或唐氏綜合征相關(guān)的注意力缺陷癥狀，記憶喪失，與帕金森病相關(guān)的記憶喪失，與阿爾茨海默病相關(guān)的記憶喪失，中風(fēng)，神經(jīng)變性，淀粉樣變性，β-淀粉樣血管病，大腦淀粉樣血管病，遺傳性腦出血，血液透析并發(fā)癥(源于β2小球蛋白，并由此在血液透析患者中產(chǎn)生并發(fā)癥)，青光眼，II型糖尿病，糖尿病相關(guān)的淀粉狀蛋白生成，創(chuàng)傷性腦損傷(“TBI”)，牛海綿狀腦病，皮質(zhì)基底節(jié)變性，進(jìn)行性核上性麻痹，小膠質(zhì)細(xì)胞增生和腦炎癥，嗅覺損害，與阿爾茨海默病、帕金森病和/或唐氏綜合征相關(guān)的嗅覺損害，癢病，Creutzfeld-Jakob疾病，輕微認(rèn)知損害(“MCI”)和阿爾茨海默病。
[0003] 阿爾茨海默病(Alzheimer’s?disease,AD)是老年期癡呆的主要類型，是老年人認(rèn)知和精神衰退的主要病因，是嚴(yán)重影響老年人生活質(zhì)量的進(jìn)行性發(fā)展的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾
病。臨床上以記憶障礙、失語、失用、失認(rèn)、視空間技能損害、執(zhí)行功能障礙以及人格和行為改變等全面性癡呆表現(xiàn)為特征。阿爾茨海默病不僅惡化個(gè)人和社會(huì)生活質(zhì)量，也會(huì)使病人
和周圍的其他人感到痛苦。阿爾茨海默病是位于癌癥、心臟病和腦溢血之后的第四位高死
亡原因。
[0004] 據(jù)估計(jì)，在全世界范圍內(nèi)，超過2千萬人患有AD，并且認(rèn)為AD是引起癡呆的最常見的原因。AD是以神經(jīng)元變性和喪失為特征的疾病，并且還會(huì)形成神經(jīng)纖維纏結(jié)和衰老斑。
[0005] 根據(jù)我國多個(gè)流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果，65歲以上人群中AD的患病率約為5％，其發(fā)病率一般隨年齡的增加而增加。對于發(fā)達(dá)國家的研究統(tǒng)計(jì)表明，患有阿爾茨海默病的病人的數(shù)
量比例也是隨著年齡的增加而增加。其中，60多歲的人群、70多歲的人群和80多歲的人群中患病率分別為15-20％、30-40％和60％。由此可見，80多歲的人群中患AD的情況很嚴(yán)重，每對配偶中的一個(gè)人就患有阿爾茨海默病。
[0006] 導(dǎo)致阿爾茨海默病的病因有多種。首先，根據(jù)現(xiàn)有的研究，患有阿爾茨海默病的病人具有低濃度的乙酰膽堿，當(dāng)乙酰膽堿酯酶被抑制時(shí)，通過增加乙酰膽堿的濃度而改善阿爾茨海默病的癥狀；第二，通過使用雌激素、抗氧化劑、游離基清除劑或抗炎劑可以間接防止阿爾茨海默病的進(jìn)一步惡化；第三，通過防止突觸和神經(jīng)元的逐漸和不可逆的退化來治
療阿爾茨海默?。坏谒?，通過研究阿爾茨海默病的遺傳因素來延遲阿爾茨海默病的進(jìn)展，所述遺傳因素涉及β-淀粉樣蛋白的合成、進(jìn)行、神經(jīng)元的累積和在皮層中β-淀粉樣蛋白的沉積。同樣地，通過發(fā)現(xiàn)降低β-淀粉樣蛋白的細(xì)胞外濃度的控制因素，并選擇性地除去在腦內(nèi)的β-淀粉樣蛋白沉積物，可以治療阿爾茨海默病。
[0007] 目前，阿爾茨海默病的治療僅限于治療它的癥狀，而不是治療它的基礎(chǔ)病因。為了改善癥狀而批準(zhǔn)的藥劑包括，例如，N-甲基-D-天冬氨酸受體拮抗劑(例如，美金剛)，乙酰膽堿酯酶抑制劑(例如，多奈哌齊，利凡斯的明，加蘭他敏，他克林)。臨床上還沒有能有效逆轉(zhuǎn)認(rèn)知缺損改善治療阿爾茨海默病的藥物。乙酰膽堿酯酶抑制劑(多奈哌齊、卡巴拉汀、石杉堿甲、加蘭他敏)治療輕-中度AD患者有一定的療效，但也只是暫時(shí)緩解癥狀，無法進(jìn)一步阻止神經(jīng)細(xì)胞的衰減，且伴隨有嚴(yán)重不良反應(yīng)。聯(lián)合應(yīng)用腦血流和腦代謝改善劑如奧拉西坦(oxiracetam)在提高記憶力方面具備一定療效，但是更多時(shí)候是作為益智劑存在。因此，急需開發(fā)新的能夠改善或治療阿爾茨海默病的藥物。而圍繞Aβ的靶點(diǎn)的藥物開發(fā)，一直被認(rèn)為是一條新的很有希望的途徑。
[0008] Aβ肽是由被稱為淀粉樣前體蛋白(“APP”)的跨膜蛋白的解朊裂解產(chǎn)生的短肽。APP斷裂產(chǎn)生Aβ肽：在Aβ的N端附近位置通過β-分泌酶活性斷裂，在Aβ的C端附近位置通過γ-分泌酶活性斷裂(APP還可通過α-分泌酶活性斷裂，產(chǎn)生分泌的、非淀粉樣片段，被稱為可溶性APPα)。β位點(diǎn)APP斷裂酶(Beta?site?APP?Cleaving?Enzyme“,BACE-1”)是通過β-分泌酶活性而負(fù)責(zé)產(chǎn)生Aβ的主要天冬氨酰蛋白酶。研究已經(jīng)表明，通過抑制BACE-1從而可以抑制Aβ的產(chǎn)生。
[0009] 在AD中，通過β-分泌酶和γ-分泌酶活性形成的Aβ肽可以形成三元結(jié)構(gòu)，其聚集形成淀粉樣原纖維。另外，Aβ肽可以形成Aβ寡聚物(又稱為“Aβ聚集物”或“Abeta寡聚物”)。Aβ寡聚物是由2-12個(gè)Aβ肽(其結(jié)構(gòu)上不同于Aβ原纖維)組成的小的多聚體結(jié)構(gòu)。淀粉樣原纖維可以在對記憶和認(rèn)知能力重要的腦區(qū)域以致密形式沉積在神經(jīng)元外，被稱為神經(jīng)炎斑、衰老斑或擴(kuò)散斑。當(dāng)在細(xì)胞培養(yǎng)物中或在大鼠的腦中注射時(shí)，Aβ寡聚物是細(xì)胞毒素。這種Aβ噬斑形成和沉積，和/或Aβ寡聚物形成，和作為結(jié)果發(fā)生的神經(jīng)元死亡和認(rèn)知損害，是AD病理生理學(xué)的一些標(biāo)志。AD病理生理學(xué)的其他標(biāo)志還包括：由異常磷酸化的tau蛋白組成的細(xì)胞內(nèi)神經(jīng)纖維纏結(jié)和神經(jīng)炎癥。
[0010] 有證據(jù)表明，Aβ、Aβ斑塊、Aβ原纖維、Aβ團(tuán)聚體和/或Aβ寡聚物在AD病理生理學(xué)中起到成因作用(Ohno,et?al.Neurobiology?of?Disease,2007,No.26,134-145)。已知，APP和早衰蛋白(presenilins)1/2(PS1/2)中的基因突變可導(dǎo)致家族性AD，并且認(rèn)為家族性AD的
病因是Aβ的42-氨基酸形式的產(chǎn)生增加。已經(jīng)證明，Aβ在培養(yǎng)物和體內(nèi)可毒害神經(jīng)。例如，當(dāng)注射到老靈長類動(dòng)物的腦中時(shí)，纖維狀A(yù)β導(dǎo)致注射部位周圍的神經(jīng)元死亡。而且還報(bào)道了Aβ在AD的病因中的作用的其他直接和間接證據(jù)。
[0011] BACE-1已經(jīng)成為治療阿爾茨海默病的治療靶向。例如，McConlogue小組已經(jīng)說明，BACE-1酶活性的部分降低和Aβ水平的伴隨降低可顯著地抑制Aβ激勵(lì)的AD類病變，使得β-分泌酶成為在AD中用于治療干預(yù)的靶向(McConlogue,et?al.J.Bio.Chem.,Sep.2007,Vol.282,No.36)。Luo小組已經(jīng)報(bào)道，缺乏BACE-1的小鼠仍具有正常表型，并且消除β-淀粉樣蛋白形成(Luo,et?al.Nature?Neuroscience,March?2001,Vol.4,No.3)。Roberds小組已
經(jīng)確定，β分泌酶活性的抑制或喪失不會(huì)造成極度的表型缺陷，同時(shí)導(dǎo)致Aβ的伴隨性降低(Roberds,et?al.HumanMol.Genetics,2001,Vol.10,No.12,1317-1324)。Ohno小組已經(jīng)報(bào)
道，在5XFAD小鼠中，BACE-1的遺傳缺失可消除Aβ形成、阻礙淀粉樣蛋白沉積、防止在大腦皮層和下腳(在5XFAD小鼠中顯現(xiàn)最嚴(yán)重淀粉樣變性的腦區(qū)域)中發(fā)現(xiàn)的神經(jīng)元喪失，并且在
5XFAD小鼠中可挽救記憶缺陷。該小組還報(bào)道，Aβ最終對AD中的神經(jīng)元死亡負(fù)有責(zé)任，并且推斷BACE-1抑制可作為治療AD的有效方法(Ohno,et?al.Neurobiology?of?Disease,2007,
No.26,134-145)。
[0012] 目前，抑制Aβ沉積的治療潛力已經(jīng)促使許多小組去表征BACE-1和鑒定BACE-1抑制劑。人們對BACE-1抑制劑也開展了一些研究：
[0013] WO?2011044181?A1公開了作為BACE抑制劑(BACE-1或BACE-2抑制劑)的亞氨基噻二嗪二氧化物化合物、組合物和它們的用途，用于預(yù)防或治療與β-淀粉樣蛋白(“Aβ”)產(chǎn)生相關(guān)的各種病變，包括阿爾茨海默病。
[0014] WO?2016172255?A1公開了作為BACE-1抑制劑的亞氨基四氫嘧啶-4(1H)-酮化合物和亞氨基硫代嗎啉二氧化物化合物及它們的用途，用于預(yù)防或治療唐氏癥、β類淀粉蛋白血管病變、與認(rèn)知損傷相關(guān)的病癥、阿爾茨海默病、記憶喪失、與阿爾茨海默病相關(guān)的注意力不足癥、神經(jīng)退化性疾病、早發(fā)性失智癥、老年失智癥及與帕金森病、阿爾茨海默病及/或唐氏癥相關(guān)的失智癥、老年性黃斑部病變、青光眼、嗅覺功能損傷、創(chuàng)傷性腦傷、漸進(jìn)式肌肉萎縮癥、II型糖尿病基心血管疾病(中風(fēng))。
[0015] WO?2014093190?A1公開了作為BACE抑制劑(BACE-1或BACE-2抑制劑)的亞氨基噻二嗪二氧化物化合物、組合物和它們的用途，用于預(yù)防或治療阿爾茨海默病。
[0016] WO?2017051294?A1公開了作為BACE-1抑制劑的亞氨基噻二嗪二氧化物化合物、組合物和它們的用途，用于預(yù)防或治療由BACE-1介導(dǎo)的疾病如阿爾茨海默病。
[0017] WO?2015094930?A1公開了作為BACE抑制劑(BACE-1或BACE-2抑制劑)的C-6螺碳環(huán)取代的亞氨基噻二嗪二氧化物化合物、組合物和它們的用途，用于預(yù)防或治療阿爾茨海默
病。
[0018] WO?2014099768?A1公開了作為BACE抑制劑(BACE-1或BACE-2抑制劑)的C-6氮雜螺環(huán)取代的亞氨基噻二嗪二氧化物化合物、組合物和它們的用途，用于預(yù)防或治療阿爾茨海
默病。
[0019] WO?2014150340?A1公開了作為BACE抑制劑(BACE-1或BACE-2抑制劑)的S-亞氨基-S-氧代的亞氨基噻二嗪化合物、組合物和它們的用途，用于預(yù)防或治療阿爾茨海默病。
[0020] WO?2012139425?A1公開了作為BACE抑制劑(BACE-1或BACE-2抑制劑)的5-取代的亞氨基噻嗪類及其單和二氧化物化合物、組合物和它們的用途，用于預(yù)防或治療阿爾茨海
默病。
[0021] WO?2013174781?A1公開了作為BACE-1抑制劑的5-氨基[1,4]噻嗪類化合物、組合物和它們的用途，用于預(yù)防或治療阿爾茨海默病。
[0022] WO?2018112094?A1公開了作為BACE抑制劑(BACE-1或BACE-2抑制劑)的1,4-噻嗪二氧化物和1,2,4-噻二嗪二氧化物化合物、組合物和它們的用途，用于預(yù)防或治療阿爾茨
海默病。

發(fā)明內(nèi)容

[0023] 本發(fā)明提供了一類作為BACE-1抑制劑的新穎的亞氨基噻二嗪二氧化物衍生物，其可以通過抑制BACE-1從而抑制Aβ的產(chǎn)生，因此，可以用于治療由β-淀粉樣蛋白(“Aβ”)介導(dǎo)的疾病，特別是用于治療阿爾茨海默病。并且通過實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明的亞氨基噻二嗪二氧化物衍生物的性質(zhì)穩(wěn)定，安全性良好，具有良好的藥效學(xué)和藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)，例如良好的腦/血漿比(brain?plasma?ratio)、良好的生物利用度或良好的代謝穩(wěn)定性等。因此，其具備良好的臨床應(yīng)用前景。
[0024] 本發(fā)明還提供了制備這類化合物的方法、含有這類化合物的藥物組合物以及這類化合物和這類化合物的藥物組合物在制備藥物中的用途。
[0025] 一方面，本發(fā)明涉及一種化合物，其為式(I)或式(I’)所示的化合物，或者式(I)或式(I’)所示化合物的立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、氮氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產(chǎn)物、藥學(xué)上可接受的鹽或它的前藥，
[0026]
[0027] 其中：各R1a、R1b、R1c、R1d、R1e、R2a、R2b、R2c、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、X和Y具有如本發(fā)明所述的含義。
[0028] 在一實(shí)施方案中，X為CRx或N。
[0029] 在一實(shí)施方案中，Y為CH或N。
[0030] 在一實(shí)施方案中，R1a、R1b、R1c、R1d和R1e各自獨(dú)立地為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-SH、-COOH、-CONH2、-C(＝O)NHCH3、-C(＝O)N(CH3)2、-C(＝O)-(C1-C6烷基)、-C(＝O)-(C1-C6烷氧基)、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C1-C6鹵代烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6鹵代烷氧基、C1-C6烷硫基、C1-C6烷氨基或羥基取代的C1-C6烷基。
[0031] 在一實(shí)施方案中，R2a、R2b、R2c和Rx各自獨(dú)立地為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、C1-C6烷基、C1-C6鹵代烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6鹵代烷氧基或羥基取代的C1-C6烷基。
[0032] 在一實(shí)施方案中，R3和R4各自獨(dú)立地為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、C1-C6烷基、C1-C6鹵代烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6鹵代烷氧基或羥基取代的C1-C6烷基。
[0033] 在一實(shí)施方案中，R5為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、C1-C6烷基、C1-C6鹵代烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6鹵代烷氧基或羥基取代的C1-C6烷基。
[0034] 在一實(shí)施方案中，R6為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、C1-C6烷基、C1-C6鹵代烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6鹵代烷氧基或羥基取代的C1-C6烷基。
[0035] 在一實(shí)施方案中，R7和R8各自獨(dú)立地為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、C1-C6烷基、C1-C6鹵代烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6鹵代烷氧基或羥基取代的C1-C6烷基。
[0036] 在一實(shí)施方案中，R9為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、C1-C6烷基、C1-C6鹵代烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6鹵代烷氧基或羥基取代的C1-C6烷基。
[0037] 在一實(shí)施方案中，R1a、R1b、R1c、R1d和R1e各自獨(dú)立地為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-SH、-COOH、-CONH2、-C(＝O)-(C1-C4烷基)、-C(＝O)-(C1-C4烷氧基)、C1-C4烷基、C2-C4烯基、C2-C4炔基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基、C1-C4烷硫基、C1-C4烷氨基或羥基取代的C1-C4烷基。
[0038] 在另一實(shí)施方案中，R1a、R1b、R1c、R1d和R1e各自獨(dú)立地為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-SH、-COOH、-CONH2、-C(＝O)CH3、-C(＝O)OCH3、-C(＝O)OCH2CH3、-C(＝O)OCH2CH2CH3、-C(＝O)OCH(CH3)2、甲基、乙基、正丙基、異丙基、-CF3、-CH2CF3、甲氧基、乙氧基、正丙基氧基或異丙基氧基。
[0039] 在一實(shí)施方案中，R2a、R2b、R2c和Rx各自獨(dú)立地為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基或羥基取代的C1-C4烷基。
[0040] 在另一實(shí)施方案中，R2a、R2b、R2c和Rx各自獨(dú)立地為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、甲基、乙基、正丙基、異丙基、-CF3、-CH2CF3、甲氧基、乙氧基、正丙基氧基或異丙基氧基。
[0041] 在一實(shí)施方案中，R3和R4各自獨(dú)立地為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基或羥基取代的C1-C4烷基。
[0042] 在另一實(shí)施方案中，R3和R4各自獨(dú)立地為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、甲基、乙基、正丙基、異丙基、-CF3、-CH2CF3、甲氧基、乙氧基、正丙基氧基或異丙基氧基。
[0043] 在一實(shí)施方案中，R5為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基或羥基取代的C1-C4烷基。
[0044] 在另一實(shí)施方案中，R5為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、甲基、乙基、正丙基、異丙基、-CF3、-CH2CF3、甲氧基、乙氧基、正丙基氧基或異丙基氧基。
[0045] 在一實(shí)施方案中，R6為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基或羥基取代的C1-C4烷基。
[0046] 在一實(shí)施方案中，R6為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、甲基、乙基、正丙基、異丙基、-CF3、-CH2CF3、甲氧基、乙氧基、正丙基氧基或異丙基氧基。
[0047] 在另一實(shí)施方案中，R7和R8各自獨(dú)立地為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基或羥基取代的C1-C4烷基。
[0048] 在一實(shí)施方案中，R7和R8各自獨(dú)立地為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、甲基、乙基、正丙基、異丙基、-CF3、-CH2CF3、甲氧基、乙氧基、正丙基氧基或異丙基氧基。
[0049] 在一實(shí)施方案中，R9為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基或羥基取代的C1-C4烷基。
[0050] 在另一實(shí)施方案中，R9為H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-COOH、-C(＝O)NH2、甲基、乙基、正丙基、異丙基、-CF3、-CH2CF3、甲氧基、乙氧基、正丙基氧基或異丙基氧基。
[0051] 一方面，本發(fā)明涉及一種化合物，其為式(II)或式(II’)所示的化合物，或者式(II)或式(II’)所示化合物的立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、氮氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產(chǎn)物、藥學(xué)上可接受的鹽或它的前藥，
[0052]
[0053] 在一實(shí)施方案中，本發(fā)明所述的化合物，其為具有下列之一結(jié)構(gòu)的化合物或具有下列之一結(jié)構(gòu)的化合物的立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、氮氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產(chǎn)物、藥學(xué)上可接受的鹽或它的前藥：
[0054]
[0055] 另一方面，本發(fā)明涉及一種藥物組合物，所述藥物組合物包含本發(fā)明公開的化合物。
[0056] 在一實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及的藥物組合物，進(jìn)一步包含藥學(xué)上可接受的賦形劑、載體、佐劑或它們的任意組合。
[0057] 在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及的藥物組合物，其進(jìn)一步包含附加治療劑，其中所述附加治療劑為納美芬、利培酮、卡巴拉汀、美金剛、米他扎平、文拉法辛、去郁敏、去甲替林、唑吡坦、佐匹克隆、尼麥角林、吡拉西坦、司來吉蘭、己酮可可堿、他克林，多奈哌齊，加蘭他敏，利凡斯的明，維他命E、貝特類，煙堿酸，煙堿樣受體激動(dòng)劑，煙堿乙酰膽堿受體激動(dòng)劑，膽堿酯酶抑制劑，N-甲基-D-天冬氨酸受體拮抗劑，α分泌酶活性的促進(jìn)劑，糖原合成酶激酶β抑制劑，淀粉樣蛋白聚集的抑制劑，γ分泌酶抑制劑，γ分泌酶調(diào)節(jié)劑，組胺H3拮抗劑，組蛋白脫乙?；敢种苿?，PDE-4抑制劑，PDE-10抑制劑，mGluR1受體調(diào)節(jié)劑或拮抗劑，mGluR5受體調(diào)節(jié)劑或拮抗劑，mGluR2/3拮抗劑，5-HT4激動(dòng)劑，5-HT6受體拮抗劑或GABAA反向激動(dòng)劑。
[0058] 又一方面，本發(fā)明涉及本發(fā)明公開的化合物或藥物組合物在制備藥物中的用途，所述藥物用于抑制BACE-1從而抑制Aβ的產(chǎn)生。
[0059] 再一方面，本發(fā)明涉及本發(fā)明公開的化合物或藥物組合物在制備藥物中的用途，所述藥物用于預(yù)防、治療或減輕與β-淀粉樣蛋白有關(guān)的疾病。
[0060] 在一實(shí)施方案中，所述與β-淀粉樣蛋白有關(guān)的疾病為癡呆，老年癡呆，與阿爾茨海默病、帕金森病和/或唐氏綜合征相關(guān)的癡呆，唐氏綜合征，注意力缺陷癥狀，與阿爾茨海默病、帕金森病和/或唐氏綜合征相關(guān)的注意力缺陷癥狀，記憶喪失，與帕金森病相關(guān)的記憶喪失，與阿爾茨海默病相關(guān)的記憶喪失，中風(fēng)，神經(jīng)變性，淀粉樣變性，β-淀粉樣血管病，大腦淀粉樣血管病，遺傳性腦出血，血液透析并發(fā)癥，青光眼，II型糖尿病，糖尿病相關(guān)的淀粉狀蛋白生成，創(chuàng)傷性腦損傷，牛海綿狀腦病，輕微認(rèn)知損害或阿爾茨海默病。
[0061] 在另一實(shí)施方案中，所述與β-淀粉樣蛋白有關(guān)的疾病為阿爾茨海默病。
[0062] 另一方面，本發(fā)明涉及式(I)，(I’)，(II)或(II’)所示化合物的制備、分離和純化的方法。
[0063] 生物試驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明化合物通過抑制BACE-1從而抑制Aβ的產(chǎn)生，并可作為較好的BACE-1抑制劑。
[0064] 本發(fā)明的任一方面的任一實(shí)施方案，可以與其它實(shí)施方案進(jìn)行組合，只要它們不會(huì)出現(xiàn)矛盾。此外，在本發(fā)明任一方面的任一實(shí)施方案中，任一技術(shù)特征可以適用于其它實(shí)施方案中的該技術(shù)特征，只要它們不會(huì)出現(xiàn)矛盾。
[0065] 前面所述內(nèi)容只概述了本發(fā)明的某些方面，但并不限于這些方面。這些方面及其他方面的內(nèi)容將在下面作更加具體完整的描述。本說明書中的所有參考文獻(xiàn)通過整體引用
于此。當(dāng)本說明書的公開內(nèi)容與引用文獻(xiàn)有差異時(shí)，以本說明書的公開內(nèi)容為準(zhǔn)。
[0066] 本發(fā)明的詳細(xì)說明書
[0067] 定義和一般術(shù)語
[0068] 現(xiàn)在詳細(xì)描述本發(fā)明的某些實(shí)施方案，其實(shí)例由隨附的結(jié)構(gòu)式和化學(xué)式說明。本發(fā)明意圖涵蓋所有的替代、修改和等同技術(shù)方案，它們均包括在如權(quán)利要求定義的本發(fā)明
范圍內(nèi)。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)認(rèn)識(shí)到，許多與本發(fā)明所述類似或等同的方法和材料能夠用于
實(shí)踐本發(fā)明。本發(fā)明絕不限于本發(fā)明所述的方法和材料。在所結(jié)合的文獻(xiàn)、專利和類似材料的一篇或多篇與本申請不同或相矛盾的情況下(包括但不限于所定義的術(shù)語、術(shù)語應(yīng)用、所描述的技術(shù)，等等)，以本申請為準(zhǔn)。
[0069] 應(yīng)進(jìn)一步認(rèn)識(shí)到，本發(fā)明的某些特征，為清楚可見，在多個(gè)獨(dú)立的實(shí)施方案中進(jìn)行了描述，但也可以在單個(gè)實(shí)施例中以組合形式提供。反之，本發(fā)明的各種特征，為簡潔起見，在單個(gè)實(shí)施方案中進(jìn)行了描述，但也可以單獨(dú)或以任意適合的子組合提供。
[0070] 除非另外說明，應(yīng)當(dāng)應(yīng)用本發(fā)明所使用的下列定義。出于本發(fā)明的目的，化學(xué)元素與元素周期表CAS版，和《化學(xué)和物理手冊》，第75版，1994一致。此外，有機(jī)化學(xué)一般原理可參考“Organic?Chemistry”,Thomas?Sorrell,University?Science?Books,Sausalito:1999,和“March's?Advanced?Organic?Chemistry”by?Michael?B.Smith?and?Jerry?
March,John?Wiley&Sons,New?York:2007中的描述，其全部內(nèi)容通過引用并入本發(fā)明。
[0071] 除非另有說明或者上下文中有明顯的沖突，本發(fā)明所使用的冠詞“一”、“一個(gè)(種)”和“所述”旨在包括“至少一個(gè)”或“一個(gè)或多個(gè)”。因此，本發(fā)明所使用的這些冠詞是指一個(gè)或多于一個(gè)(即至少一個(gè))賓語的冠詞。例如，“一組分”指一個(gè)或多個(gè)組分，即可能有多于一個(gè)的組分被考慮在所述實(shí)施方案的實(shí)施方式中采用或使用。
[0072] 術(shù)語“立體異構(gòu)體”是指具有相同化學(xué)構(gòu)造，但原子或基團(tuán)在空間上排列方式不同的化合物。立體異構(gòu)體包括對映異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體、構(gòu)象異構(gòu)體(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)、幾何異構(gòu)體(順/反異構(gòu)體)、阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體，等等。
[0073] 術(shù)語“手性分子”是具有與其鏡像不能重疊性質(zhì)的分子；而“非手性分子”是指與其鏡像可以重疊的分子。
[0074] 術(shù)語“對映異構(gòu)體”是指一個(gè)化合物的兩個(gè)不能重疊但互成鏡像關(guān)系的異構(gòu)體。
[0075] 術(shù)語“外消旋物”或“外消旋混合物”是指兩個(gè)對映異構(gòu)體的等摩爾混合物，該混合物缺少光學(xué)活性。
[0076] 術(shù)語“非對映異構(gòu)體”是指有兩個(gè)或多個(gè)手性中心并且其分子不互為鏡像的立體異構(gòu)體。非對映異構(gòu)體具有不同的物理性質(zhì)，如熔點(diǎn)、沸點(diǎn)、光譜性質(zhì)和反應(yīng)性。非對映異構(gòu)體混合物可通過高分辨分析操作如電泳和色譜，例如HPLC來分離。
[0077] 本發(fā)明所使用的立體化學(xué)定義和規(guī)則一般遵循S.P.Parker，Ed.,McGraw-Hill?Dictionary?of?Chemical?Terms(1984)McGraw-Hill?Book?Company,New?York；and?
Eliel,E.and?Wilen,S,“Stereochemistry?of?Organic?Compounds”,John?Wiley&Sons,
Inc,New?York,1994。許多有機(jī)化合物以光學(xué)活性形式存在，即它們具有使平面偏振光的平面發(fā)生旋轉(zhuǎn)的能力。在描述光學(xué)活性化合物時(shí)，使用前綴D和L或R和S來表示分子關(guān)于其一
個(gè)或多個(gè)手性中心的絕對構(gòu)型。前綴d和l或(+)和(-)是用于指定化合物所致平面偏振光旋
轉(zhuǎn)的符號，其中(-)或l表示化合物是左旋的。前綴為(+)或d的化合物是右旋的。一種具體的立體異構(gòu)體是對映異構(gòu)體，這種異構(gòu)體的混合物稱作對映異構(gòu)體混合物。對映異構(gòu)體的50:
50混合物稱為外消旋混合物或外消旋體，當(dāng)在化學(xué)反應(yīng)或過程中沒有立體選擇性或立體特
異性時(shí)，可出現(xiàn)這種情況。
[0078] 本發(fā)明公開化合物的任何不對稱原子(例如，碳等)都可以以外消旋或?qū)τ丑w富集的形式存在，例如(R)-、(S)-或(R,S)-構(gòu)型形式存在。在某些實(shí)施方案中，各不對稱原子在(R)-或(S)-構(gòu)型方面具有至少50％對映體過量，至少60％對映體過量，至少70％對映體過
量，至少80％對映體過量，至少90％對映體過量，至少95％對映體過量，或至少99％對映體過量。
[0079] 依據(jù)起始物料和方法的選擇，本發(fā)明化合物可以以可能的異構(gòu)體中的一個(gè)或它們的混合物，例如外消旋體和非對映異構(gòu)體混合物(這取決于不對稱碳原子的數(shù)量)的形式存
在。光學(xué)活性的(R)-或(S)-異構(gòu)體可使用手性合成子或手性試劑制備，或使用常規(guī)技術(shù)拆
分。如果化合物含有一個(gè)雙鍵，取代基可能為E或Z構(gòu)型；如果化合物中含有二取代的環(huán)烷
基，環(huán)烷基的取代基可能有順式或反式構(gòu)型。
[0080] 所得的任何立體異構(gòu)體的混合物可以依據(jù)組分物理化學(xué)性質(zhì)上的差異被分離成純的或基本純的幾何異構(gòu)體，對映異構(gòu)體，非對映異構(gòu)體，例如，通過色譜法和/或分步結(jié)晶法。
[0081] 可以用已知的方法將任何所得終產(chǎn)物或中間體的外消旋體通過本領(lǐng)域技術(shù)人員熟悉的方法拆分成光學(xué)對映體，如，通過對獲得的其非對映異構(gòu)的鹽進(jìn)行分離。外消旋的產(chǎn)物也可以通過手性色譜來分離，如，使用手性吸附劑的高效液相色譜(HPLC)。特別地，對映異構(gòu)體可以通過不對稱合成制備，例如，可參考Jacques,et?al.,Enantiomers,Racemates?and?Resolutions(Wiley?Interscience,New?York,1981)；Principles?of?Asymmetric?
nd
Synthesis(2 ?Ed.Robert?E.Gawley,Jeffrey?Aube,Elsevier,Oxford,UK,2012)；Eliel,
E.L.Stereochemistry?of?Carbon?Compounds(McGraw-Hill,NY,1962)；Wilen,S.H.Tables?of?Resolving?Agents?and?Optical?Resolutions?p.268(E.L.Eliel,Ed.,Univ.of?Notre?
Dame?Press,Notre?Dame,IN?1972)；Chiral?Separation?Techniques:A?Practical?
Approach(Subramanian,G.Ed.,Wiley-VCH?Verlag?GmbH&Co.KGaA,Weinheim,Germany,
2007)。
[0082] 術(shù)語“互變異構(gòu)體”或“互變異構(gòu)形式”是指具有不同能量的可通過低能壘(low?energy?barrier)互相轉(zhuǎn)化的結(jié)構(gòu)異構(gòu)體。若互變異構(gòu)是可能的(如在溶液中)，則可以達(dá)到互變異構(gòu)體的化學(xué)平衡。例如，質(zhì)子互變異構(gòu)體(protontautomer)(也稱為質(zhì)子轉(zhuǎn)移互變異構(gòu)體(prototropic?tautomer))包括通過質(zhì)子遷移來進(jìn)行的互相轉(zhuǎn)化，如酮-烯醇異構(gòu)化和
亞胺-烯胺異構(gòu)化。
[0083] “藥學(xué)上可接受的”是指這樣一些化合物、原料、組合物和/或劑型，它們在合理醫(yī)學(xué)判斷的范圍內(nèi)，適用于與患者組織接觸而無過度毒性、刺激性、變態(tài)反應(yīng)或與合理的利益/風(fēng)險(xiǎn)比相對稱的其他問題和并發(fā)癥，并有效用于既定用途。
[0084] 術(shù)語“任選地被…….所取代”，可以與術(shù)語“未取代或被…..所取代”交換使用，即所述結(jié)構(gòu)是未取代的或者被一個(gè)或多個(gè)本發(fā)明所述的取代基取代，本發(fā)明所述的取代基包括，但不限于D、F、Cl、Br、I、N3、-CN、-NO2、-NH2、-OH、-SH、-COOH、-CONH2、-C(＝O)NHCH3、-C(＝O)N(CH3)2、-C(＝O)-烷基、-C(＝O)-烷氧基、烷基、烯基、炔基、鹵代烷基、烷氧基、鹵代烷氧基、烷硫基、烷氨基、羥基取代的烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基等等。
[0085] 一般而言，術(shù)語“取代的”表示所給結(jié)構(gòu)或基團(tuán)中的一個(gè)或多個(gè)氫原子被具體取代基所取代。除非其他方面表明，一個(gè)取代基可以在基團(tuán)各個(gè)可取代的合理的位置進(jìn)行取代。當(dāng)所給出的結(jié)構(gòu)式中不止一個(gè)位置能被選自的一個(gè)或多個(gè)具體取代基所取代，那么取代基
可以相同或不同地在結(jié)構(gòu)式中各個(gè)合理的位置進(jìn)行取代。
[0086] 另外，需要說明的是，除非以其他方式明確指出，在本發(fā)明中所采用的描述方式“各…獨(dú)立地為”與“…各自獨(dú)立地為”和“…獨(dú)立地為”可以互換，均應(yīng)做廣義理解，其既可以是指在不同基團(tuán)中，相同符號之間所表達(dá)的具體選項(xiàng)之間互相不影響，也可以表示在相
同的基團(tuán)中，相同符號之間所表達(dá)的具體選項(xiàng)之間互相不影響。
[0087] 本發(fā)明所使用的術(shù)語“受試對象”是指動(dòng)物。典型地所述動(dòng)物是哺乳動(dòng)物。受試對象，例如也指靈長類動(dòng)物(例如人類，男性或女性)、牛、綿羊、山羊、馬、犬、貓、兔、大鼠、小鼠、魚、鳥等。在某些實(shí)施方案中，所述受試對象是靈長類動(dòng)物。在其他實(shí)施方案中，所述受試對象是人。
[0088] 本發(fā)明所使用的術(shù)語“患者”是指人(包括成人和兒童)或者其他動(dòng)物。在一些實(shí)施方案中，“患者”是指人。
[0089] 術(shù)語“包含”為開放式表達(dá)，即包括本發(fā)明所指明的內(nèi)容，但并不排除其他方面的內(nèi)容。
[0090] 在本說明書的各部分，本發(fā)明公開化合物的取代基按照基團(tuán)種類或范圍公開。特別指出，本發(fā)明包括這些基團(tuán)種類和范圍的各個(gè)成員的每一個(gè)獨(dú)立的次級組合。例如，術(shù)語“C1-C6烷基”特別指獨(dú)立公開的甲基、乙基、C3烷基、C4烷基、C5烷基和C6烷基。
[0091] 術(shù)語“D”表示單個(gè)氘原子。
[0092] 術(shù)語“鹵素”和“鹵代”在本發(fā)明中可互換使用，是指氟(F)、氯(Cl)、溴(Br)或碘(I)。
[0093] 本發(fā)明使用的術(shù)語“烷基”或“烷基基團(tuán)”，表示含有1-20個(gè)碳原子，飽和的直鏈或支鏈一價(jià)烴基基團(tuán)，其中，所述烷基基團(tuán)可以任選地被一個(gè)或多個(gè)本發(fā)明描述的取代基所取代。在一實(shí)施方案中，烷基基團(tuán)含有1-6個(gè)碳原子；在另一實(shí)施方案中，烷基基團(tuán)含有1-4個(gè)碳原子；還在一實(shí)施方案中，烷基基團(tuán)含有1-3個(gè)碳原子。烷基基團(tuán)的實(shí)例包含，但并不限于，甲基(Me、-CH3)，乙基(Et、-CH2CH3)，正丙基(n-Pr、-CH2CH2CH3)，異丙基(i-Pr、-CH(CH3)2)，正丁基(n-Bu、-CH2CH2CH2CH3)，異丁基(i-Bu、-CH2CH(CH3)2)，仲丁基(s-Bu、-CH(CH3)CH2CH3)，叔丁基(t-Bu、-C(CH3)3)，等等。
[0094] 術(shù)語“烯基”表示含有2-12個(gè)碳原子的直鏈或支鏈一價(jià)烴基，其中至少有一個(gè)不飽2
和位點(diǎn)，即有一個(gè)碳-碳sp雙鍵，其中，所述烯基基團(tuán)可以任選地被一個(gè)或多個(gè)本發(fā)明所描述的取代基所取代，其包括“cis”和“trans”的定位，或者“E”和“Z”的定位。在一實(shí)施方案中，烯基基團(tuán)包含2-8個(gè)碳原子；在另一實(shí)施方案中，烯基基團(tuán)包含2-6個(gè)碳原子；在又一實(shí)施方案中，烯基基團(tuán)包含2-4個(gè)碳原子。烯基基團(tuán)的實(shí)例包括，但并不限于，乙烯基(-CH＝CH2)、烯丙基(-CH2CH＝CH2)、1-丙烯基(即，丙烯基，-CH＝CH-CH3)，等等。
[0095] 術(shù)語“炔基”表示含有2-12個(gè)碳原子的直鏈或支鏈一價(jià)烴基，其中至少有一個(gè)不飽和位點(diǎn)，即有一個(gè)碳-碳sp三鍵，其中，所述炔基基團(tuán)可以任選地被一個(gè)或多個(gè)本發(fā)明所描述的取代基所取代。在一實(shí)施方案中，炔基基團(tuán)包含2-8個(gè)碳原子；在另一實(shí)施方案中，炔基基團(tuán)包含2-6個(gè)碳原子；在又一實(shí)施方案中，炔基基團(tuán)包含2-4個(gè)碳原子。炔基基團(tuán)的實(shí)例包括，但并不限于，乙炔基(-C≡CH)、炔丙基(-CH2C≡CH)、1-丙炔基(即，丙炔基，-C≡C-CH3)，等等。
[0096] 術(shù)語“烷氧基”表示烷基基團(tuán)通過氧原子與分子其余部分相連，其中烷基基團(tuán)具有如本發(fā)明所述的含義。除非另外詳細(xì)說明，所述烷氧基基團(tuán)含有1-12個(gè)碳原子。在一實(shí)施方案中，烷氧基基團(tuán)含有1-6個(gè)碳原子；在另一實(shí)施方案中，烷氧基基團(tuán)含有1-4個(gè)碳原子；在又一實(shí)施方案中，烷氧基基團(tuán)含有1-3個(gè)碳原子。所述烷氧基基團(tuán)可以任選地被一個(gè)或多個(gè)本發(fā)明描述的取代基所取代。
[0097] 烷氧基基團(tuán)的實(shí)例包括，但并不限于，甲氧基(MeO、-OCH3)，乙氧基(EtO、-OCH2CH3)，1-丙氧基(n-PrO、n-丙氧基、-OCH2CH2CH3)，2-丙氧基(i-PrO、i-丙氧基、-OCH(CH3)2)，1-丁氧基(n-BuO、n-丁氧基、-OCH2CH2CH2CH3)，2-甲基-l-丙氧基(i-BuO、i-丁氧基、-OCH2CH(CH3)2)，2-丁氧基(s-BuO、s-丁氧基、-OCH(CH3)CH2CH3)，2-甲基-2-丙氧基(t-BuO、t-丁氧基、-OC(CH3)3)，等等。
[0098] 術(shù)語“烷硫基”表示烷基基團(tuán)通過硫原子與分子其余部分相連，其中烷基基團(tuán)具有如本發(fā)明所述的含義。除非另外詳細(xì)說明，所述烷硫基基團(tuán)含有1-12個(gè)碳原子。在一實(shí)施方案中，烷硫基基團(tuán)含有1-6個(gè)碳原子；在另一實(shí)施方案中，烷硫基基團(tuán)含有1-4個(gè)碳原子；在又一實(shí)施方案中，烷硫基基團(tuán)含有1-3個(gè)碳原子。所述烷硫基基團(tuán)可以任選地被一個(gè)或多個(gè)本發(fā)明描述的取代基所取代。
[0099] 烷硫基基團(tuán)的實(shí)例包括，但并不限于，甲硫基(MeS、-SCH3)，乙硫基(EtS、-SCH2CH3)，1-丙硫基(n-PrS、n-丙硫基、-SCH2CH2CH3)，2-丙硫基(i-PrS、i-丙硫基、-SCH(CH3)2)，1-丁硫基(n-BuS、n-丁硫基、-SCH2CH2CH2CH3)，2-甲基-l-丙硫基(i-BuS、i-丁硫基、-SCH2CH(CH3)2)，2-丁硫基(s-BuS、s-丁硫基、-SCH(CH3)CH2CH3)，2-甲基-2-丙硫基(t-BuS、t-丁硫基、-SC(CH3)3)，等等。
[0100] 術(shù)語“烷氨基”或“烷基氨基”包括“N-烷基氨基”和“N,N-二烷基氨基”，其中氨基基團(tuán)分別獨(dú)立地被一個(gè)或兩個(gè)烷基基團(tuán)所取代，其中烷基基團(tuán)具有如本發(fā)明所述的含義。合適的烷基氨基基團(tuán)可以是單烷基氨基或二烷基氨基，這樣的實(shí)例包括，但并不限于，N-甲氨基，N-乙氨基，N,N-二甲氨基，N,N-二乙氨基等等。所述烷氨基基團(tuán)任選地被一個(gè)或多個(gè)本發(fā)明所描述的取代基所取代。
[0101] 術(shù)語“羥基取代的烷基”表示烷基基團(tuán)被一個(gè)或多個(gè)羥基所取代，其中烷基基團(tuán)具有如本發(fā)明所述的含義；這樣的實(shí)例包含，但并不限于，羥甲基、2-羥基乙基、2-羥基-1-丙基、3-羥基-1-丙基、2,3-二羥基丙基等等。
[0102] 術(shù)語“鹵代烷基”表示烷基基團(tuán)被一個(gè)或多個(gè)鹵素原子所取代，其中烷基基團(tuán)具有如本發(fā)明所述的含義，這樣的實(shí)例包含，但并不限于，-CF3、-CH2CF3、-CHFCH3、-CH2CH2F、-CF2CH3等。在一實(shí)施方案中，C1-C6鹵代烷基包含氟取代的C1-C6烷基；在另一實(shí)施方案中，C1-C4鹵代烷基包含氟取代的C1-C4烷基；在又一實(shí)施方案中，C1-C2鹵代烷基包含氟取代的C1-C2烷基。
[0103] 術(shù)語“鹵代烷氧基”表示烷氧基基團(tuán)被一個(gè)或多個(gè)鹵素原子所取代，其中烷氧基基團(tuán)具有如本發(fā)明所述的含義，這樣的實(shí)例包含，但并不限于，-OCF3、-OCH2CF3、-OCHFCH3、-OCH2CH2F、-OCF2CH3等。在一實(shí)施方案中，C1-C6鹵代烷氧基包含氟取代的C1-C6烷氧基；在另一實(shí)施方案中，C1-C4鹵代烷氧基包含氟取代的C1-C4烷氧基；在又一實(shí)施方案中，C1-C2鹵代烷氧基包含氟取代的C1-C2烷氧基。
[0104] 術(shù)語“保護(hù)基團(tuán)”或“PG”是指一個(gè)取代基與其他官能團(tuán)起反應(yīng)的時(shí)候，通常用來阻斷或保護(hù)特殊的功能性。例如，“氨基的保護(hù)基團(tuán)”是指一個(gè)取代基與氨基基團(tuán)相連來阻斷或保護(hù)化合物中氨基的功能性，合適的氨基保護(hù)基團(tuán)包括乙?；?，三氟乙酰基，叔丁氧羰基(BOC,Boc)，芐氧羰基(CBZ,Cbz)和9-芴甲氧羰基(Fmoc)。相似地，“羥基保護(hù)基團(tuán)”是指羥基的取代基用來阻斷或保護(hù)羥基的功能性，合適的保護(hù)基團(tuán)包括三烷基甲硅烷基，乙?；郊柞；推S基?！棒然Ｗo(hù)基團(tuán)”是指羧基的取代基用來阻斷或保護(hù)羧基的功能性，一般的羧基保護(hù)基包括-CH2CH2SO2Ph，氰基乙基，2-(三甲基硅烷基)乙基，2-(三甲基硅烷基)乙氧基甲基，2-(對甲苯磺?；?乙基，2-(對硝基苯磺?；?乙基，2-(二苯基膦基)乙基，硝基乙基，等等。對于保護(hù)基團(tuán)一般的描述可參考文獻(xiàn)：Greene?et?al.,Protective?Groups?in?Organic?Synthesis,John?Wiley&Sons,New?York,1991?and?Kocienski?et?al.,Protecting?Groups,Thieme,Stuttgart,2005。
[0105] 本發(fā)明所使用的術(shù)語“前藥”，代表一個(gè)化合物在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為式(I)，(I’)，(II)或(II’)所示的化合物。這樣的轉(zhuǎn)化受前體藥物在血液中水解或在血液或組織中經(jīng)酶轉(zhuǎn)化為母體結(jié)構(gòu)的影響。本發(fā)明前體藥物類化合物可以是酯，在現(xiàn)有的發(fā)明中酯可以作為前體藥
物的有苯酯類，脂肪族(C1-24)酯類，酰氧基甲基酯類，碳酸酯，氨基甲酸酯類和氨基酸酯類。
例如本發(fā)明里的一個(gè)化合物包含羥基，即可以將其?；玫角绑w藥物形式的化合物。其他
的前體藥物形式包括磷酸酯，如這些磷酸酯類化合物是經(jīng)母體上的羥基磷酸化得到的。
[0106] “代謝產(chǎn)物”是指具體的化合物或其鹽在體內(nèi)通過代謝作用所得到的產(chǎn)物。一個(gè)化合物的代謝產(chǎn)物可以通過所屬領(lǐng)域公知的技術(shù)來進(jìn)行鑒定，其活性可以通過如本發(fā)明所描述的那樣采用試驗(yàn)的方法進(jìn)行表征。這樣的產(chǎn)物可以是通過給藥化合物經(jīng)過氧化，還原，水解，酰氨化，脫酰氨作用，酯化，脫脂作用，酶裂解等等方法得到。相應(yīng)地，本發(fā)明包括化合物的代謝產(chǎn)物，包括將本發(fā)明的化合物與哺乳動(dòng)物充分接觸一段時(shí)間所產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物。
[0107] 本發(fā)明所使用的“藥學(xué)上可接受的鹽”是指本發(fā)明的化合物的有機(jī)鹽和無機(jī)鹽。藥學(xué)上可接受的鹽在所屬領(lǐng)域是為我們所熟知的，如文獻(xiàn)：S.M.Berge?et?al.,describe?pharmaceutically?acceptable?salts?in?detail?in?J.Pharmaceutical?Sciences,
1977,66:1-19.所記載的。藥學(xué)上可接受的無毒的酸形成的鹽包括，但并不限于，與氨基基團(tuán)反應(yīng)形成的無機(jī)酸鹽有鹽酸鹽，氫溴酸鹽，磷酸鹽，硫酸鹽，高氯酸鹽，和有機(jī)酸鹽如乙酸鹽，草酸鹽，馬來酸鹽，酒石酸鹽，檸檬酸鹽，琥珀酸鹽，丙二酸鹽，或通過書籍文獻(xiàn)上所記載的其他方法如離子交換法來得到這些鹽。其他藥學(xué)上可接受的鹽包括己二酸鹽，藻酸鹽，抗壞血酸鹽，天冬氨酸鹽，苯磺酸鹽，苯甲酸鹽，重硫酸鹽，硼酸鹽，丁酸鹽，樟腦酸鹽，樟腦磺酸鹽，環(huán)戊基丙酸鹽，二葡萄糖酸鹽，十二烷基硫酸鹽，乙磺酸鹽，甲酸鹽，反丁烯二酸鹽，葡庚糖酸鹽，甘油磷酸鹽，葡萄糖酸鹽，半硫酸鹽，庚酸鹽，己酸鹽，氫碘酸鹽，2-羥基-乙磺酸鹽，乳糖醛酸鹽，乳酸鹽，月桂酸鹽，月桂基硫酸鹽，蘋果酸鹽，丙二酸鹽，甲磺酸鹽，2-萘磺酸鹽，煙酸鹽，硝酸鹽，油酸鹽，棕櫚酸鹽，撲酸鹽，果膠酸鹽，過硫酸鹽，3-苯基丙酸鹽，苦味酸鹽，特戊酸鹽，丙酸鹽，硬脂酸鹽，硫氰酸鹽，對甲苯磺酸鹽，十一酸鹽，戊酸鹽，等等。通過適當(dāng)?shù)膲A得到的鹽包括堿金屬，堿土金屬，銨和N+(C1-4烷基)4的鹽。本發(fā)明也擬構(gòu)思了任何所包含N的基團(tuán)的化合物所形成的季銨鹽。水溶性或油溶性或分散產(chǎn)物可以通過季銨化作
用得到。堿金屬或堿土金屬鹽包括鈉，鋰，鉀，鈣，鎂，等等。藥學(xué)上可接受的鹽進(jìn)一步包括適當(dāng)?shù)?、無毒的銨，季銨鹽和抗平衡離子形成的胺陽離子，如鹵化物，氫氧化物，羧化物，硫酸化物，磷酸化物，硝酸化物，C1-C8磺酸化物和芳香磺酸化物。
[0108] 本發(fā)明的“溶劑化物”是指一個(gè)或多個(gè)溶劑分子與本發(fā)明的化合物所形成的締合物。形成溶劑化物的溶劑包括，但并不限于，水，異丙醇，乙醇，甲醇，二甲亞砜，乙酸乙酯，乙酸、乙醇胺或其混合物。術(shù)語“水合物”是指溶劑分子是水所形成的締合物。
[0109] 當(dāng)所述溶劑為水時(shí)，可以使用術(shù)語“水合物”。在一實(shí)施方案中，一個(gè)本發(fā)明化合物分子可以與一個(gè)水分子相結(jié)合，比如一水合物；在另一實(shí)施方案中，一個(gè)本發(fā)明化合物分子可以與多于一個(gè)的水分子相結(jié)合，比如二水合物；在又一實(shí)施方案中，一個(gè)本發(fā)明化合物分子可以與少于一個(gè)的水分子相結(jié)合，比如半水合物。應(yīng)注意，本發(fā)明所述的水合物保留有非水合形式的所述化合物的生物有效性。
[0110] 術(shù)語“治療”任何疾病或病癥，在其中一些實(shí)施方案中指改善疾病或病癥(即減緩或阻止或減輕疾病或其至少一種臨床癥狀的發(fā)展)。在另一些實(shí)施方案中，“治療”指緩和或改善至少一種身體參數(shù)，包括可能不為患者所察覺的身體參數(shù)。在另一些實(shí)施方案中，“治療”指從身體上(例如穩(wěn)定可察覺的癥狀)或生理學(xué)上(例如穩(wěn)定身體的參數(shù))或上述兩方面
調(diào)節(jié)疾病或病癥。在另一些實(shí)施方案中，“治療”指預(yù)防或延遲疾病或病癥的發(fā)作、發(fā)生或惡化。
[0111] 術(shù)語“防止”或“預(yù)防”指獲病或障礙的風(fēng)險(xiǎn)的減少(即：使疾病的至少一種臨床癥狀在主體內(nèi)停止發(fā)展，該主體可能面對或預(yù)先傾向面對這種疾病，但還沒有經(jīng)歷或表現(xiàn)出疾病的癥狀)。
[0112] 本發(fā)明涉及的亞氨基噻二嗪二氧化物衍生物，其藥學(xué)上可接受的鹽，藥物制劑及其組合物，可以通過抑制BACE-1從而抑制Aβ的產(chǎn)生，對與β-淀粉樣蛋白(“Aβ”)有關(guān)的疾病，特別是阿爾茨海默病的治療有潛在的用途。
[0113] 除非另作說明，本發(fā)明的化合物所有合適的同位素變化、立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、溶劑化物、代謝產(chǎn)物、鹽和藥學(xué)上可接受的前藥都包含在本發(fā)明范圍內(nèi)。
[0114] 在本發(fā)明公開的結(jié)構(gòu)中，當(dāng)任意特定的手性原子的立體化學(xué)未指明時(shí)，則該結(jié)構(gòu)的所有立體異構(gòu)體都考慮在本發(fā)明之內(nèi)，并且作為本發(fā)明公開化合物包括在本發(fā)明中。當(dāng)
立體化學(xué)被表示特定構(gòu)型的實(shí)楔形線(solid?wedge)或虛線指明時(shí)，則該結(jié)構(gòu)的立體異構(gòu)
體就此明確和定義。
[0115] 本發(fā)明化合物的氮氧化物也包含在本發(fā)明的范圍之內(nèi)?？梢酝ㄟ^在升溫下使用常用氧化劑(例如過氧化氫)，在有例如乙酸的酸存在下，氧化相應(yīng)的含氮堿性物質(zhì)，或者通過在適合的溶劑中與過酸反應(yīng)，例如在二氯甲烷、乙酸乙酯或乙酸甲酯中與過乙酸反應(yīng)，或在氯仿或二氯甲烷中與3-氯過氧苯甲酸反應(yīng)，制備本發(fā)明化合物的氮氧化物。
[0116] 式(I)，(I’)，(II)或(II’)所示化合物可以以鹽的形式存在。在一實(shí)施方案中，所述鹽是指藥學(xué)上可接受的鹽。術(shù)語“藥學(xué)上可接受的”是指物質(zhì)或組合物必須與包含制劑的其它成分和/或用其治療的哺乳動(dòng)物化學(xué)上和/或毒理學(xué)上相容。在另一實(shí)施方案中，所述鹽不一定是藥學(xué)上可接受的鹽，可以是用于制備和/或提純式(I)，(I’)，(II)或(II’)所示化合物和/或用于分離本式(I)，(I’)，(II)或(II’)所示化合物的對映體的中間體。
[0117] 本發(fā)明的可藥用鹽可以用常規(guī)化學(xué)方法由母體化合物、堿性或酸性部分來合成。一般而言，該類鹽可以通過使這些化合物的游離酸形式與化學(xué)計(jì)量量的適宜堿(如Na、Ca、Mg或K的氫氧化物、碳酸鹽、碳酸氫鹽等)反應(yīng)，或者通過使這些化合物的游離堿形式與化學(xué)計(jì)量量的適宜酸反應(yīng)來進(jìn)行制備。該類反應(yīng)通常在水或有機(jī)溶劑或二者的混合物中進(jìn)行。
一般地，在適當(dāng)?shù)那闆r中，需要使用非水性介質(zhì)如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或乙腈。在例如“Remington′s?Pharmaceutical?Sciences”，第20版，Mack?Publishing?Company,
Easton,Pa.,(1985)；和“藥用鹽手冊：性質(zhì)、選擇和應(yīng)用(Handbook?of?Pharmaceutical?Salts:Properties,Selection,and?Use)”,Stahl?and?Wermuth(Wiley-VCH，Weinheim，
Germany，2002)中可找到另外一些適宜鹽的列表。
[0118] 本發(fā)明給出的任何結(jié)構(gòu)式也意欲表示這些化合物未被同位素富集的形式以及同位素富集的形式。同位素富集的化合物具有本發(fā)明給出的通式描繪的結(jié)構(gòu)，除了一個(gè)或多
個(gè)原子被具有所選擇原子量或質(zhì)量數(shù)的原子替換?？梢氡景l(fā)明化合物中的示例性同位素
包括氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟和氯的同位素，如2H、3H、11C、13C、14C、15N、17O、18O、18F、31P、32P、
35S、36Cl和125I。
[0119] 另一方面，本發(fā)明涉及制備式(I)，(I’)，(II)或(II’)所示化合物的中間體。
[0120] 另一方面，本發(fā)明提供一種藥物組合物，所述藥物組合物包含本發(fā)明化合物。在一實(shí)施方案中，本發(fā)明所述藥物組合物，更進(jìn)一步包括藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑、佐劑、溶媒或它們的組合。在另一實(shí)施方案中，藥物組合物可以是液體、固體、半固體、凝膠或噴霧劑型。
[0121] 本發(fā)明化合物的藥物組合物、制劑和給藥
[0122] 本發(fā)明提供一種藥物組合物，包括式(I)，(I’)，(II)或(II’)所示化合物或其單獨(dú)的立體異構(gòu)體，異構(gòu)體的外消旋或非外消旋混合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，所述藥物組合物進(jìn)一步包含至少一種藥學(xué)上可接受的載體、輔
劑或賦形劑，以及任選地，其它的治療和/或預(yù)防成分。
[0123] 合適的載體、輔劑和賦形劑對于本領(lǐng)域技術(shù)人員是熟知的并且詳細(xì)描述于例如Ansel?H.C.et?al.,Ansel’s?Pharmaceutical?Dosage?Forms?and?Drug?Delivery?
Systems(2004)Lippincott,Williams&Wilkins,Philadelphia；Gennaro?A.R.et?al.,
Remington：The?Science?and?Practice?of?Pharmacy(2000)Lippincott,Williams&
Wilkins,Philadelphia；和Rowe?R.C.,Handbook?of?Pharmaceutical?Excipients(2005)
Pharmaceutical?Press,Chicago中。
[0124] 包含本發(fā)明化合物或藥物組合物給藥的治療方法，進(jìn)一步包括對患者進(jìn)行附加治療劑(聯(lián)合治療)的給藥，其中附加治療劑為納美芬、利培酮、卡巴拉汀、美金剛、米他扎平、文拉法辛、去郁敏、去甲替林、唑吡坦、佐匹克隆、尼麥角林、吡拉西坦、司來吉蘭、己酮可可堿、他克林，多奈哌齊，加蘭他敏，利凡斯的明，維他命E、貝特類，煙堿酸，煙堿樣受體激動(dòng)劑，煙堿乙酰膽堿受體激動(dòng)劑，膽堿酯酶抑制劑，N-甲基-D-天冬氨酸受體拮抗劑，α分泌酶活性的促進(jìn)劑，糖原合成酶激酶β抑制劑，淀粉樣蛋白聚集的抑制劑，γ分泌酶抑制劑，γ分泌酶調(diào)節(jié)劑，組胺H3拮抗劑，組蛋白脫乙?；敢种苿?，PDE-4抑制劑，PDE-10抑制劑，
mGluR1受體調(diào)節(jié)劑或拮抗劑，mGluR5受體調(diào)節(jié)劑或拮抗劑，mGluR2/3拮抗劑，5-HT4激動(dòng)劑，
5-HT6受體拮抗劑和GABAA反向激動(dòng)劑或它們的任意組合。
[0125] 本發(fā)明所用“藥學(xué)上可接受的賦形劑”意指與給藥劑型或藥物組合物一致性相關(guān)的藥學(xué)上可接受的材料，混合物或溶媒。每種賦形劑在混合時(shí)必須與藥物組合物的其它成
分相容，以避免對患者給藥時(shí)會(huì)大大降低本發(fā)明公開化合物的功效的相互作用和會(huì)導(dǎo)致不
是藥學(xué)上可接受的藥物組合物的相互作用。此外，每種賦形劑必須是藥學(xué)上可接受的，例
如，具有足夠高的純度。
[0126] 合適的藥學(xué)上可接受的賦形劑會(huì)依所選具體劑型而不同。此外，可根據(jù)它們在組合物中的特定功能來選擇藥學(xué)上可接受的賦形劑。例如，可選擇能有助于生產(chǎn)均一劑型的
某些藥學(xué)上可接受的賦形劑。可選擇能有助于生產(chǎn)穩(wěn)定劑型的某些藥學(xué)上可接受的賦形
劑?？蛇x擇對患者給藥時(shí)有助于攜帶或運(yùn)輸本發(fā)明化合物從身體的一個(gè)器官或部分到身體
的另一個(gè)器官或部分的某些藥學(xué)上可接受的賦形劑?？蛇x擇增強(qiáng)患者依從性的某些藥學(xué)上
可接受的賦形劑。
[0127] 合適的藥學(xué)上可接受的賦形劑包括以下類型的賦形劑：稀釋劑、填充劑、粘合劑、崩解劑、潤滑劑、助流劑、造粒劑、包衣劑、潤濕劑、溶劑、共溶劑、助懸劑、乳化劑、甜味劑、矯味劑、掩味劑、著色劑、防結(jié)塊劑、保濕劑、螯合劑、塑化劑、增粘劑、抗氧化劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、表面活性劑和緩沖劑。技術(shù)人員可認(rèn)識(shí)到，某些藥學(xué)上可接受的賦形劑可提供不止一種功能，并提供可供選擇的功能，這取決于制劑中存在多少該賦形劑和制劑中存在哪些其他賦形劑。
[0128] 技術(shù)人員掌握本領(lǐng)域的知識(shí)和技能，以使他們能選擇用于本發(fā)明的適當(dāng)量的合適的藥學(xué)上可接受的賦形劑。此外，存在大量技術(shù)人員可獲得的資源，他們描述藥學(xué)上可接受的賦形劑，并用于選擇合適的藥學(xué)上可接受的賦形劑。實(shí)例包括Remington's?
Pharmaceutical?Sciences(Mack?Publishing?Company),The? Handbook?of?
Pharmaceutical?Additives(Gower?Publishing?Limited),and?The?Handbook?of?
Pharmaceutical?Excipients(the?American?Pharmaceutical?Association?and?the?
Pharmaceutical?Press)。
[0129] 為了用本發(fā)明所描述的化合物來制備藥物組合物，藥學(xué)上可接受的載體可以是固體或液體載體。固體形式制劑包括粉劑，片劑，可分散的顆粒劑，膠囊劑，扁囊劑和栓劑。粉劑和片劑可以包含大約5至大約95％的活性組分。合適的固體載體在本領(lǐng)域是已知的，例
如，碳酸鎂，硬脂酸鎂，滑石粉，糖或乳糖。片劑、粉劑、扁囊劑和膠囊劑可以用作適合與口服的固體劑型。制備各種組合物的可藥用載體和方法的例子可以在下列中得到：A.Gennaro
(ed.),Remington's?Pharmaceutical?Sciences,18th?ed.,1990,Mack?Publishing?
Company?Co.,Easton,Pennsylvania。
[0130] 在Remington:The?Science?and?Practice?of?Pharmacy,21st?edition,2005,ed.D.B.Troy,Lippincott?Williams&Wilkins,Philadelphia,and?Encyclopedia?of?
Pharmaceutical?Technology,eds.J.Swarbrick?and?J.C.Boylan,1988-1999,Marcel?
Dekker,New?York中披露了用于配置藥學(xué)上可接受的組合物的各種載體，和用于其制備的
公知技術(shù)，這些文獻(xiàn)各自的內(nèi)容通過引用并入本發(fā)明。除任何諸如因產(chǎn)生任何不期望的生
物作用，或以有害方式與藥學(xué)上可接受組合物中的任何其它成分發(fā)生相互作用而與本發(fā)明
化合物不相容的任何常用載體外，關(guān)注其應(yīng)用屬于本發(fā)明的范圍。
[0131] 本發(fā)明公開的藥物組合物使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的技術(shù)和方法來制備。本領(lǐng)域一些常用方法的描述可參見Remington's?Pharmaceutical?Sciences(Mack?Publishing?
Company)。
[0132] 因此，另一方面，本發(fā)明涉及制備藥物組合物的工藝，所述藥物組合物包含本發(fā)明公開化合物和藥學(xué)上可接受的賦形劑，載體，輔劑，溶媒或它們的組合，該工藝包括混合各種成分。包含本發(fā)明公開化合物的藥物組合物，可以在例如環(huán)境溫度和大氣壓下混合來制備。
[0133] 本發(fā)明公開的化合物通常被配制成適合于通過所需途徑對患者給藥的劑型。例如，劑型包括那些適合于以下給藥途徑的劑型：(1)口服給藥，例如片劑、膠囊劑、囊片劑、丸劑、含片劑、粉劑、糖漿劑、酏劑、混懸劑、溶液劑、乳劑、香包劑和扁囊劑；(2)胃腸外給藥，例如無菌溶液劑、混懸劑和復(fù)溶粉末；(3)透皮給藥，例如透皮貼片劑；(4)直腸給藥，例如栓劑；(5)吸入，例如氣霧劑、溶液劑和干粉劑；和(6)局部給藥，例如乳膏劑、油膏劑、洗劑、溶液劑、糊劑、噴霧劑、泡沫劑和凝膠劑。
[0134] 也應(yīng)認(rèn)識(shí)到，本發(fā)明的某些化合物可以以游離形式存在用于治療，或者如果適當(dāng)可以以其藥學(xué)上可接受的衍生物的形式存在。藥學(xué)上可接受衍生物的一些非限制性的實(shí)施
方案包括藥學(xué)上可接受的前藥，鹽，酯，這些酯的鹽，或者對有需要的患者給藥時(shí)能直接或間接提供本發(fā)明所述化合物或其代謝產(chǎn)物或殘留物的任何另外的加合物或衍生物。
[0135] 在一實(shí)施方案中，本發(fā)明公開的化合物可以配制成口服劑型。在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明公開的化合物可以配制成吸入劑型。在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明公開的化合物可以配制成經(jīng)鼻給藥劑型。在又一實(shí)施方案中，本發(fā)明公開的化合物可以配制成透皮給藥劑型。
還在一實(shí)施方案中，本發(fā)明公開的化合物可以配制成局部給藥劑型。
[0136] 本發(fā)明提供的藥物組合物可以以壓制片、研制片、可咀嚼錠劑、速溶片、復(fù)壓片、或腸溶片、糖衣或薄膜衣片來提供。腸溶片是用能抗胃酸作用但在腸中溶解或崩解的物質(zhì)包衣的壓制片，從而防止了活性成分接觸胃的酸性環(huán)境。腸包衣包括，但不限于，脂肪酸、脂肪、水楊酸苯酯、蠟、紫膠、氨化紫膠和鄰苯二甲酸乙酸纖維素酯。糖衣片為糖衣包圍的壓制片，其可利于掩蓋令人不愉快的味道或氣味并且能防止片劑氧化。薄膜包衣片為用水溶性
物質(zhì)的薄層或薄膜覆蓋的壓制片。薄膜包衣包括，但不限于，羥乙基纖維素、羧甲基纖維素鈉、聚乙二醇4000和鄰苯二甲酸乙酸纖維素酯。薄膜包衣賦有和糖包衣相同的一般特性。復(fù)壓片為經(jīng)過超過一個(gè)壓縮周期制備的壓制片，包括多層片、和壓制包衣或干包衣片。
[0137] 片劑劑型可以由呈粉末、結(jié)晶或顆粒狀的活性成分單獨(dú)的或與本發(fā)明描述的一種或多種載體或賦形劑組合來制備，所述載體和賦形劑包括粘合劑、崩解劑、控釋聚合物、潤滑劑、稀釋劑和/或著色劑。增香劑和甜味劑在形成咀嚼片和錠劑時(shí)特別有用。
[0138] 本發(fā)明提供的藥物組合物可以以軟膠囊或硬膠囊來提供，其可以由明膠、甲基纖維素、淀粉或海藻酸鈣來制備。所述硬明膠膠囊也稱為干填充膠囊(DFC)，由兩段組成，一段塞入另一段中，因此完全包封了活性成分。軟彈性膠囊(SEC)是軟的、球形殼，比如明膠殼，其通過加入甘油、山梨醇或類似的多元醇塑化。軟明膠殼可以包含防腐劑來預(yù)防微生物生
長。合適的防腐劑為如本發(fā)明所述的那些，包括尼泊金甲酯和尼泊金丙酯，以及山梨酸。本發(fā)明提供的液體、半固體和固體劑型可以包囊在膠囊中。合適的液體和半固體劑型包括在
碳酸丙烯酯、植物油或甘油三酯中的溶液和混懸劑。包含這樣的溶液的膠囊可以如在美國
專利U.S.Pat.Nos.4,328,245；4,409,239和4,410,545中描述的來制備。所述膠囊也可以采用如本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的涂層，從而改善或維持活性成分的溶出。
[0139] 本發(fā)明提供的藥物組合物可以以液體和半固體劑型來提供，包括乳劑、溶液、混懸劑、酏劑和糖漿劑。乳劑為二相系統(tǒng)，其中一種液體以小球形式完全分散在另一種液體中，其可以是水包油型或油包水型。乳劑可以包括藥學(xué)上可接受的非水液體和溶劑、乳化劑和防腐劑?；鞈覄┛梢园ㄋ帉W(xué)上可接受的助懸劑和防腐劑。含水醇溶液可以包括藥學(xué)上可
接受的縮醛，比如低級烷基醛的二(低級烷基)縮醛，例如乙醛二乙基縮醛；和具有一個(gè)或多個(gè)羥基的水溶性溶劑，比如丙二醇和乙醇。酏劑是透明的、甜味的水醇溶液。糖漿劑是濃的糖例如蔗糖的水溶液，并且還可以包含防腐劑。對于液體劑型，例如，在聚乙二醇中的溶液可以用足量的藥學(xué)上可接受的液體載體例如水稀釋，以精確方便地給藥。
[0140] 本發(fā)明提供的藥物組合物可以配制成適于對患者吸入給藥的任何劑型，例如干粉劑、氣霧劑、混懸劑或溶液組合物。在一實(shí)施方案中，本發(fā)明所公開的藥物組合物可以配制成適于用干粉劑對患者吸入給藥的劑型。在又一實(shí)施方案中，本發(fā)明所公開的藥物組合物
可以配制成適于通過噴霧器對患者吸入給藥的劑型。通過吸入遞送至肺的干粉組合物通常
包含精細(xì)粉末狀的本發(fā)明所公開的化合物和一種或多種精細(xì)粉末狀的藥學(xué)上可接受的賦
形劑。特別適合用作干粉劑的藥學(xué)上可接受的賦形劑為本領(lǐng)域技術(shù)人員所知曉，其包括乳
糖、淀粉、甘露醇、和單-、二-和多糖。精細(xì)粉末可通過例如微粉化和研磨制備得到。一般來說，尺寸減小的(如微粉化的)化合物可以通過約1至10微米的D50值(例如，用激光衍射法測量的)來定義。
[0141] 適合于透皮給藥的藥物組合物可制備成不連續(xù)的貼片劑，意在與患者的表皮保持緊密接觸一段延長的時(shí)間。例如，可通過離子滲透從貼片劑中遞送活性成分，如
Pharmaceutical?Research,3(6),318(1986)中的一般描述。
[0142] 適合于局部給藥的藥物組合物可以被配制成油膏劑、乳膏劑、混懸劑、洗劑、粉劑、溶液劑、糊劑、凝膠劑、噴霧劑、氣霧劑或油劑。例如，油膏劑、乳膏劑和凝膠劑可以用水或油基質(zhì)，和適合的增稠劑和/或凝膠劑和/或溶劑來配置。這樣的基質(zhì)可以包括，水，和/或油例如液體石蠟和植物油(例如花生油或蓖麻油)，或溶劑例如聚乙二醇。根據(jù)基質(zhì)性質(zhì)使用的增稠劑和凝膠劑包括軟石蠟、硬脂酸鋁、鯨蠟硬脂醇、聚乙二醇、羊毛脂、蜂蠟、聚羧乙烯和纖維素衍生物，和/或單硬脂酸甘油脂和/或非離子型乳化劑。
[0143] 本發(fā)明化合物也可以與作為靶向藥物載體的可溶性聚合物結(jié)合。這樣的聚合物包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羥丙基甲基丙烯酰胺-苯酚、聚羥乙基天冬酰胺苯酚或棕櫚酰殘基取代的聚氧乙烯聚賴氨酸。此外，本發(fā)明所公開的化合物可以與在實(shí)現(xiàn)藥物的
控制釋放中使用的一類生物可降解的聚合物結(jié)合，例如，聚乳酸、聚ε-己內(nèi)酯、聚羥基丁酸、聚原酸酯、聚縮醛、聚二氫吡喃、聚氰基丙烯酸酯和水凝膠的交聯(lián)或兩親嵌段共聚物。
[0144] 本發(fā)明提供的藥物組合物可以通過注射、輸注或植入腸胃外給藥，用于局部或全身給藥。如本發(fā)明使用的腸胃外給藥包括靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、鞘內(nèi)、心室內(nèi)、尿道內(nèi)、胸骨內(nèi)、顱內(nèi)、肌內(nèi)、滑膜內(nèi)和皮下給藥。
[0145] 本發(fā)明提供的藥物組合物可以配制成適于腸胃外給藥的任何劑型，包括溶液、混懸劑、乳劑、膠束、脂質(zhì)體、微球、納米體系和適于在注射前在液體中制成溶液或混懸液的固體形式。這樣的劑型可以根據(jù)藥物科學(xué)領(lǐng)域的技術(shù)人員已知的常規(guī)方法來制備(參見
Remington:The?Science和Practice?of?Pharmacy,同上)。
[0146] 預(yù)期用于腸胃外給藥的藥物組合物可以包括一種或多種藥學(xué)上可接受的載體和賦形劑，包括，但不限于，含水運(yùn)載體、水混溶性運(yùn)載體、非水運(yùn)載體、抗微生物劑或抗微生物生長的防腐劑、穩(wěn)定劑、溶解增強(qiáng)劑、等滲劑、緩沖劑、抗氧劑、局部麻醉劑、助懸劑和分散劑、濕潤劑或乳化劑、絡(luò)合劑、多價(jià)螯合劑或螯合劑、防凍劑、冷凍保護(hù)劑、增稠劑、pH調(diào)節(jié)劑和惰性氣體。
[0147] 本發(fā)明提供的藥物組合物可以通過直腸栓劑給藥，通過將藥物與合適的無刺激性的賦形劑(如可可油，聚乙烯乙二醇合成的甘油酯)混合，常溫下為固體，然后在直腸腔內(nèi)液化或溶解釋放藥物。由于個(gè)體差異，癥狀的嚴(yán)重程度會(huì)呈現(xiàn)比較大的變化，而且每種藥都有其獨(dú)特的治療特性，因此，對于每個(gè)個(gè)體的精確的給藥方式，劑型和治療方案都應(yīng)該由執(zhí)業(yè)醫(yī)生來判定。
[0148] 本發(fā)明提供的藥物組合物可以配制成立即或改性釋放劑型，包括延遲-、緩釋-、脈沖-、控制-、靶向-和程序化釋放形式。
[0149] 本文所使用的術(shù)語“治療有效量”是指足以顯示出有益的治療效果的各活性組分的總量。例如，給藥或使體內(nèi)達(dá)到平衡的足以治療、治愈或減輕疾病的癥狀的量。特殊的治療方案所需的有效量依賴于多種因素，包括治療的疾病，疾病的嚴(yán)重程度，使用的特定藥物的活性，給藥方式，特定藥物的清除率，治療持續(xù)時(shí)間，聯(lián)合用藥，年齡，體重，性別，飲食和病人的健康等。本領(lǐng)域關(guān)于“治療有效量”需要考慮的其他因素的描述可參見Gilman?et?
al.,eds.,Goodman?And?Gilman’s:The?Pharmacological?Bases?of?Therapeutics,8th?
th
ed.,Pergamon?Press,1990；Remington's?Pharmaceutical?Sciences,17 ?ed.,Mack?
Publishing?Company,Easton,Pa.,1990。
[0150] 本領(lǐng)域技術(shù)人員(例如，主治醫(yī)師、藥劑師或其他技術(shù)人員)可以容易地確定給予患者的本發(fā)明化合物的合適劑量，并且可以根據(jù)患者健康情況、年齡、體重、給藥頻率、其他活性組分的使用和/或所給予化合物的適應(yīng)癥來改變。本發(fā)明化合物的劑量可以在大約
0.001-500mg/kg體重/天的范圍。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物或所述化合物的可藥用鹽或溶劑化物的劑量大約0.01-25mg/kg體重/天。在另一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)具體應(yīng)用，可以改變或調(diào)節(jié)制劑的單位劑量中的活性化合物的數(shù)量，從大約1mg至大約100mg，優(yōu)選大約
1mg至大約50mg，更優(yōu)選大約1mg至大約25mg。在另一個(gè)實(shí)施方案中，對于口服給藥，建議的典型日給藥方案可以在大約1mg/天至大約500mg/天的范圍，優(yōu)選1mg/天至200mg/天，給予
兩個(gè)至四個(gè)分開劑量。
[0151] 術(shù)語“給藥”指給個(gè)體提供治療有效量的藥物，給藥方式包括口服，舌下，靜脈，皮下，經(jīng)皮，肌內(nèi)，皮內(nèi)，鞘內(nèi)，硬膜上，眼內(nèi)，顱內(nèi)，吸入，直腸，陰道等。給藥劑型包括膏劑，洗劑，片劑，膠囊劑，丸劑，飛散性粉末劑，顆粒劑，栓劑，丹劑，錠劑，注射劑，無菌溶液或非水溶液劑，懸浮劑，乳劑，貼片劑等。活性組分與無毒的藥學(xué)上可接受的載體(如葡萄糖，乳糖，阿拉伯樹膠，明膠，甘露醇，淀粉糊，三硅酸鎂，滑石粉，玉米淀粉，角蛋白，硅膠，土豆淀粉，尿素，右旋糖酐等)復(fù)合。
[0152] 優(yōu)選的給藥途徑會(huì)隨著臨床特征而變化，劑量的變化必須依賴于正在治療的病人的情況，醫(yī)生會(huì)根據(jù)個(gè)體患者來確定合適的劑量。每單位劑量的治療有效量取決于體重，生理機(jī)能和選擇的接種方案。每單位劑量的化合物是指每次給藥時(shí)化合物的重量，不包括載
體的重量(藥物里含有載體)。
[0153] 本發(fā)明提供的藥物組合物可以配制成單劑量或多劑量給藥。所述單劑量制劑被包裝在安瓿劑、小瓶或注射器中。所述多劑量腸胃外制劑必須包含抑菌或抑真菌濃度的抗微
生物劑。所有的腸胃外制劑都必須是無菌的，如本領(lǐng)域已知和實(shí)踐的。
[0154] 本發(fā)明提供的藥物組合物可以與不會(huì)損害預(yù)期的治療作用的其它活性成分共同配制，或者與補(bǔ)充預(yù)期的作用的物質(zhì)共同配制。
[0155] 在一實(shí)施方案中，本發(fā)明的治療方法包括對有需要的患者給予安全有效量的本發(fā)明化合物或包含本發(fā)明化合物的藥物組合物。本發(fā)明各實(shí)施方案包括通過對有需要的患者
給予安全有效量的本發(fā)明化合物或包含本發(fā)明化合物的藥物組合物，來治療本發(fā)明提及的
疾病。
[0156] 在一實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物或包含本發(fā)明化合物的藥物組合物可以通過任何適合的給藥途徑來給藥，包括全身給藥和局部給藥。全身給藥包括口服給藥、胃腸外給藥、透皮給藥和直腸給藥。典型的胃腸外給藥是指通過注射或輸注給藥，包括靜脈內(nèi)、肌內(nèi)和皮下注射或輸注給藥。局部給藥包括施用于皮膚以及眼內(nèi)、耳、陰道內(nèi)、吸入和鼻內(nèi)給藥。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物或包含本發(fā)明化合物的藥物組合物可以是口服給藥。在另一
實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物或包含本發(fā)明化合物的藥物組合物可以是吸入給藥。還在一實(shí)
施方案中，本發(fā)明化合物或包含本發(fā)明化合物的藥物組合物可以是經(jīng)鼻內(nèi)給藥。
[0157] 在一實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物或包含本發(fā)明化合物的藥物組合物可以一次性給藥，或者根據(jù)給藥方案，在指定時(shí)間段內(nèi)，在不同的時(shí)間間隔給藥若干次。例如，每天給藥一次、兩次、三次或四次。在一實(shí)施方案中，每天給藥一次。在又一實(shí)施方案中，每天給藥兩次。
可以給藥直至達(dá)到想要的治療效果或無限期地維持想要的治療效果。本發(fā)明化合物或包含
本發(fā)明化合物的藥物組合物的合適給藥方案取決于該化合物的藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)，例如吸
收、分布和半衰期，這些可以由技術(shù)人員測定。此外，本發(fā)明化合物或包含本發(fā)明化合物的藥物組合物的合適給藥方案，包括實(shí)施該方案的持續(xù)時(shí)間，取決于被治療的疾病，被治療疾病的嚴(yán)重程度、被治療患者的年齡和身體狀況、被治療患者的醫(yī)療史、同時(shí)療法的性質(zhì)、想要的治療效果等在技術(shù)人員知識(shí)和經(jīng)驗(yàn)范圍內(nèi)的因素。這樣的技術(shù)人員還應(yīng)該理解，對于
個(gè)體患者對給藥方案的反應(yīng)，或隨著時(shí)間推移個(gè)體患者需要變化時(shí)，可要求調(diào)整適宜的給
藥方案。
[0158] 本發(fā)明化合物可以與一種或多種其它治療劑同時(shí)，或在其之前或之后給藥。本發(fā)明化合物可以與其他治療劑通過相同或不同給藥途徑分別給藥，或與之以同一藥物組合物
形式給藥。這由本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)患者的健康、年齡、體重等身體的實(shí)際情況選擇。如果配制為固定劑量，這種聯(lián)用產(chǎn)品使用本發(fā)明的化合物(在本文所描述的劑量范圍之內(nèi))和其
他藥學(xué)活性劑(在其劑量范圍之內(nèi))。
[0159] 相應(yīng)地，在一個(gè)方面，本發(fā)明包括聯(lián)合用藥，其包括一定數(shù)量的至少一種本發(fā)明的化合物或其可藥用鹽、溶劑化物、酯或前體藥物和有效量的一種或多種上述附加治療劑。
[0160] 此外，本發(fā)明化合物可以以前藥形式給藥。在本發(fā)明中，本發(fā)明化合物的“前藥”是對患者給藥時(shí)，最終能在體內(nèi)釋放出本發(fā)明化合物的功能性衍生物。以前藥形式給予本發(fā)明化合物時(shí)，本領(lǐng)域技術(shù)人員可實(shí)施下列方式中的一種及以上：(a)變更化合物的體內(nèi)起效時(shí)間；(b)變更化合物的體內(nèi)作用持續(xù)時(shí)間；(c)變更化合物的體內(nèi)輸送或分布；(d)變更化合物的體內(nèi)溶解度；及(e)克服化合物所面臨的副作用或其他難點(diǎn)。用于制備前藥的典型的功能性衍生物，包含在體內(nèi)以化學(xué)方式或酶的方式裂解的化合物的變體。包含制備磷酸鹽、酰胺、酯、硫代酯、碳酸鹽及氨基甲酸鹽的這些變體對本領(lǐng)域技術(shù)人員來講是眾所周知的。
[0161] 本發(fā)明化合物和藥物組合物的用途
[0162] 本發(fā)明提供的化合物和藥物組合物可用于制備通過抑制BACE-1從而抑制Aβ的產(chǎn)生的藥品，也可以用于制備用于治療與β-淀粉樣蛋白(“Aβ”)有關(guān)的疾病，特別是阿爾茨海默病的藥品。
[0163] 具體而言，本發(fā)明的化合物或藥物組合物中化合物的量可以有效地可探測地選擇性地通過抑制BACE-1從而抑制Aβ的產(chǎn)生。
[0164] 本發(fā)明的化合物可以應(yīng)用于，但絕不限于，使用本發(fā)明的化合物或藥物組合物的有效量對患者給藥來預(yù)防、治療或減輕與β-淀粉樣蛋白(“Aβ”)有關(guān)的疾病。所述與β-淀粉樣蛋白(“Aβ”)有關(guān)的疾病，進(jìn)一步包括但并不限于，癡呆，老年癡呆，與阿爾茨海默病、帕金森病和/或唐氏綜合征相關(guān)的癡呆，唐氏綜合征，注意力缺陷癥狀，與阿爾茨海默病、帕金森病和/或唐氏綜合征相關(guān)的注意力缺陷癥狀，記憶喪失，與帕金森病相關(guān)的記憶喪失，與阿爾茨海默病相關(guān)的記憶喪失，中風(fēng)，神經(jīng)變性，淀粉樣變性，β-淀粉樣血管病，大腦淀粉樣血管病，遺傳性腦出血，血液透析并發(fā)癥(源于β2小球蛋白，并由此在血液透析患者中產(chǎn)生并發(fā)癥)，青光眼，II型糖尿病，糖尿病相關(guān)的淀粉狀蛋白生成，創(chuàng)傷性腦損傷(“TBI”)，牛海綿狀腦病，皮質(zhì)基底節(jié)變性，進(jìn)行性核上性麻痹，小膠質(zhì)細(xì)胞增生和腦炎癥，早老性癡呆，嗅覺損害，與阿爾茨海默病、帕金森病和/或唐氏綜合征相關(guān)的嗅覺損害，癢病，Creutzfeld-
Jakob疾病，輕微認(rèn)知損害(“MCI”)或阿爾茨海默病。
[0165] 本發(fā)明的化合物及藥物組合物除了對人類治療有益以外，還可應(yīng)用于獸醫(yī)治療寵物、引進(jìn)品種的動(dòng)物和農(nóng)場的動(dòng)物中的哺乳動(dòng)物。另外一些動(dòng)物的實(shí)例包括馬、狗和貓。在此，本發(fā)明的化合物包括其藥學(xué)上可接受的衍生物。
[0166] 一般合成步驟
[0167] 為描述本發(fā)明，以下列出了實(shí)施例。但需要理解，本發(fā)明不限于這些實(shí)施例，只是提供實(shí)踐本發(fā)明的方法。
[0168] 一般地，本發(fā)明的化合物可以通過本發(fā)明所描述的方法制備得到，除非有進(jìn)一步的說明，其中取代基的定義如式(I)，(I’)，(II)或(II’)所示。下面的反應(yīng)方案和實(shí)施例用于進(jìn)一步舉例說明本發(fā)明的內(nèi)容。
[0169] 所屬領(lǐng)域的專業(yè)人員將認(rèn)識(shí)到：本發(fā)明所描述的化學(xué)反應(yīng)可以用來合適地制備許多本發(fā)明的其他化合物，且用于制備本發(fā)明的化合物的其它方法都被認(rèn)為是在本發(fā)明的范
圍之內(nèi)。例如，根據(jù)本發(fā)明那些非例證的化合物的合成可以成功地被所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員
通過修飾方法完成，如適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)干擾基團(tuán)，通過利用其他已知的試劑除了本發(fā)明所描述
的，或?qū)⒎磻?yīng)條件做一些常規(guī)的修改。另外，本發(fā)明所公開的反應(yīng)或已知的反應(yīng)條件也公認(rèn)地適用于本發(fā)明其他化合物的制備。
[0170] 下面所描述的實(shí)施例，除非其他方面表明所有的溫度定為攝氏度。試劑購買于商品供應(yīng)商如Aldrich?Chemical?Company,Arco?Chemical?Company?and?Alfa?Chemical?
Company，使用時(shí)都沒有經(jīng)過進(jìn)一步純化，除非其他方面表明。一般的試劑從汕頭西隴化工廠，廣東光華化學(xué)試劑廠，廣州化學(xué)試劑廠，天津好寓宇化學(xué)品有限公司，天津市福晨化學(xué)試劑廠，武漢鑫華遠(yuǎn)科技發(fā)展有限公司，青島騰龍化學(xué)試劑有限公司，和青島海洋化工廠購買得到。
[0171] 無水四氫呋喃，二氧六環(huán)，甲苯，乙醚是經(jīng)過金屬鈉回流干燥得到。無水二氯甲烷和氯仿是經(jīng)過氫化鈣回流干燥得到。乙酸乙酯，石油醚，正己烷，N,N-二甲基乙酰胺和N,N-二甲基甲酰胺是經(jīng)無水硫酸鈉事先干燥使用。
[0172] 以下反應(yīng)一般是在氮?dú)饣驓鍤?a href='/zhuanli/list-20499-1.html' target='_blank'>正壓下或在無水溶劑上套一干燥管(除非其他方面表明)，反應(yīng)瓶都塞上合適的橡皮塞，底物通過注射器打入。玻璃器皿都是干燥過的。
[0173] 色譜柱是使用硅膠柱。硅膠(300-400目)購于青島海洋化工廠。
[0174] 1H?NMR譜使用Bruker?400MHz或600MHz核磁共振譜儀記錄。1H?NMR譜以CDC13、DMSO-d6、CD3OD或丙酮-d6為溶劑(以ppm為單位)，用TMS(0ppm)或氯仿(7.26ppm)作為參照標(biāo)準(zhǔn)。當(dāng)出現(xiàn)多重峰的時(shí)候，將使用下面的縮寫：s(singlet，單峰)，d(doublet，雙峰)，t(triplet，三重峰)，q(quartet，四重峰)，m(multiplet，多重峰)，br(broadened，寬峰)，brs(broadened?singlet，寬的單峰)，dd(doublet?of?doublets，雙二重峰)，ddd(doublet?of?doublet?of?doublets，雙雙二重峰)，dt(doublet?of?triplets，雙三重峰)，td(triplet?of?doublets，三雙重峰)，tt(triplet?of?triplets，三三重峰)。偶合常數(shù)J，用赫茲(Hz)表示。
[0175] 低分辨率質(zhì)譜(MS)數(shù)據(jù)的測定條件是：Agilent?6120四級桿HPLC-M(柱子型號：Zorbax?SB-C18,2.1x?30mm,3.5微米,6min,流速為0.6mL/min。流動(dòng)相：5％-95％(含0.1％
甲酸的CH3CN)在(含0.1％甲酸的H2O)中的比例，采用電噴霧電離(ESI)，在210nm/254nm下，用UV檢測。
[0176] 純的化合物使用Agilent?1260?pre-HPLC或Calesep?pump?250?pre-HPLC(柱子型號：NOVASEP?50/80mm?DAC)，在210nm/254nm用UV檢測。
[0177] 下面簡寫詞的使用貫穿本發(fā)明：
[0178] CDCl3????????氘代氯仿????????????ng????????????納克
[0179] DMSO????????二甲基亞砜??????????μg????????????微克
[0180] DMSO-d6??????氘代二甲基亞砜??????mg????????????毫克
[0181] CD3OD????????氘代甲醇?????????????g???????????克
[0182] EtOAc、EA????乙酸乙酯?????????????mL、ml???????毫升
[0183] Glycerol?????甘油?????????????????μL、μl???????微升
[0184] KF??????????氟化鉀??????????????nL、nl????????納升
[0185] min?????????分鐘?????????????????PE???????????石油醚(60-90℃)
[0186] h???????????小時(shí)?????????????????RT、rt、r.t.? ?室溫
[0187] mM、mmol/L???毫摩爾每升???????????Boc2O、Boc酸酐?二碳酸二叔丁酯
[0188] μM、μmol/L ?微摩爾每升???????????PIPES????????哌嗪-1,4-二乙磺酸
[0189] nM、nmol/L???納摩爾每升??????? ? ?Tris-HCl?? ??三(羥甲基)氨基甲烷-鹽酸
[0190] M、mol/L?????摩爾每升?????????????mmol?????????毫摩爾
[0191] HATU????????2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯
[0192] 下列合成方案描述了制備本發(fā)明公開化合物的步驟，除非另外說明，其中各R1a、R1b、R1c、R1d、R1e和R5具有本發(fā)明所述的定義。
[0193] 合成方案1
[0194]
[0195] 其中，PMB是指4-甲氧基芐基 Ph是指苯基
[0196] 式(14)所示的化合物可以通過下列過程制備得到：式(1)所示的化合物與式(2)所示化合物反應(yīng)，得到式(3)所示的化合物；然后式(3)所示的化合物與式(4)所示化合物反
應(yīng)，得到式(5)所示的化合物。式(5)所示的化合物脫除保護(hù)基得到式(6)所示的化合物；然后式(6)所示的化合物與苯甲酰異硫氰酸酯反應(yīng)得到式(7)所示的化合物。式(7)所示的化
合物脫除苯甲?；玫绞?8)所示的化合物。式(8)所示的化合物關(guān)環(huán)反應(yīng)得到式(9)所示
的化合物；式(9)所示的化合物上保護(hù)基得到式(10)所示的化合物。式(10)所示的化合物上的硝基被還原得到式(11)所示的化合物。式(11)所示的化合物與式(12)所示的化合物縮合
得到式(13)所示的化合物；式(13)所示的化合物脫除保護(hù)基得到式(14)所示的目標(biāo)產(chǎn)物。
[0197] 以下結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明提供的化合物、藥物組合物及其應(yīng)用進(jìn)行進(jìn)一步說明。實(shí)施例
[0198] 實(shí)施例1(R)-N-(4-氟-3-(3-亞氨基-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二嗪-5-基)苯基)-5-苯基吡啶酰胺的合成
[0199]
[0200] 步驟1)(R,E)-N-(1-(2-氟-5-硝基苯基)亞乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺酰胺的合成
[0201] 將1-(2-氟-5-硝基-苯基)乙酮(5g,27.3mmol)、(R)-(+)-叔丁基亞磺酰胺(3.8g,31mmol)和無水四氫呋喃(25mL)加入到100mL單口圓底燒瓶中，加入鈦酸四乙酯(13.7g,
60.1mmol)，氮?dú)獗Ｗo(hù)下70℃反應(yīng)12小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后冷卻至室溫，將反應(yīng)液倒入水(50mL)中，過濾，濾餅用二氯甲烷洗滌(40mL×2)，合并有機(jī)相，減壓旋干，柱層析分離純化(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝20/1～5/1)得到標(biāo)題化合物為黃色固體(7.1g,91.0％)。
[0202] MS(ESI,pos.ion)m/z:287.2[M+H]+；
[0203] 1H?NMR(600MHz,CDCl3)δ(ppm)8.59-8.51(m,1H),8.31(dd,J＝14.9,12.1Hz,1H),7.30(dd,J＝16.0,6.5Hz,1H),2.81(s,3H),1.33(s,9H).
[0204] 步驟2)(R)-2-((R)-1,1-二甲基乙基亞磺酰氨基)-2-(2-氟-5-硝基苯基)-N-(4-甲氧基芐基)-N-甲基丙烷-1-磺酰胺的合成
[0205] 將N-(4-甲氧基芐基)-N-甲基甲磺酰胺(1.60g,6.98mmol)置于100mL兩口燒瓶中，氮?dú)獗Ｗo(hù)下加入無水四氫呋喃(20mL)，低溫浴-30℃下冷卻10分鐘，然后緩慢加入正丁基鋰(4.5mL,1.6M)，攪拌0.5小時(shí)后緩慢加入(R,E)-N-(1-(2-氟-5-硝基苯基)亞乙基)-2-甲基
丙烷-2-亞磺酰胺(1.00g,3.49mmol,溶于5mL四氫呋喃)，繼續(xù)反應(yīng)0.5小時(shí)。加入飽和氯化
銨水溶液(5mL)淬滅，再加入水(50mL)，乙酸乙酯萃取(100mL×2)，收集有機(jī)相，減壓旋干，柱層析分離純化(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝2/1)得到標(biāo)題化合物為黃色油狀物(0.85g,
47％)。
[0206] MS(ESI,pos.ion)m/z:516.2[M+H]+；
[0207] 1H?NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)8.59(dd,J＝6.8,2.7Hz,1H),8.26(dt,J＝8.4,3.3Hz,1H),7.28(d,J＝6.1Hz,1H),7.23(d,J＝8.3Hz,2H),6.88(d,J＝8.5Hz,2H),6.04(s,
1H),4.32-4.18(m,2H),3.99-3.84(m,2H),3.82(d,J＝6.7Hz,3H),2.81-2.70(m,3H),1.95
(s,3H),1.38(s,9H).
[0208] 步驟3)(R)-2-氨基-2-(2-氟-5-硝基苯基)-N-甲基丙烷-1-磺酰胺的合成
[0209] 在25℃下將(R)-2-((R)-1,1-二甲基乙基亞磺酰氨基)-2-(2-氟-5-硝基苯基)-N-(4-甲氧基芐基)-N-甲基丙烷-1-磺酰胺(5.85g,11.3mmol)、二氯甲烷(90mL)和甲醇(30mL)
加入到500mL單口圓底燒瓶中，加入濃鹽酸(10mL)，繼續(xù)攪拌反應(yīng)1.5小時(shí)；停止反應(yīng)，減壓旋干；然后加入三氟乙酸(15mL)和1,3-二甲氧基苯(10mL)，繼續(xù)攪拌反應(yīng)16小時(shí)；停止反
應(yīng)，加入水(100mL)和乙酸乙酯(100mL)，分液，收集水相，加入碳酸鈉固體調(diào)節(jié)至pH＝10，加入二氯甲烷(100mL)萃取，分液，收集有機(jī)相，減壓旋干，柱層析分離純化(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝40/1)得到標(biāo)題化合物為黃色固體(2.28g,69％)。
[0210] MS(ESI,pos.ion)m/z:292.2[M+H]+；
[0211] 1H?NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)8.66(dd,J＝6.9,2.7Hz,1H),8.27-8.18(m,1H),7.22(dd,J＝10.7,9.2Hz,1H),4.18(t,J＝10.9Hz,1H),3.89(d,J＝14.4Hz,1H),3.46(d,J
＝14.4Hz,1H),2.72(d,J＝5.2Hz,3H),1.67(s,3H).
[0212] 步驟4)(R)-N-((2-(2-氟-5-硝基苯基)-1-(N-甲基氨基磺?；?丙烷-2-基)硫代氨甲酰基)苯甲酰胺的合成
[0213] 在25℃下將(R)-2-氨基-2-(2-氟-5-硝基苯基)-N-甲基丙烷-1-磺酰胺(0.34g,1.17mmol)和二氯甲烷(5mL)加入到100mL單口圓底燒瓶中，滴加苯甲酰異硫氰酸酯
(0.300g,1.84mmol)，繼續(xù)攪拌反應(yīng)10小時(shí)；有機(jī)相減壓旋干，柱層析分離純化(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝2/1)得到標(biāo)題化合物為黃色固體(0.5g,94.3％)。
[0214] MS(ESI,pos.ion)m/z:455.2[M+H]+；
[0215] 1H?NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)11.67(d,J＝37.2Hz,1H),9.01(s,1H),8.30(dd,J＝6.8,2.5Hz,1H),8.25-8.16(m,1H),7.88(d,J＝7.7Hz,2H),7.64(t,J＝7.4Hz,1H),7.52(t,
J＝7.6Hz,2H),7.21(dd,J＝11.1,9.1Hz,1H),4.84(dd,J＝26.0,9.6Hz,2H),3.76(t,J＝
17.6Hz,1H),2.87(d,J＝5.1Hz,3H),2.27(s,3H).
[0216] 步驟5)(R)-2-(2-氟-5-硝基苯基)-N-甲基-2-硫脲丙烷-1-磺酰胺的合成
[0217] 在25℃下將(R)-N-((2-(2-氟-5-硝基苯基)-1-(N-甲基氨基磺酰基)丙烷-2-基)硫代氨甲?；?苯甲酰胺(7.8g,17.2mmol)和甲醇(100mL)加入到500mL單口圓底燒瓶中，加
入碳酸鈉(1.80g,17.0mmol)，繼續(xù)攪拌反應(yīng)0.5小時(shí)。加入氯化銨(1.00g,18.7mmol)，有機(jī)相減壓旋干，柱層析分離純化(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝1/1)得到標(biāo)題化合物為黃色固體
(4.3g,71.5％)。
[0218] MS(ESI,pos.ion)m/z:351.2[M+H]+；
[0219] 1H?NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)8.25-8.16(m,2H),8.07(s,1H),7.46-7.39(m,1H),7.18(s,1H),7.06(d,J＝4.8Hz,1H),4.03(q,J＝7.1Hz,1H),3.82(d,J＝14.1Hz,1H),
2.61(d,J＝4.8Hz,3H),1.96(s,3H).
[0220] 步驟6)(R)-5-(2-氟-5-硝基苯基)-3-亞氨基-2,5-二甲基-1,2,4-噻二嗪1,1-二氧代化物的合成
[0221] 在25℃下將(R)-2-(2-氟-5-硝基苯基)-N-甲基-2-硫脲丙烷-1-磺酰胺(0.5g,1.43mmol)和乙醇(20mL)加入到100mL單口圓底燒瓶中，加入碘甲烷(0.608g,4.28mmol)，繼續(xù)反應(yīng)12小時(shí)。然后升溫至70℃反應(yīng)3小時(shí)，停止反應(yīng)，減壓旋干，加入水(20mL)，乙酸乙酯萃取(50mL)，分液，有機(jī)相減壓旋干，柱層析分離純化(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝40/1)得到標(biāo)題化合物為黃色固體(0.298g,66％)。
[0222] MS(ESI,pos.ion)m/z:317.1[M+H]+；
[0223] 1H?NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm)8.45(dt,J＝13.3,6.7Hz,1H),8.30-8.19(m,1H),7.35(dd,J＝11.2,9.0Hz,1H),3.34-3.31(m,2H),3.17(s,3H),1.74(s,3H).
[0224] 步驟7)(R)-叔丁基(5-(2-氟-5-硝基苯基)-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二嗪-3-亞基)氨基甲酸酯的合成
[0225] 在25℃下將(R)-5-(2-氟-5-硝基苯基)-3-亞氨基-2,5-二甲基-1,2,4-噻二嗪1,1-二氧代化物(0.47g,1.49mmol)、三乙胺(0.3g,2.96mmol)和二氯甲烷(10mL)加入到100mL
單口圓底燒瓶中，然后加入Boc酸酐(0.500g,2.29mmol)，繼續(xù)攪拌反應(yīng)12小時(shí)；停止反應(yīng)，減壓旋干，柱層析分離純化(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝6/1)得到標(biāo)題化合物為白色固體
(0.5g,81％)。
[0226] MS(ESI,pos.ion)m/z:361.0[M+H-56]+；
[0227] 1H?NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)7.28(s,1H),6.91(dd,J＝11.9,8.5Hz,1H),6.61(dt,J＝9.4,2.7Hz,2H),4.29(dd,J＝14.1,2.1Hz,1H),3.68(d,J＝14.1Hz,1H),3.27(s,
3H),1.88(s,3H),1.57(s,9H).
[0228] 步驟8)(R)-叔丁基(5-(5-氨基-2-氟苯基)-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二嗪-3-亞基)氨基甲酸酯的合成
[0229] 在25℃下將(R)-叔丁基(5-(2-氟-5-硝基苯基)-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二嗪-3-亞基)氨基甲酸酯(0.5g,1.2mmol)、鈀碳(150mg)和甲醇(15mL)加入到100mL單口
圓底燒瓶中，氫氣球下攪拌反應(yīng)24小時(shí)。停止反應(yīng)，過濾，濾液減壓旋干，柱層析分離純化(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝3/1)得到標(biāo)題化合物為白色固體(0.424g,91.4％)。
[0230] MS(ESI,pos.ion)m/z:387.2[M+H]+；
[0231] 1H?NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)7.28(s,1H),6.91(dd,J＝11.9,8.5Hz,1H),6.61(dt,J＝9.4,2.7Hz,2H),4.29(dd,J＝14.1,2.1Hz,1H),3.68(d,J＝14.1Hz,1H),3.27(s,
3H),1.88(s,3H),1.57(s,9H).
[0232] 步驟9)(R)-叔丁基(5-(2-氟-5-(5-苯基吡啶甲酰氨基)苯基)-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二嗪-3-亞基)氨基甲酸酯的合成
[0233] 將5-苯基吡啶甲酸(258mg,1.3mmol)溶于二氯甲烷(5mL)，0℃下加入N,N-二異丙基乙胺(251mg,1.94mmol)，無水硫酸鎂(300mg)和HATU(492mg,1.23mmol)，0℃下攪拌0.5小時(shí)。加入(R)-叔丁基(5-(5-氨基-2-氟苯基)-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二嗪-3-亞
基)氨基甲酸酯(250mg,0.65mmol)，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，繼續(xù)在0℃下攪拌1小時(shí)，然后轉(zhuǎn)移至室溫反應(yīng)3小時(shí)。停止反應(yīng)，加水(30mL)洗滌，二氯甲烷萃取(30mL×2)，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，濃縮有機(jī)相，柱層析分離純化(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝5/1)得到標(biāo)題化合物為淡黃色固體(0.35g,95％)。
[0234] 1H?NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)10.70(s,1H),10.05(s,1H),8.83(d,J＝1.5Hz,1H),8.34(d,J＝8.1Hz,1H),8.11(dd,J＝8.1,2.2Hz,1H),8.02(ddd,J＝8.7,4.1,2.7Hz,1H),
7.67-7.65(m,2H),7.62(dd,J＝7.2,2.6Hz,1H),7.56(t,J＝7.3Hz,2H),7.49(dd,J＝8.4,
6.1Hz,1H),7.17(dd,J＝11.6,8.9Hz,1H),4.33(dd,J＝14.1,1.5Hz,1H),3.75(d,J＝
14.1Hz,1H),3.30(s,3H),1.95(s,3H),1.62(s,9H).
[0235] 步驟10)(R)-N-(4-氟-3-(3-亞氨基-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二嗪-5-基)苯基)-5-苯基吡啶酰胺的合成
[0236] 將(R)-叔丁基(5-(2-氟-5-(5-苯基吡啶甲酰氨基)苯基)-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二嗪-3-亞基)氨基甲酸酯(350mg,0.62mmol)溶于二氯甲烷(10mL)，然后加入
氯化氫乙酸乙酯溶液(10mL)，室溫反應(yīng)2小時(shí)。停止反應(yīng)，減壓旋干，加入飽和碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)至pH＝8～9，二氯甲烷萃取(30mL×2)，無水硫酸鈉干燥，濃縮有機(jī)相，柱層析分離純化(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝30/1)得到標(biāo)題化合物為淡黃色固體(0.27g,94％)。
[0237] MS(ESI,pos.ion)m/z:468.6[M+H]+；
[0238] 1H?NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)9.96(s,1H),8.73(d,J＝1.6Hz,1H),8.24(d,J＝8.1Hz,1H),8.05-7.99(m,2H),7.74-7.70(m,1H),7.63-7.61(m,2H),7.53(t,J＝7.3Hz,
2H),7.49-7.46(m,1H),7.07(dd,J＝11.7,8.8Hz,1H),3.96(d,J＝13.7Hz,1H),3.71(d,J＝
14.0Hz,1H),3.25(s,3H),1.82(s,3H).
[0239] 實(shí)施例2(R)-N-(4-氟-3-(3-亞氨基-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二嗪-5-基)苯基)-5-(4-氟苯基)吡啶酰胺的合成
[0240]
[0241] 步驟1)(R)-叔丁基(5-(2-氟-5-(5-(4-氟苯基)吡啶甲酰氨基)苯基)-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二嗪-3-亞基)氨基甲酸酯的合成
[0242] 將5-(4-氟苯基)吡啶甲酸(281mg,1.3mmol)溶于二氯甲烷(5mL)，0℃下加入N,N-二異丙基乙胺(251mg,1.94mmol)，無水硫酸鎂(300mg)和HATU(492mg,1.23mmol)，0℃攪拌
0.5小時(shí)。加入(R)-叔丁基(5-(5-氨基-2-氟苯基)-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二
嗪-3-亞基)氨基甲酸酯(250mg,0.65mmol)，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，繼續(xù)在0℃下攪拌1小時(shí)，然后轉(zhuǎn)移至室溫反應(yīng)3小時(shí)。停止反應(yīng)，加水(30mL)洗滌，二氯甲烷萃取(30mL×2)，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，濃縮有機(jī)相，柱層析分離純化(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝5/1)得到標(biāo)題化合物為淡黃色固體(0.35g,92％)。
[0243] MS(ESI,pos.ion)m/z:586.2[M+H]+；
[0244] 1H?NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)10.70(s,1H),10.02(s,1H),8.78(d,J＝1.6Hz,1H),8.33(d,J＝8.1Hz,1H),8.06(dd,J＝8.1,2.2Hz,1H),8.03-7.99(m,1H),7.65-7.61(m,3H),
7.25(t,J＝8.6Hz,2H),7.17(dd,J＝11.6,8.9Hz,1H),4.34(dd,J＝14.1,1.6Hz,1H),3.74
(d,J＝14.2Hz,1H),3.29(s,3H),1.95(s,3H),1.62(s,9H).
[0245] 步驟2)(R)-N-(4-氟-3-(3-亞氨基-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二嗪-5-基)苯基)-5-(4-氟苯基)吡啶酰胺的合成
[0246] 將(R)-叔丁基(5-(2-氟-5-(5-(4-氟苯基)吡啶甲酰氨基)苯基)-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二嗪-3-亞基)氨基甲酸酯(350mg,0.6mmol)溶于二氯甲烷(10mL)，然后
加入氯化氫乙酸乙酯溶液(10mL)，室溫反應(yīng)2小時(shí)。停止反應(yīng)，減壓旋干，加入飽和碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)至pH＝8～9，二氯甲烷萃取(30mL×2)，無水硫酸鈉干燥，濃縮有機(jī)相，柱層析分離純化(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝30/1)得到標(biāo)題化合物為淡黃色固體(0.26g,90％)。
[0247] MS(ESI,pos.ion)m/z:486.6[M+H]+；
[0248] 1H?NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)9.95(s,1H),8.68(d,J＝1.7Hz,1H),8.23(d,J＝8.1Hz,1H),7.99(dd,J＝8.2,2.1Hz,2H),7.75-7.71(m,1H),7.60-7.57(m,2H),7.22(t,J＝
8.6Hz,2H),7.07(dd,J＝11.6,8.8Hz,1H),4.00(d,J＝13.6Hz,1H),3.72(d,J＝14.0Hz,
1H),3.25(s,3H),1.82(s,3H).
[0249] 實(shí)施例3(R)-5-(4-氯苯基)-N-(4-氟-3-(3-亞氨基-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二嗪-5-基)苯基)吡啶酰胺的合成
[0250]
[0251] 步驟1)(R)-叔丁基(5-(5-(5-(4-氯苯基)吡啶甲酰氨基)-2-氟苯基)-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二嗪-3-亞基)氨基甲酸酯的合成
[0252] 將5-(4-氯苯基)吡啶甲酸(302mg,1.3mmol)溶于二氯甲烷(5mL)，0℃下加入N,N-二異丙基乙胺(251mg,1.94mmol)，無水硫酸鎂(300mg)和HATU(492mg,1.23mmol)，0℃攪拌
0.5小時(shí)。加入(R)-叔丁基(5-(5-氨基-2-氟苯基)-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二
嗪-3-亞基)氨基甲酸酯(250mg,0.65mmol)，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，繼續(xù)在0℃下攪拌1小時(shí)，然后轉(zhuǎn)移至室溫反應(yīng)3小時(shí)。停止反應(yīng)，加水(30mL)洗滌，二氯甲烷萃取(30mL×2)，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，濃縮有機(jī)相，柱層析分離純化(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝5/1)得到標(biāo)題化合物為淡黃色固體(0.35g,89％)。
[0253] 1H?NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)10.70(s,1H),10.02(s,1H),8.79(d,J＝1.6Hz,1H),8.34(d,J＝8.1Hz,1H),8.07(dd,J＝8.1,2.2Hz,1H),8.01(ddd,J＝8.8,4.1,2.7Hz,1H),
7.62(dd,J＝7.2,2.6Hz,1H),7.60-7.58(m,2H),7.52(d,J＝8.6Hz,2H),7.17(dd,J＝11.6,
8.9Hz,1H),4.33(dd,J＝14.1,1.6Hz,1H),3.74(d,J＝14.2Hz,1H),3.29(s,3H),1.95(s,
3H),1.62(s,9H).
[0254] 步驟2)(R)-5-(4-氯苯基)-N-(4-氟-3-(3-亞氨基-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二嗪-5-基)苯基)吡啶酰胺的合成
[0255] 將(R)-叔丁基(5-(5-(5-(4-氯苯基)吡啶甲酰氨基)-2-氟苯基)-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二嗪-3-亞基)氨基甲酸酯(350mg,0.6mmol)溶于二氯甲烷(10mL)，然后
加入氯化氫乙酸乙酯溶液(10mL)，室溫反應(yīng)2小時(shí)。停止反應(yīng)，減壓旋干，加入飽和碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)pH＝8～9，二氯甲烷萃取(30mL×2)，無水硫酸鈉干燥，濃縮有機(jī)相，柱層析分離純化(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝30/1)得到標(biāo)題化合物為淡黃色固體(0.25g,86％)。
[0256] MS(ESI,pos.ion)m/z:502.5[M+H]+；
[0257] 1H?NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)9.93(s,1H),8.66(d,J＝1.6Hz,1H),8.22(d,J＝8.1Hz,1H),7.99(dt,J＝5.2,2.1Hz,2H),7.74-7.70(m,1H),7.52(q,J＝8.7Hz,4H),7.07
(dd,J＝11.6,8.8Hz,1H),3.97(d,J＝13.6Hz,1H),3.70(d,J＝14.0Hz,1H),3.24(s,3H),
1.81(s,3H).
[0258] 實(shí)施例4(R)-5-(4-氰基苯基)-N-(4-氟-3-(3-亞氨基-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二嗪-5-基)苯基)吡啶酰胺的合成
[0259]
[0260] 步驟1)(R)-叔丁基(5-(5-(5-(4-氰基苯基)吡啶甲酰氨基)-2-氟苯基)-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二嗪-3-亞基)氨基甲酸酯的合成
[0261] 將5-(4-氰基苯基)吡啶甲酸(290mg,1.3mmol)溶于二氯甲烷(5mL)，0℃下加入N,N-二異丙基乙胺(251mg,1.94mmol)，無水硫酸鎂(300mg)和HATU(492mg,1.23mmol)，0℃攪
拌0.5小時(shí)。加入(R)-叔丁基(5-(5-氨基-2-氟苯基)-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二
嗪-3-亞基)氨基甲酸酯(250mg,0.65mmol)，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，繼續(xù)在0℃下攪拌1小時(shí)，然后轉(zhuǎn)移至室溫反應(yīng)3小時(shí)。停止反應(yīng)，加水(30mL)洗滌，二氯甲烷萃取(30mL×2)，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，濃縮有機(jī)相，柱層析分離純化(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝5/1)得到標(biāo)題化合物為淡黃色固體(0.35g,91％)。
[0262] 1H?NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)10.00(s,1H),8.83(d,J＝1.6Hz,1H),8.38(d,J＝8.1Hz,1H),8.12(dd,J＝8.1,2.2Hz,1H),8.00(ddd,J＝8.7,4.1,2.8Hz,1H),7.85(d,J＝
8.4Hz,2H),7.77(d,J＝8.5Hz,2H),7.63(dd,J＝7.2,2.6Hz,1H),7.17(dd,J＝11.6,8.9Hz,
1H),4.34(dd,J＝14.1,1.7Hz,1H),3.73(d,J＝14.2Hz,1H),3.29(s,3H),1.95(s,3H),1.61
(s,9H).
[0263] 步驟2)(R)-5-(4-氰基苯基)-N-(4-氟-3-(3-亞氨基-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二嗪-5-基)苯基)吡啶酰胺的合成
[0264] 將(R)-叔丁基(5-(5-(5-(4-氰基苯基)吡啶甲酰氨基)-2-氟苯基)-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二嗪-3-亞基)氨基甲酸酯(350mg,0.6mmol)溶于二氯甲烷(10mL)，然
后加入氯化氫乙酸乙酯溶液(10mL)，室溫反應(yīng)2小時(shí)。停止反應(yīng)，減壓旋干，加入飽和碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)至pH＝8～9，二氯甲烷萃取(30mL×2)，無水硫酸鈉干燥，濃縮有機(jī)相，柱層析分離純化(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝30/1)得到標(biāo)題化合物為淡黃色固體(0.28g,96％)。
[0265] MS(ESI,pos.ion)m/z:493.6[M+H]+；
[0266] 1H?NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)9.92(s,1H),8.69(d,J＝1.6Hz,1H),8.26(d,J＝8.1Hz,1H),8.04(dd,J＝8.1,2.2Hz,1H),8.00(dd,J＝7.2,2.7Hz,1H),7.82(d,J＝8.4Hz,
2H),7.72(d,J＝8.4?Hz,3H),7.06(dd,J＝11.6,8.8Hz,1H),4.00(d,J＝13.9Hz,1H),3.69
(d,J＝14.0Hz,1H),3.23(s,3H),1.80(s,3H).
[0267] 實(shí)施例5(R)-N-(4-氟-3-(3-亞氨基-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二嗪-5-基)苯基)-5-(3-氟苯基)吡啶酰胺的合成
[0268]
[0269] 步驟1)(R)-叔丁基(5-(2-氟-5-(5-(3-氟苯基)吡啶甲酰氨基)苯基)-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二嗪-3-亞基)氨基甲酸酯的合成
[0270] 將5-(3-氟苯基)吡啶甲酸(281mg,1.3mmol)溶于二氯甲烷(5mL)，0℃下加入N,N-二異丙基乙胺(251mg,1.94mmol)，無水硫酸鎂(300mg)和HATU(492mg,1.23mmol)，0℃攪拌
0.5小時(shí)。加入(R)-叔丁基(5-(5-氨基-2-氟苯基)-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二
嗪-3-亞基)氨基甲酸酯(250mg,0.65mmol)，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，繼續(xù)在0℃下攪拌1小時(shí)，然后轉(zhuǎn)移至室溫反應(yīng)3小時(shí)。停止反應(yīng)，加水(30mL)洗滌，二氯甲烷萃取(30mL×2)，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，濃縮有機(jī)相，柱層析分離純化(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝5/1)得到標(biāo)題化合物為淡黃色固體(0.35g,92％)。
[0271] 1H?NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)10.70(s,1H),10.02(s,1H),8.81(d,J＝1.6Hz,1H),8.35(d,J＝8.1Hz,1H),8.09(dd,J＝8.1,2.2Hz,1H),8.01(ddd,J＝8.7,4.1,2.7Hz,1H),
7.63(dd,J＝7.2,2.6Hz,1H),7.52(td,J＝7.9,5.9Hz,1H),7.44(d,J＝8.0Hz,1H),7.37-
7.34(m,1H),7.18(ddd,J＝16.5,8.8,5.3Hz,2H),4.33(dd,J＝14.1,1.5Hz,1H),3.74(d,J
＝14.1Hz,1H),3.29(s,3H),1.95(s,3H),1.62(s,9H).
[0272] 步驟2)(R)-N-(4-氟-3-(3-亞氨基-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二嗪-5-基)苯基)-5-(3-氟苯基)吡啶酰胺的合成
[0273] 將(R)-叔丁基(5-(2-氟-5-(5-(3-氟苯基)吡啶甲酰氨基)苯基)-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二嗪-3-亞基)氨基甲酸酯(350mg,0.6mmol)溶于二氯甲烷(10mL)，然后
加入氯化氫乙酸乙酯溶液(10mL)，室溫反應(yīng)2小時(shí)。停止反應(yīng)，減壓旋干，加入飽和碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)至pH＝8～9，二氯甲烷萃取(30mL×2)，無水硫酸鈉干燥，濃縮有機(jī)相，柱層析分離純化(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝30/1)得到標(biāo)題化合物為淡黃色固體(0.26g,90％)。
[0274] MS(ESI,pos.ion)m/z:486.6[M+H]+；
[0275] 1H?NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)9.95(s,1H),8.69(d,J＝1.6Hz,1H),8.23(d,J＝8.1Hz,1H),8.00(dd,J＝8.0,2.2Hz,2H),7.72-7.69(m,1H),7.49(td,J＝8.0,6.0Hz,1H),
7.39(d,J＝8.1Hz,1H),7.32-7.29(m,1H),7.17(td,J＝8.3,1.8Hz,1H),7.06(dd,J＝11.7,
8.8Hz,1H),4.02(d,J＝13.5Hz,1H),3.72(d,J＝14.0Hz,1H),3.25(s,3H),1.82(s,3H).
[0276] 實(shí)施例6(R)-N-(4-氟-3-(3-亞氨基-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二嗪-5-基)苯基)-5-(3-氯苯基)吡啶酰胺的合成
[0277]
[0278] 步驟1)(R)-叔丁基(5-(2-氟-5-(5-(3-氯苯基)吡啶甲酰氨基)苯基)-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二嗪-3-亞基)氨基甲酸酯的合成
[0279] 將5-(3-氯苯基)吡啶甲酸(302mg,1.3mmol)溶于二氯甲烷(5mL)，0℃下加入N,N-二異丙基乙胺(251mg,1.94mmol)，無水硫酸鎂(300mg)和HATU(492mg,1.23mmol)，0℃攪拌
0.5小時(shí)。加入(R)-叔丁基(5-(5-氨基-2-氟苯基)-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二
嗪-3-亞基)氨基甲酸酯(250mg,0.65mmol)，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，繼續(xù)在0℃下攪拌1小時(shí)，然后轉(zhuǎn)移至室溫反應(yīng)3小時(shí)。停止反應(yīng)，加水(30mL)洗滌，二氯甲烷萃取(30mL×2)，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，濃縮有機(jī)相，柱層析分離純化(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝5/1)得到標(biāo)題化合物為淡黃色固體(0.35g,90％)。
[0280] 1H?NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)10.69(s,1H),10.02(s,1H),8.82-8.76(m,1H),8.35(d,J＝8.1Hz,1H),8.08(dd,J＝8.1,2.2Hz,1H),7.99(ddd,J＝8.7,4.1,2.7Hz,1H),7.64
(t,J＝4.8Hz,2H),7.55-7.51(m,1H),7.48(dd,J＝9.4,4.9Hz,2H),7.17(dd,J＝11.6,
8.9Hz,1H),4.33(dd,J＝14.1,1.5Hz,1H),3.74(d,J＝14.1Hz,1H),3.29(s,3H),1.95(s,
3H),1.62(s,9H).
[0281] 步驟2)(R)-N-(4-氟-3-(3-亞氨基-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二嗪-5-基)苯基)-5-(3-氯苯基)吡啶酰胺的合成
[0282] 將(R)-叔丁基(5-(2-氟-5-(5-(3-氯苯基)吡啶甲酰氨基)苯基)-2,5-二甲基-1,1-二氧代-1,2,4-噻二嗪-3-亞基)氨基甲酸酯(360mg,0.58mmol)溶于二氯甲烷(10mL)，然
后加入氯化氫乙酸乙酯溶液(10mL)，室溫反應(yīng)2小時(shí)。停止反應(yīng)，減壓旋干，加入飽和碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)至pH＝8～9，二氯甲烷萃取(30mL×2)，無水硫酸鈉干燥，濃縮有機(jī)相，柱層析分離純化(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝30/1)得到標(biāo)題化合物為淡黃色固體(0.27g,93％)。
[0283] MS(ESI,pos.ion)m/z:502.0[M+H]+；
[0284] 1H?NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)9.98(s,1H),8.72(d,J＝1.6Hz,1H),8.27(d,J＝8.1Hz,1H),8.02(dd,J＝8.1,2.2Hz,1H),7.98(dd,J＝7.2,2.6Hz,1H),7.78-7.75(m,1H),
7.60(s,1H),7.52-7.49(m,1H),7.47-7.45(m,2H),7.09(dd,J＝11.7,8.8Hz,1H),4.04(d,J
＝13.9Hz,1H),3.78(d,J＝14.0Hz,1H),3.29(s,3H),1.85(s,3H).
[0285] 生物試驗(yàn)
[0286] 實(shí)施例A：BACE-1抑制劑酶水平體外活性評價(jià)方法
[0287] 實(shí)驗(yàn)方法
[0288] 1.1X?assay?buffer及受試化合物配制
[0289] (1)1X?assay?buffer(20nM?PIPES,pH5.0；0.1％Brij-35；10％Glycerol)
[0290] (2)受試化合物配制
[0291] 采用100％DMSO分別將受試化合物稀釋為1mM、對照化合物MK-8931稀釋為100μM。在Echo?384孔板(Labcyte，P-05525)中分別加入45μL，1mM受試化合物溶液和100μM?MK-
8931溶液。受試化合物以3倍稀釋梯度精密稀釋9次。通過Echo?550(Labcyte?echo?550聲波移液系統(tǒng)設(shè)備)將100nL受試化合物溶液從起始板轉(zhuǎn)移至測試板(PerkinElmer,
Cat.No.6008289)。向?qū)φ湛字校尤?00nL?DMSO。所有孔中DMSO終濃度為1％。
[0292] 2.BACE-1酶溶液配制
[0293] (1)采用1X?assay?buffer配制BACE-1酶溶液，濃度為測試終濃度兩倍，測試終濃度為3nM。
[0294] (2)采用電動(dòng)多道移液器在測試板中每孔加入5μL?BACE-1酶溶液，溶液快速離心。
[0295] (3)室溫孵育15min。
[0296] 3.2X?APP底物溶液配制
[0297] (1)采用1X?assay?buffer配制APP底物溶液，溶液濃度為測試終濃度兩倍。
[0298] 終濃度：Biotin-APP?substrate-K?25nM；未生物素化和未標(biāo)記APP底物5μM。
[0299] (2)采用電動(dòng)多道移液器在測試板中每孔加入5μL?APP底物溶液，開始反應(yīng)。
[0300] (3)溶液快速離心。
[0301] 4.反應(yīng)
[0302] 密封測試板后，在28℃孵育4h。
[0303] 5.Homogeneous?Time-Resolved?Fluorescence(HTRF)檢測
[0304] (1)準(zhǔn)備2X?detection?buffer(25mM?Tris-HCl,pH?8.0；0.0005％Brij-35；250mM?KF)
[0305] (2)采用2X?detection?buffer配制Streptavidin-XLent溶液，濃度為測試終濃度(10μg/mL)2倍。
[0306] (3)采用電動(dòng)多道移液器在測試板每孔加入10μL?Streptavidin-XLent溶液以終止反應(yīng)。
[0307] (4)離心機(jī)快速混勻后，在25℃平衡60min。
[0308] 6.收集數(shù)據(jù)
[0309] 在EnVison軟件中收集數(shù)據(jù)。
[0310] 7.數(shù)據(jù)分析
[0311] (1)從EnVison軟件中拷貝出HTRF熒光比值(665nm/615nm*10000)。
[0312] (2)將HTRF熒光比值轉(zhuǎn)換為百分比抑制值。對于最大值和最小值處理：數(shù)值超過Avg±3SD視為偏離值。偏離值刪除的比例控制在20％以內(nèi)。
[0313] a.抑制率＝(樣品比值-最小值)/(最大值-最小值)*100
[0314] b.最小值為BACE-1酶和APP底物的HTRF熒光比值，最大值為assay?buffer和APP底物的HTRF比值。
[0315] (3)數(shù)據(jù)以Excel表格形式呈現(xiàn)，曲線采用GraphPad?Prism?5擬合。
[0316] (4)各化合物IC50值計(jì)算采用GraphPad?Prism?5四參數(shù)擬合模型：
[0317] Y＝Bottom+(Top-Bottom)/(1+(IC50/X)^HillSlope)，Y為％抑制率，X為化合物濃度。
[0318] 結(jié)果見表A。
[0319] 表A?本發(fā)明化合物對BACE-1酶水平體外抑制作用測試結(jié)果
[0320]實(shí)施例號 IC50(μM) 實(shí)施例號 IC50(μM)
實(shí)施例1 0.13 實(shí)施例4 0.64
實(shí)施例2 0.50 實(shí)施例5 0.10
實(shí)施例3 0.17 實(shí)施例6 0.12
[0321] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，本發(fā)明化合物具有較好的BACE-1抑制作用。
[0322] 在本說明書的描述中，參考術(shù)語“一個(gè)實(shí)施例”、“一實(shí)施方案”、“一些實(shí)施例”、“示例”、“具體示例”或“一些示例”等的描述意指結(jié)合該實(shí)施例、實(shí)施方案或示例描述的具體特征、結(jié)構(gòu)、材料或者特點(diǎn)包含于本發(fā)明的至少一個(gè)實(shí)施例、實(shí)施方案或示例中。在本說明書中，對上述術(shù)語的示意性表述不必須針對的是相同的實(shí)施例、實(shí)施方案或示例。而且，描述的具體特征、結(jié)構(gòu)、材料或者特點(diǎn)可以在任一個(gè)或多個(gè)實(shí)施例、實(shí)施方案或示例中以合適的方式結(jié)合。此外，在不相互矛盾的情況下，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以將本說明書中描述的不同實(shí)施例、實(shí)施方案或示例以及不同實(shí)施例、實(shí)施方案或示例的特征進(jìn)行結(jié)合和組合。
[0323] 盡管上面已經(jīng)示出和描述了本發(fā)明的實(shí)施例，可以理解的是，上述實(shí)施例是示例性的，不能理解為對本發(fā)明的限制，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員在本發(fā)明的范圍內(nèi)可以對上述
實(shí)施例進(jìn)行變化、修改、替換和變型。
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